血清MG53 水平與急性心肌梗死患者PCI 后發生心肌缺血再灌注損傷的相關性分析

姚家芳 李小旺

經皮冠狀動脈（下稱冠脈）介入治療（percutaneous coronary intervention，PCI）是目前救治急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）較有效的方法之一，通過開通冠脈相關梗死部位，進而恢復血流灌注，改善心肌缺血癥狀，達到挽救患者生命的目的[1]。但部分患者缺血心肌恢復血流灌注后，可能出現心肌細胞能量代謝障礙、心肌細胞結構變化、心律失常、微血管內皮細胞損傷及功能障礙等現象，即心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI），導致AMI 患者預后不良[2]。因此，如何早期預測和治療MIRI 是臨床關注和研究的焦點。目前臨床主要根據心肌肌鈣蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isozymes，CK-MB）等生化指標等評估患者心肌功能狀態，但各項生化指標主要應用于疾病的早期輔助診斷，受治療及患者體內其他抗體影響，檢測結果準確性不高。血清MG53 是多功能三結構域家族成員之一，主要表達于心臟和骨骼肌中，可維持細胞完整性、保持細胞正常功能形態[3]。孫葉海等[4]研究發現，缺血性心臟損傷可導致血中內緣性MG53 水平升高，血清MG53 水平預測急性ST 段抬高型心肌梗死患者預后不良具有較高的價值?？梢?，MG53 參與心臟的缺血預適應/后適應保護機制，但其在AMI 患者中的具體機制仍少見報道。為此，本研究通過分析AMI 患者PCI 治療后血清MG53 水平，探討其對MIRI 的檢測價值，現將結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選擇2021 年2 月至2023 年2 月湖州市第一人民醫院收治的行PCI 治療的AMI 患者142 例，其中男80 例，女62 例，年齡43～68（59.38±7.42）歲；體重指數（body mass index，BMI）20.8～26.5（23.1±2.3）kg/m2；梗死部位：前壁84 例，下壁58例；糖尿病53 例，高血壓69 例；吸煙史75 例，飲酒史63 例。納入標準：AMI 符合《急性冠脈綜合征急診快速診療指南（2019）》相關診斷標準[5]；符合PCI指征并擬行PCI；發病至入院治療時間＜12 h。排除標準：陳舊性心肌梗死；既往行PCI；原發性心力衰竭、心肌炎、心臟瓣膜疾病、先天性心臟病等其他器質性心臟??；近期有手術史或創傷史；合并惡性腫瘤；合并自身免疫性、血液系統或傳染性疾??；合并嚴重肝腎功能障礙。本研究經本院醫學倫理委員會審查通過，患者或家屬均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 藥物治療 兩組患者入院后均行PCI，術前予患者口服負荷劑量的阿司匹林（規格：100 mg，批號：HJ20160684，德國拜耳醫藥保健公司）300 mg，負荷劑量的替格瑞洛（規格：90 mg，批號：H20193160，石藥集團歐意藥業有限公司）180 mg 或氯吡格雷（規格：75 mg，批號：H20193160，石藥集團歐意藥業有限公司）300 mg，阿托伐他汀鈣片[規格：20 mg，批號：H20193144，齊魯制藥（海南）有限公司]口服20 mg，靜脈注射肝素鈉注射液（規格：2 mL/12 500 U，批號：H20033326，國藥集團容生制藥有限公司）100 U/kg。

1.2.2 PCI 治療 采用橈動脈途徑（若無法經橈動脈造影穿刺，則改為大腿根部股動脈進行），切口2～3 mm，從患者手腕橈動脈處插入導管，指引導管至待擴張冠脈口，在X 線下注射少量造影劑，直接觀察冠脈狹窄情況，將相應大小球囊沿導引鋼絲至狹窄部位予以適當壓力進行擴張，擴張直至撐開血管腔，保持長時間血管通暢，放入支架，保持支架撐開狀態?；爻菲餍?，將支架留在病變血管內，以增加血供。

1.2.3 MIRI 診斷標準 患者PCI 后行心電圖、超聲心動圖、冠脈造影等檢查，MIRI 的診斷根據美國心臟病學會制定的相關標準[6]：（1）閉塞的冠脈血管再通后出現嚴重低血壓、心動過緩或頻發室性期前收縮；（2）經過藥物治療甚至電復律或電除顫治療后，嚴重的室性心律失常仍存在；（3）冠脈造影顯示術后冠脈前向血流分級（thrombolysis in myocardial infarction，TIMI）分級≤2 級，同時不合并血栓、痙攣或夾層等現象。對出現上述癥狀的患者則判定為MIRI患者，并納入MIRI 組，其余患者納入非MIRI 組。

1.2.4 血清MG53 及其他實驗室指標檢測 抽取患者PCI 后第1 天空腹靜脈血3 mL，室溫下3 000 r/min離心10 min，取上清液，置于-80 ℃冰箱保存。采用中國安圖全自動化學發光免疫分析儀（AutoLumo6200）及美國LifeSpan BioScience Inc 公司生產的試劑盒，采用酶聯免疫吸附法檢測血清MG53 水平。采集患者PCI 后第1 天空腹靜脈血6 mL，分裝于裝入帶分離膠的促凝管和枸櫞酸鈉抗凝采血管中，取帶分離膠的促凝管，3 000 r/min 離心10 min，取上清液，采用ARCHITECTi2000SR 全自動免疫分析儀及配套試劑盒檢測cTnI 水平，采用免疫熒光法檢測CK-MB 水平。另取枸櫞酸鈉抗凝采血管，1 500 r/min離心15 min，取血漿，采用酶聯免疫吸附法檢測D-二聚體（D-dimer，DD）水平。

