尿CysLTE4和血清IL?8水平變化與支氣管肺發育不良的關系

陳云，瞿色華，陳信，張陣

（蚌埠醫學院第一附屬醫院兒科，安徽蚌埠 233004）

支氣管肺發育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）是早產兒最常見的慢性呼吸系統疾病。近年來，隨著圍產醫學及新生兒醫學的發展，小胎齡早產兒的存活率顯著提高，BPD 的發生率亦隨之升高［1?2］。BPD 有著較高的病死率，嚴重影響著早產兒早期生存及遠期預后［3?4］，且迄今為止尚無有效的治療方法［5］。目前BPD的診斷仍以出生后持續用氧≥28 d為標準，而其病理生理改變在早產兒出生即開始發生［6］，但BPD 防治手段相對滯后，因此，早期識別、積極預防、有效干預對于降低BPD 發生率、減輕BPD 嚴重程度及改善早產兒預后具有重要意義。雖然BPD 的病因和發病機制至今尚未完全闡明，但目前普遍認為氣道炎癥為其關鍵致病因素［7］。少數研究發現［8?9］，炎癥介質白三烯及促炎因子白介素?8（IL?8）在BPD 早期肺損傷中發揮重要作用，并加速和加重BPD 的發生和進展。而半胱氨酸白三烯E4（cysteinyl leukotriene E4，CysLTE4）是白三烯的重要代謝產物、且尿液排泄比例恒定。因此本研究通過連續監測早產兒尿半胱氨酸白三烯E4（CysLTE4）和血清白介素?8（Interleukin?8，IL?8）的水平變化及對其臨床資料分析，探討其與BPD 的關系，為BPD的早期診斷提供依據。

1 對象和方法

1.1 研究對象

選取2021 年1 月至2022 年12 月蚌埠醫學院第一附屬醫院新生兒重癥監護病房（NICU）收治的符合條件的58 例早產兒作為研究對象。待患兒出院時收集完整病例資料，根據BPD 診斷標準［6］（生后28 天仍需吸氧）、將早產兒分為BPD 組（21 例）和非BPD 組（37 例）。本研究經我院倫理委員會審批通過（倫科批字［2021］第138 號）、并獲得所有患兒家屬知情同意。

1.2 選取標準

1.2.1 納入標準 胎齡＜32周、出生體重＜1500 g；出生后24小時內入院；住院時間≥28天；患兒家屬自愿參與本研究、并簽訂知情同意書。

1.2.2 排除標準 嚴重的先天性發育畸形、復雜性先天性心臟病及遺傳代謝性疾病等；病例資料不完整、住院期間死亡、放棄治療、嚴重并發癥或轉科治療；家屬不愿參與本研究。

1.3 標本采集與檢測指標

1.3.1 標本采集 尿標本獲?。菏占绠a兒出生后24小時內及第7、14、21、28天的清潔尿液5 ml；將標本離心處理（2～8 ℃下、2000 r/min、離心15 min）、收集1 ml 上清液、保存于?80 ℃冰箱中，避免反復凍融，保持過程中發現有沉淀物形成者，再次離心。血標本獲?。撼槿≡绠a兒入院后次日清晨及第7、14、21、28 天清晨空腹狀態下外周靜脈血2 ml；將標本離心處理（2～8 ℃下、3000 r/min、離心10 min）、留取上清液（血清）、保存于?80 ℃冰箱中，避免反復凍融，保持過程中發現有沉淀物形成者，再次離心。

1.3.2 檢測指標 尿CysLTE4 水平：采用酶聯免疫吸附（ELISA）法檢測所有尿標本中CysLTE4 水平，ELISA 試劑盒（南京博研生物），嚴格按照說明書操作，結果以pg/mL 為單位。血清IL?8：采用酶聯免疫吸附實驗（ELISA）方法檢測所有血清標本中IL?8 水平，試劑盒購買至南京博研生物，嚴格按照說明書操作，結果以pg/ml為單位。

