以絲瓜絡為碳源的固相反硝化系統性能

高書偉， 張 凱， 李志斐， 謝 駿， 王廣軍， 郁二蒙，李紅燕， 夏 耘， 田晶晶， 龔望寶*

(1. 中國水產科學研究院珠江水產研究所，農業農村部熱帶亞熱帶水產資源利用與養殖重點實驗室，廣東省水產動物免疫技術重點實驗室，廣東 廣州 510380；2. 上海海洋大學，水產科學國家級實驗教學示范中心，上海 201306)

近年來，我國水產動物蛋白生產領域發展迅猛，水產品總產量已超過世界總產量的一半以上[1]。水產養殖在提供大量優質蛋白質的同時，由于大量的飼料投入以及魚蝦排泄物的產生導致養殖水體氮素積累超負荷，影響了養殖環境和水產品質量安全[2]，養殖尾水直接外排也會引起嚴重的環境問題[3]。異養反硝化去除水體硝酸鹽(NO3?-N)最具經濟環保的方法之一，然而水體碳氮比(C/N)是制約異養反硝化脫氮效果的關鍵因素[4]。通常養殖尾水的碳氮比在1.0～2.0(質量比)，碳源不足嚴重制約了反硝化進程[5]。因此，對養殖尾水進行深度脫氮往往需要外加碳源。

傳統外加碳源多為甲醇、乙醇和乙酸等液體碳源和人工合成聚合物如PCL、PLA等固體碳源，因其存在成本高、難操作、易造成二次污染、運輸和儲存復雜等問題，阻礙了其廣泛應用[6-7]。農業廢棄物是一類以纖維素為主的天然材料，由于廉價易得、經濟環保，且具有較大的比表面積適合微生物附著生長等優點而備受關注[8-9]。然而，水力停留時間(hydraulic retention time, HRT)和進水硝酸鹽濃度(influent nitrate concentration, INC)是影響以農業廢棄物為碳源的固相反硝化系統性能的關鍵因素[10]。當HRT較短時，單位時間內進入反應器的氧氣量增加會抑制反硝化的進行，同時反硝化細菌和水體接觸時間較短會造成脫氮不完全[11]。隨著HRT的增加，脫氮效果隨之也提高，但過長的HRT也會降低系統的處理效率[12]。Blackmer等[13]的研究表明，INC會影響反硝化系統的脫氮性能，高濃度的NO3?-N通過抑制氮氣的生成，轉而生成一氧化二氮來影響反硝化。通常INC的升高能增加單位時間內NO3?-N的去除量，隨著INC的降低則會出現相反的結果[10]。這主要是因為高的INC提供了更多的電子受體，單位時間內減少的NO3?-N質量增加[14]。

絲瓜絡(loofah sponge, LS)作為一種常見的農業廢棄物，富含纖維素、半纖維素和木質素，能夠持久釋放碳源，且具有多層纖維網狀結構[15]，已被證明是一種理想的固體碳源[8]。然而關于HRT和INC對絲瓜絡反應器反硝化性能的影響少有報道。本研究的主要目的是構建以絲瓜絡為碳源的固相反硝化系統，并探究在不同HRT和INC下該系統的反硝化性能，并通過電子顯微鏡觀察了絲瓜絡表面結構變化情況，應用高通量測序技術分析了反應器運行初期和末期的細菌群落結構組成。本研究結果為絲瓜絡作為反硝化碳源在水產養殖尾水反硝化工藝的進一步優化提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料和儀器

絲瓜絡采自廣州市某農村，將絲瓜絡剪切為約1 cm3大小，用超純水洗滌2遍，之后60 °C烘干放于密封袋中備用。反硝化污泥采自中國水產科學研究院珠江水產研究所多年未清理的池塘底泥，用紗布(16目)過濾去除雜質。合成水產養殖尾水(synthetic aquaculture wastewater，SAW)按照Li等[16]的方法用純水配制，每升SAW中氮磷化合物含量如表1所示，NO3?-N濃度根據實驗需求進行調整，亞硝酸鹽(NO2?-N)為2.5 mg/L，氨氮(NH4+-N)為5.5 mg/L，總磷(TP)為23.88 mg/L，其中每升SAW中微量元素體積占比2 ‰(2 mL)，實驗所需化學藥品(分析純)購于上海麥克林生化科技股份有限公司。

