張天靜,孫文松,劉 坤,沈寶宇
(遼寧省經濟作物研究所/遼寧省農業科學院藥用植物研究所,遼寧 遼陽 111000)
遼藁本(LigusticumjeholenseNakai et Kitag.)為傘形科(Apiales)藁本屬多年生草本植物,是東北地區常見道地藥材之一[1]。以干燥的根及根莖入藥,具有祛風,散寒,除濕,止痛。用于風寒感冒,巔頂疼痛,風濕肢節痹痛[2]。目前,遼寧清原、新賓、鳳城等地有大面積人工種植[3],隨著種植面積的不斷擴大和重茬種植習慣,遼藁本病蟲害發生率和發生面積加重[4],制約了遼藁本產業健康發展。遼藁本根腐病為近幾年發生的新病害,主要為害根及根莖部,嚴重發病造成整株死亡。高溫多雨季節,排水不暢,連作地塊發病嚴重,遼寧省經濟作物研究所課題組分離鑒定遼藁本根腐病病原菌為茄鐮孢菌,但針對遼藁本根腐病目前尚缺乏藥劑防治研究。本試驗采用菌絲速率法,對10種常用殺菌劑進行室內毒力測定,旨在篩選出防治遼藁本根腐病的高效藥劑,為遼藁本根腐病的科學防治提供指導。
供試菌株:2019年由遼寧省經濟作物研究所實驗室采用常規組織分離法分離純化并鑒定保存的茄鐮孢菌Fusariumsolani,菌株在PDA培養基上活化后置于25℃培養箱中暗培養。
供試藥劑:本研究通過查閱文獻并結合遼寧當前常用的防治土傳病菌殺菌劑,選用10種化學藥劑作為供試藥劑(表1)。
表1 供試藥劑名稱、劑型及生產廠家
采用菌絲生長速率法進行室內毒力測定:無菌條件下,依據每種藥劑含有效成分的量制成0.1 g/ml的藥液,配制5個質量濃度梯度的含藥PDA培養基,打取直徑為5 mm的病原菌菌餅分別接種,每個處理3次重復,以無藥劑的PDA平板做空白對照[5~6]。接種后置于25℃恒溫培養箱中暗培養,待對照直徑約為75 mm左右時,采用十字交叉法測量菌落直徑[7],并計算抑菌率[8]。
抑菌率=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-5 mm)×100%
應用SPSS 22.0軟件,以防治藥劑質量濃度的對數值為橫坐標,抑菌率的生物幾率值為縱坐標,作毒力回歸方程(y=a+bx)[9],同時計算供試藥劑對病原菌的EC50,即當y=50%時,求得的x是EC50的對數。
由表2可以看出,10種供試藥劑對病原菌的生長有不同程度的抑制作用,抑菌率隨著供試藥劑濃度的增大而增加,其中3%噻霉酮和 80%乙蒜素濃度為 100 mg/L時抑菌率可達100%,10%苯醚甲環唑和1.8%辛菌胺醋酸鹽濃度在 100 mg/L,抑菌率都達到 90%以上,濃度為0.01 mg/L時,抑菌率均超過50%,40%嘧霉胺抑菌率大于80%,百菌清抑菌率58.93%,其他供試藥劑抑菌率較差,在50%以下。
供試的藥劑回歸曲線的相關系數均在0.8以上,說明供試藥劑質量濃度與對應的抑制率之間的相關性高,因此毒力方程得出的EC50值具有較高的可靠性。供試藥劑對遼藁本根腐病病原菌菌絲生長均表現出一定的抑制作用,但抑制作用有明顯差異。10%苯醚甲環唑對病原菌菌絲生長抑制效果最強,其EC50值為0.0173 mg/L;3%噻霉酮、80%乙蒜素、75%百菌清和1.8%辛菌胺醋酸鹽的EC50在0.3186~2.6932 mg/L,也具有較強的抑制效果;40%嘧霉胺和22.5%啶氧菌酯抑制效果較差,EC50均大于 10 mg/L,嘧菌酯抑制效果最差,EC50為167.7724 mg/L。
表3 藥劑對遼藁本根腐病病原菌毒力測定
土傳病害發生環境復雜,在病害發展的前期,地上部分的癥狀往往表現不明顯而錯過最佳防治時期,而且土傳病害長受土壤微生態環境影響,增加了土傳病害防治難度[10]。傳統上,常用溴甲烷、氯化苦、異硫氰酸甲酯等熏蒸劑,對土壤進行化學熏蒸來控制土傳病害,但土壤化學熏蒸劑劑量大、難降解,對生態環境造成極大污染,尋求土傳病害防治新藥劑迫在眉睫[11]。
目前尚未見關于遼藁本根腐病的藥劑防治報道。本試驗篩選10種殺菌劑進行室內毒力測定,以期為根腐病的防治提供指導。EC50值越小,說明病原菌對藥劑的反應靈敏度越高[12],本試驗中,10%苯醚甲環唑、3%噻霉酮、80%乙蒜素和1.8%辛菌胺醋酸鹽對根腐病菌均有較強的抑制作用,EC50值在0.0173~2.6932 mg/L之間,抑菌率均大于 90%,尤其是 10%苯醚甲環唑,EC50為0.0173 mg/L,這與任建國研究結果10%苯醚甲環唑水分散粒劑對太子參根腐病具有良好的效果一致,苯醚甲環唑為三唑類殺菌劑,具有內吸、保護和治療作用,具有低毒、高效無公害,高效、廣譜、用量少、易降解等特性,且易被根系吸收,對植物體無害,但對致病真菌具有極高的生物毒性[13]。乙蒜素為植物源仿生型殺菌劑,兼具有植物生長調節作用,促進生長,增加產量和改善品質[14]。張博等研究表明:乙蒜素對小麥根腐病防治有明顯效果[15]。因此。遼藁本根腐病的防治可優先考慮10%苯醚甲環唑、3%噻霉酮和80%乙蒜素和1.8%辛菌胺醋酸鹽作為防治遼藁本根腐病的參考用藥,并注意藥劑輪換使用。
本試驗室內測定的試驗結果,要將它們運用到農業生產中,仍需進行田間試驗以便生產上推廣和應用[16]。