1.4 統計學處理

采用SPSS 25.0軟件對數據資料進行統計分析，其中計量資料進行正態檢驗，符合正態分布，以表示，2 組資料比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料用率（%）表示，率的比較采用四格表χ2檢驗；檢驗水準α=0.05，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組早產兒臨床資料比較

BPD 組與非BPD 組早產兒出生體重、性別、胎齡、剖宮產比率、5 min Apgar 及產前糖皮質激素應用使用率比較，差異均無統計學意義；但BPD 組機械通氣時間、總吸氧時間及住院時間長于非BPD組，差異有統計學意義。結果見表1。

表1 BPD組與非BPD組早產兒臨床資料比較

2.2 兩組早產兒不同時間點尿CysLTE4水平比較

BPD 組與非BPD 組早產兒生后第1 天尿CysLTE4 水平比較，差異無統計學意義。隨著日齡增長，兩組早產兒尿CysLTE4水平均呈現上升趨勢，于生后第14天達高峰，且生后第7天、14天、21天及28 天BPD 組尿CysLTE4 水平均高于同日非BPD 組，差異均有統計學意義。結果見表2。

表2 BPD組與非BPD組早產兒不同時間點尿CysLTE4水平比較（，pg/ml）

表2 BPD組與非BPD組早產兒不同時間點尿CysLTE4水平比較（，pg/ml）

2.3 兩組早產兒不同時間點血清IL?8水平比較

BPD 組與非BPD 組早產兒生后第1天血清IL?8水平比較，差異無統計學意義。隨著日齡增長，兩組早產兒血清IL?8 水平均呈現上升趨勢，于生后第21 天達高峰，且生后第7、14、21、28 天BPD 組血清IL?8 水平均高于同日非BPD 組，差異均有統計學意義。結果見表3。

表3 BPD組與非BPD組早產兒不同時間點血清IL?8水平比較（，pg/ml）

表3 BPD組與非BPD組早產兒不同時間點血清IL?8水平比較（，pg/ml）

2.4 受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）分析

根據所有早產兒第7天CysLTE4、IL?8水平與診斷BPD 早產兒進行數據分析，結果顯示CysLTE4、IL?8 均對BPD 的診斷有預測價值，CysLTE4 的預測價值更高，P＜0.01。結果見圖1、表4。

圖1 第7天CysLTE4、IL?8水平的ROC曲線

表4 第7天CysLTE4、IL?8水平ROC曲線分析結果

3 討論

BPD 是早產兒常見慢性肺部疾病，尤其是小胎齡早產兒，嚴重影響早產兒生長發育，是新生兒期后的死亡及再住院的主要原因。該病往往并發呼吸及神經系統疾病，包括反復呼吸道感染、心肺功能障礙、生長發育遲緩等，其遠期影響可持續至青春期及成人期［10］，嚴重影響患兒生活質量，加重家庭及社會負擔［11?12］。該病的發生是在早產兒肺發育未成熟的基礎上，發生高氧損傷、容量傷、氣壓傷、感染、動脈導管開放等導致瀑布式的繼發性炎癥反應。大量炎癥細胞浸潤，釋放大量炎癥介質，進一步導致肺損傷，最終形成肺纖維化，發生BPD［13?14］。

早產兒肺相對發育不成熟，大量研究表明［8，15］，早產兒胎齡越小BPD 的發病率越高，且嚴重程度越重，本研究中BPD 組和非BPD 組早產兒胎齡無統計學差異（P＞0.05），考慮可能與樣本量較少、且剔除部分小胎齡放棄治療的病例有關，另外本研究中有9例胎齡＜28 周的極早早產兒，其中有6 例發生BPD，符合胎齡越小，發生BPD 風險越高的特點。長期機械通氣及高濃度吸氧容易導致氣壓傷、容量傷及氧中毒等，引起肺泡受損、肺水腫、肺纖維化及氣道炎癥反應，嚴重影響肺泡及肺血管的發育，與BPD 發生密切相關。本研究結果顯示，BPD 組早產兒機械通氣時間及吸氧時間均明顯長于非BPD 組，與以往研究一致［16?17］。臨床中可采取肺保護性呼吸支持策略，在不影響組織供氧的情況下，盡量縮短機械通氣時間、選用低流量氧氣吸入。