表1 人工合成養殖廢水組成Tab. 1 Composition of synthetic aquaculture wastewater

實驗用儀器為YSI Professional Plus系統(YSI Incorporated，美國)，蠕動泵 (WT-600CAS/353Y型，北京)，COD測定儀 (DRB200/DR900，美國)，TN測定儀 (LH-25A/LH-3BN，北京)，酶標儀(Multiskan FC，上海)。

1.2 反應器建立及運行

如圖1所示，以圓柱形有機玻璃容器作為反硝化反應器 (denitrification reactor，DR；直徑10 cm，高55 cm)，進水方式為下進上出式，進水口位于底部向上5 cm處，出水口位于頂部向下5 cm處。用廢舊毛巾(100×40 cm)包裹40 g絲瓜絡和200 mL反硝化污泥置入反應器內，有效容積為(2800±100) mL，每組設置3個重復，蠕動泵控制進水流速來調整HRT。為確保實驗數據的有效性及反應器的規?；\行，本研究在室內進行，溫度為(22±2) °C，光照強度為(355 ± 31) Lux。LS-DR0表示絲瓜絡反應器運行初期，LS-DR14表示反應器運行末期(INC為50 mg/L，HRT為24 h)。

圖1 反硝化系統示意圖Fig. 1 Schematic diagram of denitrification system

HRT對LS-DR反硝化性能的影響向LS-DR中加滿SAW (NO3?-N=50 mg/L)，靜置，當NO3?-N完全去除，且無NO2?-N積累，認為馴化成功。之后維持INC為50 mg/L，分別在4個HRT(16、20、24和28 h)下運行14 d，每2天定時測定出水NO3?-N、NO2?-N、NH4+-N、TN、TP、COD和溶解氧(DO)濃度以及pH值。

INC對LS-DR反硝化性能的影響馴化方法同上，在最佳HRT的基礎上，分別在3個INC(75、100和125 mg/L)下運行14 d，每2天測定出水NO3?-N、NO2?-N、NH4+-N、TN、TP、COD和溶解氧(DO)濃度以及pH值。

LS-DR微生物群落結構分析HRT實驗結束后，分別收集LS-DR0和LS-DR14的污泥樣品進行細菌群落多樣性分析。提取DNA后，以“CC TACGGRRBGCASCAGKVRVGAAT”為上游引物，“GGACTACNVGGGTWTCTAATCC”序列為下游引物對原核生物16SrDNA的V3及V4高度可變區進行擴增。PCR擴增采用25 μL反應體系，包括上下游引物各1 μL、dNTPs 2 μL、TransStart Buffer 2.5 μL、TransStartTaqDNA 0.5 μL和模板DNA 20 ng，之后用dd H2O補充體系。高通量測序文庫的構建和基于Illumina MiSeq平臺的測序由蘇州帕諾米克生物科技有限公司完成。

絲瓜絡表面結構分析分別收集LS-DR0和LS-DR14的絲瓜絡在烘箱中烘干(60 °C)。利用掃描電子顯微鏡(SEM)(QUANTA 250, Servicebio Co.,中國)觀察其表面結構變化。

1.3 分析方法

水樣經0.45 μm濾膜[Pall 頗爾 ( 中國 )有限公司]過濾后測定NO3?-N、NO2?-N和NH4+-N。采用YSI Professional Plus系統測定DO和pH，使用重鉻酸鉀法測定COD濃度；采用過硫酸鉀消解法測定TN和TP；NO3?-N的測定采用麝香草酚分光光度法；NO2?-N的測定采用N-(1-萘基)乙二胺光度法；NH4+-N的測定采用水楊酸分光光度法。

所有數據以“平均值±標準差”的形式表示，采用SPSS 26.0對COD、TN、TP和NO3?-N等指標進行單因素方差分析，當P＜ 0.05時，存在統計學差異。使用GraphPad棱鏡8.0.2和Excel 2010作圖。

2 結果

2.1 絲瓜絡表面結構變化

運行初期，通過100倍SEM觀察絲瓜絡運行結果如圖版-1所示，發現其表面呈褶皺狀，具有較大的比表面積和粗糙度，適合微生物的生長附著。在500倍下，絲瓜絡表面則相對平整(圖版-3)。經過14 d運行后，從圖版-4 可以看出其表面結構被水解，顯露出不規則的片狀突起。此外，表面附著一些細菌和雜質，說明絲瓜絡是良好的生物載體，附著細菌也能促進碳源的釋放及反硝化的進行。

