應用白僵菌防治花生蠐螬的研究

時榮榮 王慶雷

（滄州市農林科學院 河北滄州 061001）

花生是我國最重要的油料作物和經濟作物，總產量占全球的40%左右[1-2]。 蠐螬是花生田的地下害蟲優勢種群，主要啃食花生種芽、幼根、果針、初生果莢和莢果， 造成缺苗斷壟以及花生產量和品質的下降，花生因蠐螬危害一般造成減產20%～40%，嚴重的減產70%～80%，甚至絕收[3-4]。 傳統蠐螬防治以化學防治為主，但化學農藥長期過度使用引起的安全性差、高殘留、抗藥性、環境污染等一系列問題越來越受到人們的重視[5]。 且蠐螬長期棲息于土壤中，為害隱蔽，通常使發現為害和施用藥劑滯后，不好把握防治時機[6]，導致地下害蟲防治成為花生生產中的難題。

白僵菌以其殺蟲譜廣、致病力強、應用效果好、無殘留、對非靶標生物安全等特點，廣泛應用于農業病蟲害防治中。 但白僵菌?；暂^強，各菌株之間毒力差別較大， 因此在應用真菌進行生物防治的過程中，針對不同地區、不同種類的害蟲經常要挖掘土著病原真菌和篩選高毒力菌株。

本研究根據白僵菌可以在野外長期存活的特點，將篩選到的高毒力白僵菌菌株制成可濕性粉劑，在播種期時隨花生一起施入土壤中， 考察評價其對蠐螬的控制效果。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌株：布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）BJ4-28 分離自河北滄州采集的金龜子僵死成蟲，菌種保存于滄州市農林科學院植物保護研究所。

供試昆蟲：供試暗黑鰓金龜（Holotrichia parallela）幼蟲由滄州市農林科學院植物保護研究所提供。

1.2 白僵菌對蠐螬的藥效試驗

1.2.1 孢子懸浮液的配置 取培養15 d 左右的白僵菌，在超凈工作臺內加入含0.05% Tween-80 的蒸餾水刮除菌落，洗出平皿內的孢子，轉移到滅菌的三角瓶中，使用恒溫磁力攪拌器中速攪拌20 min，使其均勻分散，配置成母液。

按照10 倍稀釋法將菌液稀釋，在顯微鏡下用血球計數板計數分生孢子數，5 次重復。 然后將分生孢子濃度稀釋至1×108CFU/mL、1×107CFU/mL、1×106CFU/mL、1×105CFU/mL、1×104CFU/mL 5 個濃度的孢子懸浮液備用。

孢子濃度（CFU/mL）=每小格內孢子數平均值×4×106×稀釋倍數

1.2.2 對蠐螬的室內毒力測定 將不同濃度孢子懸

浮液分別拌于100 g 滅菌的干燥土中， 并混勻，使土的濕度為18%， 最終生測濃度為2×107CFU/g、2×106CFU/g、2×105CFU/g、2×104CFU/g、2×103CFU/g。六孔生測板每個孔內接入1 頭2 齡暗黑鰓金龜幼蟲，并放入5～6 粒浸泡發芽的麥粒，將拌好的土均勻分裝至相應濃度下的生測板中， 然后放置于溫度為26°C，光照L∶D 為14∶10 的培養箱中飼養。 每個重復36 頭，3 個重復。 以0.05% Tween-80 無菌水作為陰性對照，將其加入到滅菌的干燥土中，以使土的濕度為18%。 每5 d 觀察1 次，并視取食情況添加新的麥粒，保持六孔板內的土壤濕度適宜，連續觀察30 d。統計死蟲數，并計算試蟲死亡率、校正死亡率。

死亡率=（試蟲總數－活蟲數）/試蟲總數×100%

校正死亡率=［（處理組死亡率－對照組死亡率）/（1－對照組死亡率）］×100%。

1.2.3 田間藥效試驗 將上述BJ4-28 菌株制成含量為1×1010CFU/g 的可濕性粉劑，備用。 田間試驗于2023 年5 月在滄州市農林科學院前營試驗站進行，該地塊常種植花生，蟲口基數較大，土壤肥力中上、地勢平坦、排灌方便、周圍無高稈作物。 播前撒施復合肥40 kg，深耕旋地，平整土面。 起壟種植，壟寬0.6 m，雙行雙粒播種，12 000 株/畝。

（1）試驗設計：試驗共設5 個處理，①用4 kg/畝菌劑穴施處理； ②用6 kg/畝菌劑穴施處理； ③用8 kg/畝菌劑穴施處理； ④化學藥劑處理區用高巧（60%吡蟲啉）30 mL +水250 mL 拌種； ⑤空白對照區。 每個處理3 次重復， 每小區面積為66.7 m2，共15 個小區。

