地黃下腳料提取物對鴨生長性能和免疫活性的影響

程茂高,喬卿梅

(河南牧業經濟學院 動物醫藥學院,河南 鄭州 450046)

隨著人們對動物性食品安全的重視,采用綠色健康的養殖方式已經成為養殖業的必然選擇,中獸藥和中藥飼料添加劑的合理使用受到人們越來越多的關注。但當前獸用中藥資源匱乏,大部分企業利用人用中藥進行生產,造成人獸中藥資源搶奪,抬高企業生產成本,養殖企業失去使用動力,解決獸用中藥資源問題已成為養殖業急需解決的問題[1,2]。中藥在加工、炮制過程中產生的破碎組織、根須、殘渣等下腳料中含有豐富的營養成分,將其直接或加工后用于飼喂畜禽,既可減少環境污染、節約中藥資源,又可提高畜禽機體免疫能力、降低養殖業成本,是協同中藥資源綜合開發利用、減少人獸中藥資源爭奪的有效途徑之一[3,4]。地黃為常用大宗中藥,在獸醫臨床中廣泛應用,《中國獸藥典(2020版)》二部收錄了含地黃的15個成方制劑[5]。目前,對地黃的非藥用部位的應用價值有少量研究[6-8],但人們對地黃下腳料與動物免疫力、應激反應、疾病防治的關系還缺乏系統研究。本試驗研究了地黃下腳料提取物對鴨生長性能和免疫活性的影響,為中藥下腳料獸用化利用和健康養殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 主要耗材與儀器

地黃下腳料購自安徽亳州周邊中藥加工企業(15批次地黃邊角碎料及破碎組織,按質量等比例混合,粉碎,過篩后得粉末樣品);鴨免疫球蛋白G(IgG)酶聯免疫試劑盒(批號為ED-61022)、鴨免疫球蛋白M(IgM)酶聯免疫試劑盒(批號為ED-61087)、鴨白細胞介素2(IL-2)酶聯免疫試劑盒(批號為ED-61008)均購自廈門侖昌碩生物科技有限公司;臺式高速冷凍離心機(H1850R型,湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司);全自動酶標儀(Read Max 500F型,上海閃譜生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 地黃下腳料煎煮液制備

取混合地黃下腳料粗粉100 g,600 mL水浸泡0.5 h,大火煎沸后改用小火煎煮20 min,過濾;殘渣中加入400 mL水煎煮20 min,過濾,合并兩次濾液,濃縮至100 mL,即得地黃下腳料煎煮液。

1.2.2 試驗動物及分組

選取10日齡健康金定鴨120只,靜養4 d后開始正式試驗,15～35日齡為試驗期,試驗期21 d。鴨隨機分為5組,每組設3個重復,每個重復8只。對照組飼喂基礎日糧,試驗I～IV組分別在基礎日糧中添加1 g/kg、2 g/kg、3 g/kg、4 g/kg地黃下腳料煎煮液進行飼喂。試驗鴨采取單層籠養方式,常規飼養管理。各階段基礎飼糧營養水平參考《GB/T 41189-2021蛋鴨營養需要量》,其組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平

1.2.3 生長性能測定

試驗所用鴨以每個重復為單位,分別于13、27、34日齡斷水斷料,統計各重復籠鴨的剩料量,分別于14、28、35日齡空腹稱重,計算鴨平均體重和日均增重、日均采食量、料重比。

1.2.4 免疫活性測定

28日齡和35日齡時,分別從各組重復中隨機挑選2只鴨進行頸靜脈采血,血液樣本在室溫靜置2 h后2000 r/min離心20 min,取上清,按試劑盒說明測定吸光度(OD值),計算各組血清中IgG、IgM、IL-2的質量濃度。分別采集上述鴨的胸腺、脾臟、法氏囊,除凈表面結締組織、脂肪,準確稱重,計算免疫器官指數。免疫器官指數=臟器鮮重(g)/體重(kg)。

1.2.5 數據統計與分析

采用SPSS 20軟件中的一般線性模型對試驗數據進行單變量方差分析,選用LSD進行兩兩比較檢驗,試驗數據均以“平均值±標準偏差”表示,P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 地黃下腳料提取物對鴨生長性能的影響