2.2 HRT對NO3?-N、NO2?-N、NH4+-N、TN、TP和COD的影響

整個實驗期間，LS-DR的DO均低于1 mg/L，pH在6.50～7.20。如圖2-a所示，INC為50 mg/L時，不同HRT下，出水硝酸鹽濃度(effluent nitrate concentration，ENC)均大幅度降低。HRT為16、20、24和28 h時，NO3?-N去除率分別為69.19%±4.59%、82.65%±3.62%、98.97%±0.52%和98.62%±1.33%。單因素方差分析顯示，HRT在16～24 h，NO3?-N去除率隨HRT的延長而顯著升高 (P＜0.05)。當HRT從24 h增加到28 h時，NO3?-N去除率維持穩定(P=0.80)，說明HRT在24 h時，LS-DR已能達到最佳的NO3?-N去除效果。NO2?-N的變化與ENC有相似趨勢，說明NO2?-N積累量與ENC呈正相關，當HRT為16和20 h時，NO2?-N分別為(5.19±1.52)和(1.39±0.49) mg/L(圖2-a)，當增加至24和28 h時，NO2—N低于0.5 mg/L，說明可以實現完全反硝化。在進水NH4+-N濃度為5.50 mg/L的情況下， LS-DR均能夠將其完全去除。TN的去除過程與NO3?-N有相似的規律 (圖2-b)，當HRT為16和20 h時，TN去除率分別為73.30%±7.21%和70.67%±6.30%，延長至24 h后，TN去除率達到最高(97.84%±0.94%)，顯著高于其他HRT (P＜0.05)。綜合以上分析， 本研究中LS-DR的最佳HRT為24 h。

圖版 實驗前(1、2)后(3、4)絲瓜絡表面結構掃描電鏡觀察結果1，3. LS-DR0；(2)(4) LS-DR14.Plate SEM observation results of surface structure of LS before (1, 2) and after (3, 4) the experiment

圖2 不同HRT下LS-DR對含氮磷污染物的去除性能Fig. 2 Removal performance of LS-DR for nitrogen and phosphorus pollutants at different HRT

TP隨HRT的變化曲線如圖2-b所示，HRT在16～28 h時，TP 去除率為88%～89%，無顯著差異(P＞0.05)。如圖2-c所示，COD隨HRT的增加呈先降低后升高的趨勢，分別為(77.42±16.66) mg/L(HRT=16 h)、(32.25±9.33) mg/L (HRT=20 h)、(26.52±10.52) mg/L (HRT=24 h)和(44.24±10.88) mg/L(HRT=28 h)，其中HRT為16 h時，COD的利用率較低，出水COD顯著高于其他HRT (P＜0.05)，但HRT在20 、24 和28 h時出水COD無顯著差異 (P＞0.05)。

2.3 INC對NO3?-N、NO2?-N、TN、TP和COD的影響

在最佳HRT(24 h)的基礎上，當 INC為75、100和125 mg/L 時，ENC隨INC的增加而增加(圖3-a)，分別為(24.89±2.91)、(26.91±0.94)和(27.55±2.78) mg/L，無顯著差異 (P＞0.05)。NO3?-N去除率隨INC增加而大幅度增加，當INC為125 mg/L時，NO3?-N去除率(77.96%±2.22%)顯著高于INC為75 mg/L (66.81%±3.88%)和100 mg/L(73.09%±0.94%)時的去除率 (P＜0.05)。同樣，NO3?-N去除速率(nitrate removal rate, NRR)也隨INC提高而顯著增加 (P＜0.05)，當INC為75、100和125 mg/L時，NRR分別為(50.11±2.91)、(73.09±0.94)和(97.45±2.78) mg/(L·d)，說明INC能夠顯著影響LS-DR的NO3?-N去除率和NRR。如圖3-a所示，NO2?-N與NO3?-N有相似的變化趨勢，然而，INC為75、100和125 mg/L時，NO2?-N均出現積累，分別為3.80±1.22、5.37±0.75和5.67±0.07 mg/L，說明INC在75至125mg/L范圍內，LS-DR均不能實現完全反硝化。不同INC下，TN的變化曲線如圖3-b所示，分別為(29.65±3.16) mg/L (INC=75 mg/L)、(37.77±3.56) mg/L (INC=100 mg/L)和(40.27±7.12) mg/L (INC=125 mg/L)，對應去除率分別為64.28%±3.81%、65.03%±3.29%和69.72%±5.35%，各組之間無顯著差異 (P＞0.05)。結合上述結果，本實驗認為在最佳HRT(24 h)的基礎上，當INC為50 mg/L時，LS-DR的NO3?-N處理能力達到飽和。

