兩種HPV檢測方法在新疆地區宮頸癌篩查中的應用效果對比*

昆阿依木·葉爾江,王 豆,熱米拉·熱扎克,曾貝貝,奴爾米拉·布爾拜,王 巖**

(1.新疆醫科大學公共衛生學院,烏魯木齊 830000;2.新疆醫科大學附屬腫瘤醫院,烏魯木齊 830000;3.新疆塔城地區托里縣婦幼保健院,塔城 834500)

宮頸癌是發展中國家常見且重要的公共衛生問題[1]。據世界衛生組織/國際癌癥研究署(WHO/IARC)2020年數據顯示,宮頸癌為女性第四大惡性腫瘤,估計2020年全球新發子宮頸癌病例約60萬,死亡34萬[2]。2018年,中國估計有11.1萬例新發病例和3.4萬例死亡,占全球新增子宮頸癌病例和死亡病例的19.5%和10.9%[3]。據估計,如中國大陸城鄉地區不實施干預措施,2010年至2050年每年新增子宮頸癌病例數增加約40%～50%[4]。因此,宮頸癌仍是威脅婦女健康的一個關鍵問題。子宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是與子宮頸浸潤癌密切相關的一組子宮頸病變,WHO(2014)將女性生殖器腫瘤用CIN級劃分為CIN1、CIN2以及CIN3[5-6];子宮頸上皮內瘤變的發生與發展與高危型人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)持續感染密切相關[7-9]。國際癌癥研究機構已將14種HPV基因型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68)歸類為對人類致癌(第1組)、可能對人類致癌(第2A組)或可能對人類致癌(第2B組)[10]。2020年,在全球市場上有425種不同的HPV檢測方法,其中,82%的檢測缺乏已發表的分析和(或)臨床評估,超過90%的測試未按確保在臨床環境中安全使用的共識要求進行評估[11]。本研究將careHPV和PCR HPV兩種高危型HPV檢測技術用于新疆地區婦女宮頸癌初級篩查,探究兩種檢測技術的篩檢效能。

1 資料與方法

1.1 資料來源 2018年6月至9月在新疆塔城地區托里縣婦幼保健院招募了2000例25～64歲、3年內無子宮頸篩查史、無子宮切除史、未懷孕的哈薩克族婦女。參與者均獲得知情同意。本研究經新疆醫科大學附屬腫瘤醫院倫理委員會批準(編號:K-201806)。每位婦女回答一份與宮頸病變有關的社會人口學、生殖和其他風險因素數據的問卷,研究人員指導婦女自行或婦科醫生根據她們的組別分類獲取宮頸樣本。

1.2 careHPV測試 careHPV檢測是結合信號擴增的體外核酸雜交檢測,使用微孔板化學發光定性檢測宮頸標本中14種HR-HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68)。careHPV檢測有單克隆抗體包被磁珠,對RNA-DNA雜交具有高親和力。如達到或超過1.0RLU/CO的閾值(大約等于1.0pg DNA/mL),則判定為陽性。

1.3 PCR HPV檢測 使用BOHUIGenPlex HPV基因分型(GenPlex,BOHUI,China,Beijing)對所有女性的殘余HPV標本進行HPV基因分型檢測。本檢測采用聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)擴增HPV DNA,低密度芯片對擴增的DNA進行靶向特異性雜交檢測。該技術檢測24種HPV類型,包括18種致癌分型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、53、73、82和83)和6種低風險分型(6、11、42、43、44和81)。

1.4 陰道鏡檢查及組織病理學診斷 任一檢測結果呈陽性的婦女均接受陰道鏡檢查。陰道鏡檢查由有經驗的婦科醫生進行,并根據研究方案進行活檢:(1)直接從可疑區域進行活檢;(2)如看不到鱗狀柱連接,則行宮頸刮宮術(ECC);(3)如有證據表明HPV16/18陽性,從6點和12點位置進行有針對性的活檢。所有活檢標本均由新疆醫科大學附屬腫瘤醫院和中國醫學科學院腫瘤醫院的資深病理學家按標準進行解讀[11]。組織學診斷分為:陰性、宮頸上皮內瘤變1級(CIN1)、宮頸上皮內瘤變2級(CIN2)、宮頸上皮內瘤變3級(CIN3)、鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)、原位腺癌(adenocarcinoma in situ,AIS)或腺癌(adenocarcinoma,ADC)。CIN2及以上的定義為病理學陽性病變,否則為陰性。排除57例因未進行陰道鏡檢查而失訪的女性,最終納入1943例女性。

1.5 統計學處理 采用SPSS 25.0軟件,兩組間率的比較采用McNemar卡方檢驗,P<0.05為差異有統計學意義;一致性用Kappa值來比較,不同檢測方法的診斷效能用靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值進行比較,并計算95%置信區間。