白三烯（leukotriene，LT）是一類具有高生物活性的氣道炎癥介質，主要來源于嗜酸性粒細胞、肥大細胞、肺泡巨噬細胞及中性粒細胞等，細胞在活化狀態下，其胞膜和核膜的脂質雙層經磷脂酶A2代謝產生花生四烯酸，進一步經過5?脂氧合酶（5?lipoxygenase，5?LOX）途徑代謝產生白三烯。LI在慢性肺部炎癥疾病中起著重要作用，參與了氣道炎癥細胞聚集和炎癥介質釋放，誘發氣道高反應性，引起氣道重塑。白三烯在血液中半衰期約幾秒至1分鐘，迅速經氧化代謝、以代謝產物形式存在，其代謝產物可經尿液和膽汁排出。尿CysLTE4是白三烯的重要代謝終產物，能夠反應白三烯的生成含量［18］，且排泄比例恒定（4%～7%）［19］，標本留取簡便，可重復，無創傷。金蕊等［8］研究表明，分別檢測足月兒、早產兒、BPD 3 組患兒早期（3 d 內）尿CysLTE4 水平，結果顯示差異均有統計學意義，早產組尿CysLTE4水平顯著高于足月組，BPD 組最高，同時發現胎齡小、體重低的患兒尿CysLTE4水平較高，提示早期檢測患兒尿CysLTE4水平顯著升高可預示BPD的發生，同時加強圍生期保健，減少小胎齡、低體重早產兒的出生，對降低重癥BPD 的發生有重要意義。Eun 等［20］研究也證實早期尿CysLTE4 水平升高與BPD 發生有一定相關性，為BPD 早期敏感生物學指標。而何衛恒等［21］研究發現，早產兒組第7 天尿CysLTE4 水平高于正常足月兒相，于28 d 達最高水平。本研究結果顯示，BPD 組和非BPD 組早產兒出生第1 天尿CysLTE4 水平均處于低值、差距不大，隨日齡增長呈現上升趨勢，生后第7 d BPD 組顯著高于非BPD 組，2 組早產兒尿CysLTE4 水平于生后第14 天達高峰，且BPD 組上升幅度較非BPD 組明顯，本研究早產兒尿CysLTE4水平達峰時間與上述研究有差別，考慮與納入病例胎齡范圍不一致有關。

近年研究發現IL?6、IL?8、IL?1 和TNF?α 等多種炎癥因子參與BPD 的炎癥反應過程，促使并加重了BPD 的發生和發展［22?25］。其中LI?8 又稱中性粒細胞激活蛋白，是一種典型的有強趨化作用的促炎因子，能誘導中性粒細胞增殖，加重炎癥反應，參與早期肺損傷過程，與BPD 的發生密切相關［26］。盧田甜等［27］研究表明，BPD 患兒生后第14天血清LI?8明顯增高，而非BPD 組血清LI?8 維持在較低水平，且IL?8 對BPD的病情具有非常高預測價值。本研究結果顯示，BPD 組和非BPD 組早產兒出生第1 天血清IL?8 水平均處于低值、差距不大，隨日齡增長呈現上升趨勢，生后第7天BPD組顯著高于非BPD組、較上述研究更早期出現陽性結果。同時發現2組早產兒血漿LI?8生后第21天達高峰，且BPD 組上升幅度較非BPD組明顯，該結果與王剛［9］研究一致。

綜上所述，CysLTE4 和IL?8 均與早產兒BPD 的發生密切相關，動態監測早產兒尿CysLTE4 和血清IL?8 水平對BPD 的早期診斷、早期干預及降低嚴重并發癥的發生率、改善早產兒預后具有重要的臨床意義。本研究也存在一定的不足，分組較少，未納入正常足月組，且樣本量有限，后期可擴大樣本數據進行深入研究。