圖3 不同INC下LS-DR 對含氮磷污染物的去除性能Fig. 3 Removal performance of LS-DR for nitrogen and phosphorus pollutants at different INC

TP的變化曲線如圖3-b所示，不同INC下，TP去除率在81%～82%，各組之間無顯著差異(P＞0.05)，說明INC對TP的去除效果影響不大。如圖3-c所示，COD隨INC的增加出現降低，INC為75 mg/L時，出水COD為(55.05±15.90) mg/L，顯著高于INC為100 mg/L [(33.14±12.58) mg/L]和125 mg/L [(26.67±15.66) mg/L]時，說明INC對出水COD也有明顯影響。

2.4 LS-DR微生物群落結構分析

LS-DR運行前后微生物多樣性指數變化對原始序列進行質控后，分別獲得49881和52389個高質量序列，共歸入5202和4247個OTU。所有樣本Coverage指數大于0.98，說明測序序列幾乎覆蓋所有的細菌，測序結果具有可靠性和代表性 (表2)。LS-DR經過14天運行后，其Observed-species、Chao1、Shannon指數和ACE指數均降低，說明細菌群落多樣性和均勻性改變，其物種數目、豐富度和均勻度降低，部分細菌被富集。

表2 細菌群落α多樣性指數Tab. 2 The α diversity index of bacterial community

門水平上的微生物群落結構對OTU代表序列進行門水平上的分類，如圖4-a所示。LSDR運行初期及末期的優勢菌在結構組成上有一定的相似性，包括變形菌門 (Proteobacteria)、鹽桿菌門 (Halobacterota)、擬桿菌門 (Bacteroidetes)、脫硫細菌門 (Desulfobacterota)、彎曲桿菌門 (Campilobacterota)、厚壁菌門 (Firmicutes)、Sva0485、綠彎菌門 (Chloroflexi)和疣微菌門(Verrucomicrobiota)等，但其相對豐度具有差異，運行初期，它們的相對豐度分別為15.53%、14.68%、4.61%、8.35%、0.13%、1.69%、4.99%、4.19%和2.27%。運行14 d后，變形菌門、擬桿菌門、彎曲桿菌門、厚壁菌門和疣微菌門分別增至33.46%、10.66%、0.34%、2.74%和2.40%，相反，鹽桿菌門、脫硫細菌門、Sva0485、綠彎菌門分別降至7.58%、6.10%、3.65%和1.97%。整體來說，碳源的持續釋放以及硝酸鹽的注入導致LS-DR內的部分細菌被富集。

圖4 LS-DR0和LS-DR14在門 (a)和綱 (b)水平上的相對豐度Fig. 4 Relative bacteria abundance ofLS-DR0 and LS-DR14 at phylum (a) and class (b) levels

綱水平上的微生物群落結構如圖4-b所示，LS-DR14的優勢綱為γ-變形菌綱 (Gammaproteobacteria，31.69%)、擬桿菌綱 (Bacteroidia，10.41%)、Methanosarcinia (9.27%)、Thermodesulfovibrionia(5.38%)、彎曲菌綱 (Campylobacteria，0.34%)、甲烷微菌綱 (Methanomicrobia，3.05%)、梭狀芽孢桿菌綱(Clostridia，1.97%)、Desulfobacteria (3.15%)、α-變形菌綱 (Alphaproteobacteria，1.76%)等。相比LS-DR0，γ-變形菌綱、擬桿菌綱、彎曲菌綱、梭狀芽孢桿菌綱和α-變形菌綱的相對豐度增加，Methanosarcinia、Thermodesulfovibrionia、甲烷微菌綱和Desulfobacteria則降低。

