BRAF V600E突變與甲狀腺乳頭狀癌頸部淋巴結轉移 及超聲特征相關性分析

楊繼輝 戴紅

湖南省人民醫院（湖南師范大學附屬第一醫院）超聲醫學科，湖南 長沙 410000

近年來，國內、外甲狀腺癌發病率呈快速增長，我國城市地區女性甲狀腺癌發病率發展至女性所有惡性腫瘤的第 4 位[1]。甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）是甲狀腺癌最主要的亞型[2]，其雖被稱為 “惰性癌”，但有部分患者會發生頸部淋巴結轉移及甲狀腺外侵犯，而當其侵犯喉和氣管時，患者生存率明顯下降[3-4]。研究發現，鼠類肉瘤濾過性毒菌致癌同源 體B1（V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1，BRAF）V600E 突變在PTC中顯著高表達，且BRAF V600E 突變與甲狀腺癌的發生、侵襲、淋巴結轉移和復發有關[2，5-7]。甲狀腺結節的回聲、縱橫比、邊緣、微鈣化等超聲特征有助于術前診斷PTC，BRAF V600E突變與這些超聲特征是否存在相關性的研究較少，且研究結論不一致。本文將通過回顧性分析甲狀腺癌超聲特征及淋巴結轉移與BRAF V600E突變是否存在的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集2020年7月至2021年12月在湖 南省人民 醫院乳甲外科行手術治療的PTC患者323例，術前均在本院進行了甲狀腺及頸部淋巴結超聲檢查。術后對病灶石蠟切片行免疫組化BRAF V600E突變檢測。323例患者中男性97例，女性226例，年齡13～73（40.2±12.0）歲。根據有無BRAF V600E基因突變分為突變組和無突變組。PTC、頸部淋巴結轉移及BRAF V600E突變采用本院病理科術后石蠟切片檢測結果。

納入標準：（1）經術后病理病灶石蠟切片確診為PTC；（2）行頸部淋巴結清掃并有病理結果；（3）術前未接受過內分泌治療、靶向治療、放射性核素治療及放射治療；（4）術后病灶行石蠟切片 BRAF V600E 免疫組化檢測。

排除標準：（1）未在本院行超聲檢查；（2）有頭頸部放射治療史；（3）未行頸部淋巴結清掃；（4）超聲資料、病理學資料與臨床資料不全者。

1.2 超聲檢查方法

使用MEDISON CVGEO H60、SONOSCAPE ST190、SAMSUNG RS80A彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率為10～12 MHz，患者取仰臥位，頭部后仰，使頸部充分暴露。使用高頻線陣探頭多切面掃查甲狀腺，觀察甲狀腺整體形態、內部回聲及血流情況；發現結節后，仔細記錄結節所在位置、大小、邊緣、內部和邊緣有無強回聲及大小、與被膜關系以及結節血流信號；掃查頸部淋巴結，并對淋巴結的形態、淋巴門結構、內部有無強回聲及液暗區并觀察血流模式進行記錄。多病灶患者分析直徑最大病灶。

1.3 統計學方法

應用SPSS 25.0統計軟件進行分析。計量資料以（±s）表示，計數資料以[n（%）]表示，BRAF V600E突變與無突變組間臨床病理特征、PTC超聲單因素分析采用χ2檢驗或Fisher精確概率檢驗，BRAF V600E突變與頸部淋巴結轉移和超聲征象相關性采用Spearman相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床病理特征比較

BRAF V600E突變組患者292例（男性91例，女性201例），年齡13～73（40.6±12.0歲）；無BRAF V600E基因突變組患者31例（男性6例，女性25例），年齡20～59（36.7±11.0）歲，BRAF V600E突變率為90.4%。兩組在年齡及性別組成方面差異均無統計學意義（P＞0.05，表1）。 存在BRAF V600E基因突變的PTC患者出現甲狀腺被膜侵犯及頸部淋巴結轉移的比例略高于無BRAF V600E基因突變的患者，但差異無統計學意義（P＞0.05，表1）。相關性分析顯示，BRAF V600E突變與PTC頸部淋巴結轉移無相關性（r=0.038，P=0.498）。