（2）蟲口密度調查：花生收獲前7 d 進行取樣調查，每個處理隨機取5 點，每點取1 m2，調查蠐螬頭數，計算防蟲效果。

（3）花生被害情況及產量調查：收獲時每小區隨機5 點取樣，對花生進行受害調查，每點取1 m2，調查花生莢果受害情況， 并根據花生受害程度做分級處理，計算出各處理的受害指數，最后對試驗小區收獲的花生進行測產，計算花生產量。

花生莢果分級標準[7]，0 級：莢果完好，無被害狀；1 級：果皮受害，形成麻果，果仁完好；2 級：果皮穿孔，半數果仁受害；3 級：果仁全部受害，無完好果仁。

計算各處理對蠐螬的防治效果及增產效果，并使用DPS 對結果進行統計學分析。

防蟲效果=［（對照區蟲口數－藥劑處理區蟲口數）／對照區蟲口數］×100%

受害指數=（各級受害數×相對級數值）／（調查總數×最高級值）×100%

防治效果=［（對照區莢果受害指數－藥劑處理區莢果受害指數）／對照區莢果受害指數］×100%

干果畝產量=濕果畝產量×50%×85%

增產效果=（藥劑處理區產量－對照區產量）／對照區產量×100%

2 結果與分析

2.1 白僵菌對暗黑鰓金龜幼蟲的室內毒力測定

由圖1 可知，處理30 d 后，在含有白僵菌BJ4-28濃度2×103CFU/g、2×104CFU/g、2×105CFU/g、2×106CFU/g、2×107CFU/g 的土壤中， 暗黑鰓金龜2 齡幼蟲的死亡率分別是5.56% 、8.33% 、27.78% 、61.11%、83.33%。 證明該菌株能夠有效侵染目標昆蟲，且濃度越高致死作用越強。 該菌株對暗黑鰓金龜2 齡幼蟲的致死中濃度LC50為1.53×105CFU/g，而在2×107CFU/g 濃度菌量條件下，LT50為15.69 d （R2=0.976 4）（圖2）。

圖1 白僵菌BJ4-28 菌株對暗黑鰓金龜幼蟲的毒力

圖2 白僵菌BJ4-28 菌株對暗黑鰓金龜幼蟲的毒力回歸線

2.2 田間防治效果

由表1 可知，隨著施用劑量的增加，防蟲效果明顯提升，畝施白僵菌BJ4-28 菌劑4 kg、6 kg、8 kg 3 個處理的防治效果分別為28.30%、45.28%、81.13%，使用高巧拌種防治效果為77.36%。由表2 可知，每畝施用8 kg 菌劑劑量處理下，花生好果數明顯增加，受害指數顯著低于空白對照，防效最高為79.45%，增產效果18.21%，此處理與化學農藥處理效果差異不顯著。

表1 不同處理蠐螬平均蟲口密度

表2 不同劑量白僵菌處理對花生防治及增產效果的影響

3 討論與結論

鑒于病原真菌的毒力易受其地理種群及目標害蟲的影響， 所以應用昆蟲病原真菌防治害蟲必須篩選針對靶標昆蟲具有高毒力的菌株。 除此之外， 還要把握防治時機及使用方法， 才能取得良好的防治效果。

金龜子除成蟲期外均在土壤中生活， 發育歷期較長，對花生的整個生育期皆可為害。 近年由于秸稈還田，使用未腐熟的有機肥吸引金龜子產卵，暖冬、防治不利等因素使得蟲量逐年積累， 造成蠐螬危害日益嚴重[8-9]。 且由于蠐螬隱蔽于地下，難以預期為害，現花生又多為覆膜種植，加大了施藥難度[10]。本試驗根據白僵菌能夠在土壤中存活的特性， 在花生播種期施用，將施菌與播種同時進行，既簡化了農事操作，又能達到防蟲的效果，易于被農民接受。

白僵菌需要一定劑量才能達到有效的殺蟲目的，且不同菌株的有效殺蟲劑量也不盡相同，所以明確該菌株的施藥劑量及施藥方式是必須的。

本研究所述BJ4-28 菌株對暗黑鰓金龜毒力較強， 而暗黑鰓金龜是滄州地區花生田蠐螬最大優勢種，約占蠐螬總發生量的88.2%[11]，所以田間試驗效果較好， 而其對于其他種類地下害蟲的防治效果有待進一步驗證。