2 結 果

2.1 PCR HPV與careHPV檢測一致性分析 1943例婦女中,careHPV檢測陽性率為8.90%(173/1943);PCR HPV檢測14種高危型別HPV陽性率為9.83%(191/1943)。針對14種高危HPV型別,careHPV和PCR HPV的一致率為95.16%,Kappa值為0.715,經卡方檢驗比較,差異有統計學意義(χ2=996.667,P<0.001)。PCR HPV檢測18種高危型別HPV陽性率為11.32%(220/1943)。PCR HPV(18種)與careHPV比較,一致性為94.60%,Kappa值為0.655,經卡方檢驗比較,差異有統計學意義(χ2=841.460,P<0.001)。見表1。

表1 PCR HPV與careHPV比較

2.2 careHPV檢測及PCR HPV陽性的14種高危型HPV分布 針對14種高危HPV型別,careHPV和PCR HPV檢測均為陽性有76例,占總人數的3.91%;其中HPV16型感染率最高(18.25%),有23例感染;其次是HPV51型感染,感染率為12.70%;絕大多數是單一型別感染,感染率為79.37%。careHPV檢測為陰性但PCR HPV檢測14種高危HPV型別為陽性有56例,占總人數的2.88%;其中HPV51型感染率最高(17.74%),有11例感染;其次是HPV16型和HPV52型,感染率為11.29%;絕大多數是單一型別感染,感染率為88.71%。見表2。

表2 careHPV檢測合并PCR HPV陽性的14種高危型分布

2.3 兩種檢測方式使用不同采樣方式之間的比較 在careHPV檢測中,自我采樣組檢出102例陽性,檢出率為10.71%(102/952);醫生采樣組檢出71例陽性,檢出率為7.16%(71/991);兩種采樣方式比較,差異有統計學意義(χ2=7.544,P=0.006)。PCR HPV檢測18種高危型型別HPV組中,自我采樣組檢出118例陽性,檢出率為12.39%(118/952);醫生采樣組檢出102例陽性,檢出率為10.29%(102/991);兩種采樣方式比較,差異無統計學意義(χ2=2.137,P=0.144),見表3。

表3 兩種檢測方式使用不同采樣方式之間的比較

2.4 不同檢測方法的診斷效能比較 不同檢測方法對CIN2+的診斷效能不同,3種檢測方法曲線下面積(area under the curve,AUC)為0.876、0.879和0.883,差異無統計學意義(P>0.05)。PCR HPV檢測的靈敏度最高,為88.89%(95%CI為74.37～100),其次是careHPV檢測,為83.33(95%CI為66.12～100);careHPV檢測的特異度最高,為91.79%(95%CI為90.57～93.02)。careHPV的陽性預測值最高,其次是PCR HPV檢測。PCR HPV檢測的陰性預測值最高,為99.89%(95%CI為99.73～100)。見表4。

3 討 論

檢測HPV型別對于檢測高級別宮頸鱗狀上皮內病變(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)或瘤樣病變(CIN)具有重要的預后價值[12]。careHPV檢測技術通過國家食品藥品監督管理總局(China Food and Drug Administration,SFDA)認證,該技術經多項研究證實適用于資源匱乏地區使用,目前WHO在全球發展中國家進行該技術的推廣。careHPV與第二代雜交捕獲技術(hybrid capture 2,HC2)的檢測原理相似,是基于HC2的原理上引用磁珠捕獲的DNA與混合探針中的RNA雜交,通過信號放大及化學發光方法進行檢測。careHPV檢測與PCR HPV檢測比較,陽性率相近,一致性非常高,kappa值較高,這與以往研究相適應[13]。careHPV陰性但是PCR HPV陽性的婦女中,絕大多數為單一感染,其中HPV51型感染率最高。三種方法的陽性預測值較差,但靈敏度和特異度極高,這與先前研究一致[14]。careHPV檢測的靈敏度為83.33(95%CI為66.12～100),PCR HPV檢測的靈敏度為88.89(95%CI為74.37～100)。不同采樣方法進行careHPV檢測得到的結果,差異無統計學意義,這與有些研究結果相近[15-17]。

careHPV檢測與PCR HPV檢測得出了相當一致的結果,在新疆地區除了陰道鏡轉診指標的HPV16型和18型陽性這一轉診指標外,還應注意HPV51型和52型陽性的婦女。在取樣方式上,自取樣的結果相較于醫生取樣,檢出率更高,若考慮自取樣方式作為宮頸癌篩查的手段,可減輕婦女的心理負擔。在檢測CIN2+病變時,兩種方法均可適用,但PCR HPV靈敏度更高一些,并且PCR HPV檢測較為經濟的,適用于資源有限的地區,但需更全面的研究完善結果。