1.3 統計學處理 采用SPSS 25.0 統計軟件。符合正態分布的計量資料以表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；采用點二列相關性分析PCI 后血清MG53水平與AMI 患者PCI 后發生MIRI 的關系；繪制ROC 曲線，并計算AUC，評估血清MG53 水平對AMI 患者PCI 后發生MIRI 的檢測價值，AUC 值＞0.9表示檢測性能較高，0.7＜AUC≤0.9 表示有一定檢測性能，0.5＜AUC≤0.7 表示檢測性能較低，AUC≤0.5表示無檢測性能。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AMI 患者PCI 后MIRI 發生情況 142 例AMI患者PCI 后出現MIRI 61 例（MIRI 組），發生率為42.96%。

2.2 兩組患者臨床資料及血清指標比較 MIRI 組患者血清MG53 水平高于非MIRI 組，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組其他指標比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）。見表1。

表1 兩組患者臨床資料及血清指標比較

2.3 血清MG53 水平與AMI 患者PCI 后發生MIRI的相關性分析 經相關性分析，血清MG53 水平與AMI 患者PCI 后發生MIRI 呈正相關（r=0.386，P＜0.001）。

2.4 血清MG53 水平對AMI 患者PCI 后發生MIRI的檢測價值 將AMI 患者PCI 后MIRI 發生情況作為因變量（發生MIRI=1，未發生MIRI 組=0），將血清MG53 水平作為自變量，繪制ROC 曲線，結果顯示，血清MG53 水平對AMI 患者PCI 后發生MIRI的AUC＞0.7，具有一定檢測價值，見表2、圖1。

表2 血清MG53 水平對AMI 患者PCI 后發生MIRI 的檢測價值

3 討論

AMI 患者心肌缺血后，嚴重缺血部分心肌會相對休息，類似冬眠的狀態[7]，此部分心肌細胞的代謝率較低，而在PCI 治療后心肌重新恢復血供，冬眠狀態的心肌細胞得到氧供，進入工作狀態。而積蓄的代謝產物在短時間內產生大量的氧自由基，對其他正常細胞產生氧化損傷，進而發生MIRI，嚴重的可使患者出現心律失常，甚至猝死[8-9]。本研究中，142 例AMI 患者PCI 后有61 例患者出現MIRI，發生率為42.96%，略低于韓婷婷等[10]的研究結果，可能與樣本量、個體差異等因素有關。但與此同時，本研究結果進一步證實了AMI 患者PCI 后MIRI 的發生風險較高，臨床需予以重視。

細胞膜的自我修復是細胞膜破損后的一個重要生理過程，而研究證實，MG53 蛋白對損傷細胞膜具有修復作用，其對細胞膜的保護作用在心肌修復、心肌缺血預適應等生理和病理過程中得到證實[11]。本研究觀察血清MG53 在AMI 患者PCI 后的表達情況，結果顯示，PCI 后發生MIRI 的患者血清MG53水平明顯高于未發生MIRI 的患者；經相關性分析，血清MG53 水平與AMI 患者PCI 后發生MIRI 呈正相關。研究發現，MG53 在心肌組織中存在兩種內生機制，是心臟缺血預適應和缺血后適應保護所必需的，小鼠實驗發現，重組人MG53 可減輕失血性休克引起的缺血再灌注細胞死亡和損傷，證實MG53 在機體中具有心肌保護作用[12]。同時MIRI 最常見的并發癥是心律失常，而心律失常的主要表現為離子通道和電傳導的異常[13-14]。MG53 介導維持心肌細胞的鉀離子電流穩定，確保心肌細胞內動作電位圖形的完整性，MG53 水平異常升高提示心肌細胞的鉀離子電流功能失衡，提示心律失常的發生[15]。此外，MIRI 發生的一個重要途徑是開放線粒體轉換通道通透性增高，導致通道開放，進而促進凋亡蛋白從線粒體釋放至胞漿中，最終導致細胞凋亡或壞死。而經研究證實，血清MG53 可與微囊蛋白3 形成復合物，形成的復合物與PI3K 的p85 亞基結合進而激活RISK 信號通路；此外，MG53 蛋白可提高Akt 磷酸化水平，血清MG53 水平升高，Akt 磷酸化水平升高，RISK 信號通路磷酸化修飾之后失去開放線粒體通透性轉換通道功能，進而減少線粒體膜電位崩解和線粒體途徑的細胞凋亡，發揮心肌保護作用[16-17]。提示MG53 蛋白可成為MIRI 的一個重要靶點，對MIRI 的防治具有重要意義。

本研究ROC 曲線分析結果顯示，血清MG53 評估AMI 患者PCI 后發生MIRI 的AUC＞0.7，具有一定的檢測價值。臨床可通過檢測血清MG53 水平評估AMI 患者PCI 后MIRI 發生風險，并及時采取措施降低患者PCI 后MIRI 發生率。

綜上所述，AMI 患者PCI 后MIRI 發生率較高，血清MG53 水平與AMI 患者PCI 后發生MIRI 存在弱相關，且其對AMI 患者PCI 后發生MIRI 具有一定檢測價值。但考慮到AMI 病因復雜，個體差異較大，用藥劑量難以統一，可能影響血清檢驗結果；同時MIRI 發生機制復雜，包括缺血期引起的心肌超微結構、能量代謝、心功能和電生理等一系列損傷性變化，在血管再通后細胞內氧自由基的大量產生、鈣離子超負荷、白細胞的炎癥作用及高能磷酸化合物缺乏等諸多因素。故而后續還需積累樣本量，分析血清MG53 與上述因素是否存在關系，以及控制上述因素進一步驗證血清MG53 對AMI 患者PCI 后發生MIRI 的檢測價值。