表1 兩組患者臨床特征比較[n（%）]

2.2 兩組超聲特征比較

BRAF V600E無突變組中結節微鈣化發生比例（80.6%）高于BRAF V600E突變組（57.9%），差異有統計學意義（P=0.014）。兩組患者結節數、大小、邊緣、縱橫比及內部回聲方面比較，差異無統計學意義（P＞0.05，表2）。相關性分析顯示，PTC患者BRAF V600E突變與PTC微鈣化具有弱負相關性（r=-0.137，P=0.014，表3）。

表2 PTCBRAFV600E突變組與BRAFV600E無突變組超聲特征比較[n（%）]

表3 BRAFV600E突變與PTC微鈣化相關性

3 討論

PTC中基因突變較為常見，且與腫瘤特定的臨床、組織病理學和生物學特征相關[8]，其中BRAF 基因備受關注，并被指南推薦用于甲狀腺結節術前FNA穿刺中[9]。免疫組織化學檢測 BRAF V600E 突變具有較高的靈敏度及特異度，與分子檢測BRAF V600E突變相比總體符合率達97.4%[10]，已在臨床中用于黑色素瘤、PTC等診斷。BRAF 基因可編碼 RAF 家族絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，調節絲裂原活化蛋白激酶/細胞外調節蛋 白 激 酶（motigen-activated proteinkinase/extracelluar regulated protein kinase，MAPK/ERK）信號通路，誘導腫瘤細胞過度增殖。據中國和韓國的研究顯示，BRAF V600E在PTC中的突變率在80%以上[4，9，11]，本研究納入的323例PTC患者中BRAF V600E突變率為90.4%，與既往研究一致。研究認為PTC中BRAF V600E突變在腫瘤局部浸潤中起重要作用，是PTC發生甲狀腺被膜侵犯及淋巴結轉移的危險因素[4，12-13]。一項Meta分析顯示[14]，BRAF V600E突變與女性患者、腫瘤多灶性、甲狀腺腺外擴散、淋巴結轉移、血管侵犯以及復發等臨床病理特征有相關性，而與患者年齡、腫瘤大小和遠處轉移等因素之間無相關性。本研究中BRAF V600E突變組被膜侵犯及淋巴結轉移比例稍高于突變組，但無統計學意義，與曲琪等研究一致[15-16]。其原因可能與本研究中微小乳頭狀癌患者所占比例較高有關，郭曼等[16]研究發現甲狀腺微小乳頭狀癌頸中央區淋巴結轉移與BRAF基因突變無相關性。

超聲因其可清楚顯示甲狀腺腫塊的大小、形態、邊緣及微鈣化等特征成為甲狀腺影像學檢查的首選。甲狀腺結節的回聲、縱橫比、邊緣、微鈣化等超聲特征與BRAF V600E突變相關性的既往研究中結論不盡一致。Park等[17]研究發現BRAF V600E突變和無BRAF V600E PTC超聲特征之間沒有顯著差異。Lee等[18]研究認為甲狀腺癌內微鈣化與BRAF基因有關。Kabaker等[19]在對 ≥1 cm 的PTC的超聲特征與BRAF V600E突變相關性研究顯示，BRAF V600E突變與大多數可疑惡性超聲表現相關，包括縱橫比、邊界不清、粗或微鈣化。國內多項研究顯示[20-22]，BRAF V600E突變組中超聲表現為病灶多發、邊緣不光整、鈣化、接觸被膜、結節內血流豐富的患者均顯著高于無BRAF V600E突變組，且與BRAF V600E突變具有相關性。超聲造影后病灶較前增大與BRAF V600E突變也存在相關性[23]。本研究中僅PTC內部微鈣化在兩組間差異具有統計學意義，且BRAF V600E突變與微鈣化為負相關，結果與上述研究存在差異。在今后的研究中應納入更多的非微小乳頭狀癌患者，并加大無BRAF V600E突變的PTC患者樣本量。

本研究未發現BRAF V600E突變與PTC頸部淋巴結轉移相關，無BRAF V600E突變的PTC中微鈣化比例更高。