Rh表型同型紅細胞輸注效果評價

劉麗娟 杜肖剛 潘慧芳 李 偉 馬登峰 郭曉玲

紅細胞輸注前需常規進行血型鑒定、不規則抗體篩查和交叉配血?！杜R床輸血技術規范》[1]規定交叉配血前常規檢測ABO、RhD血型。近來不少學者提出除ABO-RhD同型外，檢測Rh血型系統抗原，進行Rh表型同型輸注，可提高輸注效果[2-4]。Rh血型系統的重要性僅次于ABO血型系統，且是最復雜的血型系統，共有50余個抗原，其中最主要的抗原為D、C、E、c、e，抗原免疫原性強，可引起溶血性輸血反應。本研究對我院進行ABO-Rh(DCcEe)同型輸注患者臨床資料進行回顧性分析，探討輸血前進行Rh血型系統抗原檢測對輸血效果的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象

回顧分析我院2020年6月1日至2020年12月31日161例輸注紅細胞患者的臨床資料。納入標準：(1)輸注紅細胞患者符合《臨床輸血技術規范》[1]輸注指征；(2)輸血前后24 h內均有血紅蛋白(Hb)檢測結果。排除標準：(1)紅細胞輸注后發生繼續丟失或體外循環丟失；(2)紅細胞輸注前后發生血液稀釋；(3)紅細胞輸注后發生急性溶血。

1.2 方法

1.2.1獻血者、受血者血型鑒定 配合型輸注組獻血者、受血者樣本進行ABO正反定型、RhD抗原鑒定，同型輸注組獻血者、受血者樣本進行ABO正反定型、Rh(CcDEe)抗原鑒定。ABO正反定型RhD、C、E抗原鑒定使用微柱凝膠血型鑒定卡(戴安娜DG Gel ABO-CDE)。Rh c、e抗原鑒定采用試管法進行檢測，使用抗-c、抗-e(IgM)試劑(長春博德生物技術公司)，嚴格按照說明書操作，雙人操作，核對結果。

1.2.2不規則抗體篩查及鑒定 受血者樣本進行微柱凝膠抗體篩查試驗(戴安娜DG Gel Coombs)?？贵w篩查陽性樣本進行抗體鑒定試驗，確定抗體特異性，篩選細胞、鑒定細胞均由江蘇力博醫藥生物技術股份有限公司提供。

1.2.3交叉配血試驗 2組配血均為獻血者、受血者ABO、RhD同型，在輸血前進行交叉配血試驗，采用微柱凝膠抗人球蛋白卡(戴安娜DG Gel Coombs)。同型輸注組交叉配血前，對照獻血者、受血者Rh血型，采用同型輸注。同型輸注原則為：獻血者Rh表型與受血者完全一致(如：CcEe患者選擇CcEe血液)，或受血者某種Rh抗原陽性，獻血者相應抗原陰性(如：CcEe患者選擇CcEE血液)

1.2.4直接抗人球蛋白試驗(DAT) 交叉配血次側出現凝集時，對受血者樣本進行DAT。將受血者紅細胞使用生理鹽水洗滌3次，稀釋后加入微柱凝膠卡(戴安娜DG Gel Coombs)，離心觀察結果。

1.3 觀察指標

紅細胞輸注效果分析：收集2組受血者紅細胞輸注前后24 h內血紅蛋白值，判斷輸注效果。輸注無效標準[5]：輸血后Hb升高值未達到預期值的為輸注無效，Hb升高值達到或超過了預期值的為輸注有效。Hb升高預期值(g·L-1)=供者Hb(g·L-1)×輸入量(L)/患者體質量(kg)×0.085(L·kg-1)×90%(輸入量以全血量為標準，各種RBC制劑折算為對應全血量；供者體質量為兒童按0.09 L·kg-1計；90%為檢驗誤差)。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 受血者一般情況

同型輸注組76例中有血液病患者20例(白血病10例、多發性骨髓瘤4例、骨髓增生異常綜合征3例、再生障礙性貧血2例、淋巴瘤1例)，惡性腫瘤患者16例(胃癌7例，結直腸癌3例、肝癌2例、卵巢癌1例、膀胱癌1例、腎癌1例、食管癌1例)，其他疾病40例。配合型輸注組85例中有血液病患者27例(白血病14例、骨髓增生異常綜合征5例、多發性骨髓瘤3例、再生障礙性貧血3例、淋巴瘤2例)，惡性腫瘤患者10例(胃癌4例、食管癌2例、肝癌1例、肺癌1例、乳腺癌1例、胰腺癌1例)，其他疾病48例。同型輸注組與配合型輸注組性別、年齡、疾病分布差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組患者一般情況比較

2.2 2組輸血情況

同型輸注組76例輸血患者，共輸注184次(第1次輸注76人次、第2次輸注54人次、第3次輸注28人次、第4次及以上輸注26人次),配合型輸注組85例患者，共輸注紅細胞207次(第1次輸注85人次、第2次輸注51人次、第3次輸注29人次、第4次輸注及以上42人次)。2組不同輸注次數人次差異無統計學意義(χ2=3.029,P=0.387)。