屬水平上的微生物群落結構在屬水平上進一步對OTU進行分類，可以觀察到細菌群落結構更詳細的差異 (圖5)。LS-DR運行初期的優勢菌屬為鬃毛甲烷菌屬 (Methanosaeta，9.26%)、甲烷繩菌屬 (Methanolinea，3.19%)、Desulfatiglans(2.90%)、Candidatus_Competibacter(2.27%)、Methanoregula(2.07%)、Sva0081_sediment_group (1.54%)、Geothermobacter(1.43%)、unidentified_Thermodesulfovibrionia(1.00%)、ADurb.Bin063-1 (0.86%)和莫拉菌屬 (Moraxella，0.72%)。然而，LS-DR運行14 d后，優勢菌屬出現明顯改變，為熱單胞菌屬 (Thermomonas，1.46%)、陶厄氏菌屬 (Thauera，0.55%)、固氮螺菌屬 (Azospira，3.32%)、Simpli-cispira(1.01%)、草螺菌屬 (Herbaspirillum，3.02%)、Cloacibacterium(2.69%)、假黃色單胞菌屬 (Pseudoxanthomonas，0.39%)、Uliginosibacterium(0.9%)、Lacunisphaera(1.02%)、Cytophaga xylanolytica(1.61%)、黃桿菌屬 (Flavobacterium，1.17%)、Diaphorobacter(0.64%)和Macellibacteroides(1.59%)。

圖5 基于屬水平上LS-DR0和LS-DR14的物種豐度聚類熱圖Fig. 5 Heat map of species abundance clustering of LS-DR0 and LS-DR14 based on genus level

3 討論

3.1 LS-DR的反硝化性能

厭氧和弱酸性條件有利于反硝化的進行[17-18]，實驗期間，LS-DR內環境條件均達到此標準。本研究中，HRT為24 h時，LS-DR的反硝化性能最佳，這一結果與欒曉男等[19]的研究結果一致，以絲瓜絡作為反硝化濾池填料，水力停留時間為24 h時，對生活污水中各污染指標去除效果達到最好。鐘華等[20]報道玉米芯固相反硝化系統的最佳水力停留時間為16 h，而腐朽木作為緩釋碳源外加到硝化濾池，在初始階段HRT為12 h的脫氮效果最佳[21]。碳源的種類及添加量、反應器的理化狀態、進水特性以及溫度等因素均能影響添加碳源的反硝化系統的反硝化性能[22-24]。本研究中，當HRT達到24 h后，系統反硝化性能并未隨著HRT的增加而顯著增加，在以廢活性污泥的熱水解液和產酸液為反硝化碳源時也有相似的發現[25]。這是因為過長的HRT導致NO3?-N的相對流入量減少，抑制了反硝化細菌的活性，導致NO3?-N去除率并未顯著增加[26-27]。同時過長的HRT促進了有機底物的進一步發酵和水體中較小的膠體和可溶性有機物 (粒徑＜0.45 μm)的釋放[27]，導致出水COD濃度也出現一定量的回升。

本研究在最佳HRT條件下，當INC為50 mg/L時，LS-DR的反硝化性能最佳。HRT是影響反硝化系統最佳INC的關鍵因素。以玉米芯為碳源的反硝化系統在HRT為16 h時， INC為50 mg/L時具有最佳反硝化效果[20]，而以羥基丁酸戊酸共聚酯為碳源的反硝化系統在HRT為7.25 h時的最佳INC為100 mg/L，并隨著HRT的變化，反硝化系統的最佳INC發生改變[28]。董全宇等[29]報道木屑-硫磺填充床反硝化生物濾池在HRT為10 h條件下，INC為30 mg/L時的反硝化性能最好。LS-DR的NRR隨著INC的增加而增加，這一結果與Hoover等[30]的研究結果相似，以木片為反硝化系統外加碳源，INC從10增至50 mg/L后，出水NO3?-N逐漸增加，單位時間內NO3?-N去除量從7.5增加到12.9 mg/L。這主要因為隨著INC的提高，反應器單位體積內電子受體增加，有效反硝化的NO3?-N質量也隨之增加，單位時間內減少的NO3?-N質量也增加[10]，同樣的，有機物作為反硝化的電子供體，其消耗量也會增加，因此出水COD呈下降趨勢。

