氟苯尼考固體分散體的研制

李艷玲,郭永剛,李佳禧,趙建平

(河南牧業經濟學院 動物醫藥學院,河南 鄭州 450046)

氟苯尼考是甲砜霉素的單氟衍生物,易溶于有機溶劑,難溶于水。臨床應用于水產養殖、牛、豬及雞的細菌性疾病的防治,主要的劑型有注射劑、粉劑等。在當前市場上廣泛應用的氟苯尼考制劑主要包括10%氟苯尼考注射液、10%和20%含量的氟苯尼考粉[1]、含2%氟苯尼考的溶液劑和預混劑等劑型。氟苯尼考的水難溶性使其在臨床應用中的利用率較低。因此,急需研發一種能夠提高氟苯尼考溶解度和吸收利用度的氟苯尼考新劑型[2]。

固體分散技術是近年來興起的一種能夠改變一些難溶性藥物溶解性的新技術[2]。它通過物理或者化學方法將原料藥和輔料高度混合在一起,能使藥物改變原來的單一存在形態,以更多樣的物質結構分散于合適的載體之中。固體分散體具有提高難溶性藥物的生物利用度、提升藥物的穩定性等特點,具有廣泛的應用前景[3-5]。本試驗采用熔融法和溶劑法制備氟苯尼考固體分散體,篩選其最佳制備方法和藥輔比,提高氟苯尼考的溶解度和生物利用度,擴大其臨床應用范圍。

1 材料與儀器

1.1 試劑與藥品

氟苯尼考標準品(批號:A11A8L33686,上海源葉生物科技有限公司),氟苯尼考原料藥(鄭州后羿制藥有限公司),聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000(天津市光復精細化工研究所),乙腈(一級色譜純,默克股份有限公司)。

1.2 儀器設備

Waters高效液相色譜儀(上海沃特世科技有限公司),BSA224S型分析天平(北京賽多利斯科學儀器有限公司),RE-2000型旋轉蒸發儀(上海賢德實驗儀器有限公司),Purelab F1型純水機(威立雅水處理技術上海有限公司),85-2型磁力加熱攪拌器(江蘇正基儀器有限公司),油浴鍋(上海樹立儀器儀表有限公司),ZRS-6G型智能溶出實驗儀(天津市天大發科技有限公司)。

2 方法

2.1 氟苯尼考固體分散體的制備

按1∶4、1∶5、1∶7精密稱取一定量的氟苯尼考原料藥和聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000,使用熔融法、溶劑法制備氟苯尼考固體分散體[6,7]。

熔融法制備:先將按比例稱取的聚乙二醇2000放入小瓷缸中,置于油浴鍋中加熱熔融(油浴鍋的溫度為160 ℃),再分次加入處方比例的氟苯尼考原粉,混合熔融。待熔融完全后,利用打蛋器高速攪拌3 min,將熔融物倒在燒杯中,置于磁力加熱攪拌器上充分攪拌,將其取出倒在冷凍的玻璃板上,使其迅速冷卻凝固。干燥箱中30℃干燥12小時,待干燥完全后用鑷子將其刮下,粉碎過80目篩,即得氟苯尼考-聚乙二醇2000不同比例的氟苯尼考固體分散體,放于密封袋中保存,備用。同理,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固體分散體也按上述方法制備。

溶劑法制備:按比例稱取聚乙二醇2000、氟苯尼考原粉,先將氟苯尼考原粉放置于帶有適量甲醇的燒杯中使其溶解,然后向燒杯中加入比例量的聚乙二醇2000,在60 ℃的磁力加熱攪拌器上加熱攪拌溶解、混勻,再將其旋蒸除去甲醇,使藥物和載體析出,置于冷凍的玻璃板上冷卻凝固,室內放置干燥約24 h,干燥過后用鑷子將其刮下,粉碎過80目篩,密封保存。同樣,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固體分散體也按照此步驟制備。