2.3 紅細胞輸注效果分析

同型輸注組有效率88.04%(162/184)高于配合型輸注組79.23%(164/207)，差異有統計學意義(χ2=5.463,P=0.019)。同型輸注組不同輸注次數間輸注有效率差異無統計學意義(P>0.05)，配合型輸注組不同輸注次數間輸注有效率不同，差異有統計學意義(P<0.05)。

比較2組不同輸注次數紅細胞的輸注有效率，第1次、第2次、第3次輸注時，2組的輸注效果差異無統計學意義，4次及以上的輸注，同型輸注組輸注有效率高于配合型輸注組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組紅細胞不同輸注次數與效果分析 例(%)

2.4 不規則抗體、DAT產生情況分析

161例受血者，輸血前不規則抗體陽性5例，分別為抗-E 3例，抗-cE 1例和抗-M 1例;DAT陽性8例。2組受血者輸血后均無新增不規則抗體產生，DAT陰性轉為陽性1例，為配合型輸注組受血者。

3 討論

紅細胞輸注在臨床上主要應用于急慢性貧血患者，紅細胞輸注目的是提高患者Hb含量，改善缺氧狀態。對于血容量正常的成年人，在無失血、血液稀釋或溶血的情況下，輸注紅細胞后，Hb未達到預期值稱為紅細胞輸注無效。目前我國輸血前常規檢測ABO、Rh(D)抗原，未對Rh(CcEe)抗原進行普遍檢測，對于反復輸血患者，增加了產生同種抗體的幾率，導致配血困難，輸注無效率增加。本研究通過比較Rh表型同型輸注患者輸注與配合性輸注患者輸注有效率的差異，分析Rh表型同型輸注的重要意義。

近來有文獻報道，臨床紅細胞輸注無效率可達18.2%。紅細胞輸注無效與患者疾病種類、輸血次數、年齡、性別關系密切，女性高于男性、老年患者高于兒童和成年人，血液病、惡性腫瘤患者的紅細胞輸注無效率更是高達37%和42.8%[6-7]。本研究分析2組患者的性別、年齡、疾病分布、不同輸注次數患者等相關因素，差異無統計學意義，可排除其對結果的干擾。

本研究比較2組患者輸注無效發生情況，配合型輸注組無效率明顯高于同型輸注組，配合型輸注組輸注無效率隨輸注次數增加明顯增高，且通過比較不同輸注次數輸注有效率，在紅細胞輸注第4次及以上時，配合型輸注組輸注無效率明顯高于同型輸注組，提示2組輸注無效率的差異主要在輸注次數較多時，輸注無效的發生與輸注次數有密切關系，隨輸血次數的增加，無效率呈上升趨勢。輸注無效原因復雜，包括免疫因素和非免疫因素，反復輸血患者輸注無效發生率高，可能與體內存在不同血型的不規則抗體有關[8]。不規則抗體的發生與輸血史、妊娠史有關，且隨著輸血次數增加，患者產生不規則抗體的概率也隨之增高[9-10]。根據文獻報道，同種抗體分布于Rh、MNS、Kidd、及Lewis等血型系統，Rh血型系統抗體最多見，占52.38%～70.76%[11-12]。本研究中同型輸注組不同輸注次數間輸注有效率差異無統計學意義，提示通過Rh表型同型輸注避免Rh血型抗體的產生，可使輸注效果明顯好于隨機輸注。此結果與多篇文獻報道一致[2-4]。

本次回顧性分析中，161例患者在輸血前檢測出5例不規則抗體陽性，陽性率2.84%，其中4例發生在Rh血型系統(查閱病史，這5名患者到我院就診前均有外院輸血史)。配合型輸注組第4次及以上輸注有效率顯著降低，但未檢測到新增不規則抗體，分析原因一方面與研究例數偏少有關，另一方面因臨床工作中檢測方法的局限性和紅細胞血型抗原的多樣性，當抗體效價較低時存在漏檢可能[13-14]。效價較低的抗體未被檢出，致使患者輸血后發生無法解釋的Hb不升或下降的現象。

本次分析中，配合型輸血組1例患者初次檢測DAT陰性，在后續的血液輸注時發生交叉配血次側凝集，DAT陽性。紅細胞表面被不完全抗體或補體致敏時DAT陽性，常用于自身免疫性溶血性貧血(AIHA)、藥物性溶血性貧血、新生兒溶血性貧血及輸注不相合血液所致溶血性輸血反應等檢測。輸血前DAT陰性，輸血后DAT陽性提示紅細胞發生溶血，對于反復輸血患者，選擇與患者抗原高度匹配的紅細胞，可有效避免溶血性輸血反應的發生[15-16]。

綜上所述，臨床輸血前除進行ABO-RhD抗原檢測外，還應把Rh(CcEe)抗原檢測列為常規，并進行ABO-Rh血型系統同型輸血，可以避免患者因反復輸血的免疫刺激，而增加不規則抗體產生幾率，減少患者輸血不良反應和風險，提高輸注效果。