3.2 LS-DR的微生物群落結構分析

LS-DR運行14 d后細菌群落結構發生改變。其中變形菌門普遍存在環境中，是反硝化細菌的主要來源[31]，其在制藥、煉油、食品等工業廢水和城市污水[32]以及水產養殖尾水[5]中均是促進反硝化的優勢類群。隸屬變形菌門的γ-變形菌綱和α-變形菌綱包含豐富的硝化細菌、厭氧氨氧化細菌和NO2?-N氧化細菌[33]，是LS-DR脫氮的主要參與者，在麥秸稈、棉花、廢報紙和聚丁二酸丁二醇酯為碳源的人工濕地中均是優勢綱[34]。擬桿菌門也普遍存在生態系統中參與氮循環和能量轉換[35]，其中擬桿菌綱有反硝化功能[36]。此外，擬桿菌門中還存在分解蛋白質、纖維素和脂質等大分子有機物的細菌[27]，促進了絲瓜絡的分解。以絲瓜絡為填料的反硝化濾池中也發現擬桿菌門大量存在[37]。厚壁菌門中也存在參與反硝化和纖維素降解的細菌，曾在生活污水處理系統中被發現[38]。綠彎菌門在反硝化過程中的具體作用并沒有報道，但亞硝酸鹽氧化菌已經從綠彎菌門中分離出來[39]，具有一定參考性。疣微菌門中存在具有較高木質素降解能力的細菌[40]，主要促進絲瓜絡降解。

在被鑒定的優勢屬中假黃色單胞菌能夠還原NO2?-N，但不能還原NO3?-N[41]，Diaphorobacter和黃桿菌均能降解絲瓜絡并進行反硝化，以往研究發現，上述三類菌屬在聚羥基丁酸戊酸共聚酯支撐的養殖尾水處理系統運行中后期成為優勢菌屬[42]，這與本研究相似；Cytophaga xylanolytica能在嚴格厭氧下分解木聚糖等多糖[43]，對絲瓜絡的降解有重要作用；熱單胞菌屬和陶厄氏菌屬是常見的反硝化菌屬[44]，在以豬糞為碳源處理養豬尾水的過程中被富集[45]。有趣的是，有研究發現陶厄氏菌在以纖維素類材料為碳源的人工濕地中被富集，而在可降解聚合物為碳源的人工濕地中減少[34]，說明絲瓜絡對反硝化菌有選擇性。Simplicispira在玉米芯支撐的人工濕地中是優勢反硝化菌屬[46]，在本研究中同樣被發現。草螺菌屬和Uliginosibacterium均為好氧反硝化菌[47]，曾在城市污水處理廠中發現[48]，可能導致反應器內低溶氧條件。Cloacibacterium主要參與絲瓜絡的降解，其對玉米芯[49]、羥基丁酸和羥基戊酸共聚物[50]也有降解作用。綜合來看，這些富集菌屬共同促進了絲瓜絡的降解和反硝化的進行。添加CH3COONa[51]、小麥秸稈、棉花、聚琥珀酸丁二烯和報紙[34]的反硝化系統中均富集了反硝化功能屬。相反，甲烷鬃菌屬、甲烷繩菌屬和Methanoregula等一些產甲烷古細菌在LS-DR內豐度降低，這可能是有機物濃度的增加對它們的生長代謝有抑制作用[52]，在同步反硝化產甲烷系統中也有類似現象發生[53]。

4 結論

INC為50 mg/L，HRT為24 h時，LS-DR的反硝化性能最佳，NO3?-N去除率達到98.97%±0.52%，TN去除率達到97.84%±0.94%，NO2?-N處于較低水平(＜0.5 mg/L)，能夠實現完全反硝化。在HRT為24 h的基礎上，當INC分別增加至75、100和125 mg/L時，LS-DR的NO3?-N去除率和NRR均隨INC的增加而增加，出水COD隨INC的增加而降低，但均未實現完全反硝化。

在HRT為24 h，INC為50 mg/L條件下運行14 d后，LS-DR內細菌群落結構發生改變，優勢菌門包括變形菌門、擬桿菌門、彎曲桿菌門、厚壁菌門和疣微菌門。被鑒定的優勢菌屬中熱單胞菌屬、陶厄氏菌屬、固氮螺菌屬、Simplicispira、假黃色單胞菌屬、草螺菌屬和Uliginosibacterium能夠進行反硝化，Cytophaga xylanolytica和Cloacibacterium主要參與了絲瓜絡的降解，Diaphorobacter和黃桿菌既能進行反硝化，也能降解絲瓜絡。

（作者聲明本文無實際或潛在的利益沖突）