2.2 氟苯尼考固體分散體溶出度的測定

精密量取氟苯尼考原粉100 mg及不同比例的氟苯尼考-聚乙二醇2000固體分散體適量(含氟苯尼考100 mg)包在稱量紙中做好標記備用。配置0.1%的鹽酸(超聲脫氣30 min處理)作為溶出介質,設定溶出儀溫度為37 ℃,轉速為100 r/min。待所有準備工作完畢后,開始投放稱量好的氟苯尼考原粉及氟苯尼考-聚乙二醇2000(1∶4、1∶5、1∶7)固體分散體(含氟苯尼考100 mg),在藥物和溶出液開始接觸時,轉動攪拌釜并按下計時裝置,分別在5 min、8 min、20 min、40 min、60 min時間點取樣5 mL,同時補充相同體積相同溫度的溶出液,取出的樣液經濾膜過濾后置于5 mL EP管中;每個樣品都按照上述的方法做兩次平行的溶出試驗,保存所取樣液[8,9]。

配制氟苯尼考標準品:精密稱定氟苯尼考標準品1 mg,倒入10 mL的容量瓶中,加入0.1%的鹽酸溶液并超聲溶解,待其溶解完全后,加入上述溶液定容,于常溫下保存。

高效液相測定氟苯尼考含量:流動相為乙腈∶水=35∶65,將樣品溶出液經0.22 μm的微孔濾膜過濾后,取續濾液置于高效液相進樣瓶中,進樣量為10 μL,柱溫為25 ℃,在224 nm波長處測定樣品中氟苯尼考含量,記錄數據,計算溶出度。

3 結果

3.1 高效液相測定氟苯尼考含量

由圖1可知,檢測波長為224 nm時氟苯尼考吸收度較好,且無干擾,可以做為測定氟苯尼考含量的測定條件(圖2)。

圖1 氟苯尼考標準品溶液

圖2 氟苯尼考固體分散體

3.2 氟苯尼考固體分散體溶出率的測定

從表1結果可得,以聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000為載體,用熔融法制備氟苯尼考固體分散體,在不同藥輔比下增溶效果均較為明顯,與原料藥的溶出率(27%)相比,最高能增加到50%,特別是聚乙二醇4000(藥輔比1∶5)累積溶出率最高,在5 min時即可達到最大溶出率50%。

表1 氟苯尼考固體分散體溶出率(熔融法)

從表2結果可以看出,用溶劑法制備的固體分散體和原料藥相比增溶效果明顯,且溶出速率明顯加快,原料藥需要60 min才能達到最大溶出率27%,而氟苯尼考固體分散體20～40 min即可達到最大溶出率,且溶出率明顯增加,不同藥輔比下,溶出率均可提高40%以上。

表2 氟苯尼考固體分散體溶出率(溶劑法)

4 討論

試驗采用熔融法和溶劑法分別對氟苯尼考固體分散體進行溶出率測定,結果顯示,對于兩種方法、不同輔料制成的不同比例的氟苯尼考固體分散體,其溶出率均明顯高于氟苯尼考原粉,表明聚乙二醇2000、4000、6000能夠增加氟苯尼考的溶解度。對于相同方法、相同輔料、不同比例的氟苯尼考固體分散體來看,氟苯尼考的溶出速率在一定范圍內會隨著輔料比例的增大而增加。一旦超出這個比例范圍,雖然會對氟苯尼考產生助溶作用,但助溶能力與比例將不再呈現正相關的關系。相同輔料、相同比例、不同方法制備氟苯尼考固體分散體,可以得出熔融法則更適合氟苯尼考固體分散體的制備。比較相同時間段氟苯尼考溶出量以及所能達到的最大溶出量所需時間,可以得出,不論是熔融法還是溶劑法,氟苯尼考-聚乙二醇 4000(1∶5)制備出的固體分散體的溶出能力要強于其它類型的氟苯尼考固體分散體。

試驗操作中為了確保藥物的穩定性和可靠性,采用熔融法制備固體分散體時,需注意輔料的熔融時間。如果用于熔融輔料的容器導熱性差,輔料長時間處于高溫下,輔料的分子結構極有可能被破壞,從而導致其增溶能力的下降。采用溶劑法制備固體分散體時,需注意除去有機溶劑試驗的操作安全。此外,在倒至玻璃板時,兩種制備方法均需藥物迅速冷卻結晶,確保固體分散體的高度分散狀態。

5 結論

采用熔融法和溶劑法成功制備了穩定性較好的氟苯尼考固體分散體。在氟苯尼考-聚乙二醇4000(1∶5)時熔融法制備的固體分散體溶出率最高,該制備方法操作簡便,易于質量控制,可有效提高了氟苯尼考的溶出度。