由表2可知,與對照組相比,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組鴨在28日齡(飼喂14 d)、35日齡(飼喂21 d)后其平均體重、日均增重、日均采食量差異均不顯著;試驗Ⅱ組料重比顯著降低。

表2 鴨生長性能測定結果

2.2 地黃下腳料提取物對鴨免疫活性的影響

由表3可知,與對照組相比,基礎日糧中添加地黃下腳料煎煮液,在28日齡(飼喂14d)時,鴨血清IgG變化不顯著;試驗Ⅱ、Ⅲ組IgM含量分別升高22.70%、15.60%;試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組IL-2含量比對照組升高44.39%、129.63%、224.07%。35日齡(飼喂21d)時,各試驗組IgG、IgM、IL-2含量雖比28日齡(飼喂14d)時有明顯甚至極顯著增長(P<0.01),但增速明顯低于對照組,其中IgM含量低于對照組的50 %、IL-2含量低于對照組的60%。

從表4可以看出,基礎日糧中添加地黃下腳料煎煮液時,鴨的胸腺指數、脾臟指數、法氏囊指數均比對照組有所提高。與對照組相比,添加不同劑量地黃下腳料煎煮液,鴨胸腺指數在28日齡(飼喂14 d)和35日齡(飼喂21d)均無顯著性變化;試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組胸腺指數在28日齡分別提高5.75%、11.37%、21.90%,35日齡分別提高12.32%、13.96%、18.82%;脾臟指數在28日齡時分別提高14.80%、20.74%、19.36%,35日齡時分別提高12.81%、23.45%、23.45%;法氏囊指數在28日齡時分別提高26.23%、31.48%、34.69%,35日齡時分別提高19.06%、24.39%、29.27%。

表4 鴨免疫器官指數測定結果 g/kg

3 討論

3.1 地黃下腳料提取物對鴨生長性能的影響

研究表明,飼料中添加適量中藥可提高家禽的生長性能[9-13]。本研究團隊前期對15批次地黃下腳料的測試結果表明,地黃下腳料中既有較高含量的浸出物和梓醇,又有豐富的粗蛋白、粗脂肪、多糖和礦質元素[14]。本試驗中,基礎日糧中添加地黃下腳料提取物雖然對鴨的平均體重、日均增重、日均采食量無顯著性影響,但添加劑量為2 g/kg時可顯著降低28日齡和35日齡鴨的料重比,表明添加適量的地黃下腳料提取物可節約飼料使用量。

3.2 地黃下腳料提取物對鴨免疫活性的影響

胸腺、脾臟和法氏囊是家禽重要的免疫器官,免疫器官指數在一定程度上能夠體現出家禽的免疫狀態。IgG和IgM等免疫球蛋白在血液中的含量是評價機體免疫應答反應的一項重要指標。IL-2是引起T細胞增殖的主要細胞因子,也是評價機體細胞免疫水平的重要指標。大量研究表明,飼料中添加適量的中藥成分可提高家禽的免疫器官指數[9-13]和血清免疫指標[15-16]。地黃煎劑、地黃多糖等均可不同程度地提高動物的免疫功能[17-19],但尚少見地黃對禽類免疫活性影響的研究報道。本研究表明,基礎日糧中添加地黃下腳料煎煮液,可提高鴨的胸腺指數、脾臟指數、法氏囊指數,添加2 g/kg地黃下腳料煎煮液飼喂14 d時可以提高28日齡鴨血清中IgG、IgM、IL-2的含量。趙歆昀等[20]研究表明,低聚糖可促進家禽胸腺、法氏囊等免疫器官的發育。地黃下腳料中較高的水蘇糖和蔗糖等低聚糖含量可能是導致鴨免疫器官指數升高的原因[19]。

4 結論

鴨基礎日糧中添加2 g/kg地黃下腳料煎煮液,可顯著降低料重比,顯著提高鴨脾臟指數、法氏囊指數以及血清中IgM、IL-2的含量,提高鴨的免疫活性。