不同毒力型的幽門螺旋桿菌對胃內微環境的影響

趙小青，肖嘉欣，林 勇，張劍鋒，王文輝，張文杰

（廣東省中醫院珠海醫院脾胃病科，廣東 珠海 519000）

幽門螺桿菌在包括我國在內的世界范圍感染普遍，平均感染率超過50%，是目前感染率最高的有明確致病作用的細菌[1]。大量的研究證實，Hp 是慢性胃炎及消化性潰瘍的主要病因之一，同時Hp 感染與胃癌的發生亦密切相關，在一定程度上增加了胃癌發生風險[2-4]。

Hp 感染后可產生不同抗體，根據所產生的抗體種類和致病能力不同，臨床上將產生細胞毒素相關蛋白A 和細胞空泡毒素A 抗體類型歸為Hp 感染I 型；產生尿素酶A 和尿素酶B 抗體類型歸為Hp 感染Ⅱ型；Hp 感染陽性，抗體檢測均為陰性者為不定型組[5]。近年來不同毒力的幽門螺旋桿菌的致病性及嚴重性受到了廣泛的關注，毒力越強的Hp 毒株對胃黏膜損傷越大[6]。胃部疾病與Hp 感染密切相關，尤其是Ⅰ型Hp 高毒力菌株為胃部疾病的主要致病菌株。不同毒力的Hp 感染可能導致不同的胃液微環境改變，進而導致不同的疾病的發生，筆者通過觀察不同分型的Hp 感染患者胃液中pH 值、Na+、K+、Cl-、IL-6、IL-8、G-17、PG Ⅰ、PG Ⅱ水平的變化，初步探討不同毒力Hp 感染者胃內微環境是否具有差異性，這是否是疾病不同嚴重程度的關鍵環節。

1 資料與方法

1.1 病例資料

收集2021 年12 月至2023 年3 月于廣東省中醫院珠海醫院住院進行胃鏡檢查患者，納入標準：（1）年齡18～70 歲，男女不限；（2）由臨床醫生通過13C 呼氣試驗診斷為Hp 感染或無Hp 感染，無論有無消化道癥狀者；排除標準：近14 d 內服用抑制胃酸分泌和中和胃酸藥物的患者[6]。最終納入：Hp 感染陽性患者79 例；Hp 感染陰性患者31 例。通過Hp 抗體分型檢測最終Hp 感染陽性患者分為：Ⅰ型組52 例，平均年齡（53±9.5）歲，男性16 例、女性36 例。Ⅱ型組11 例，平均年齡（52±9.4）歲，男性6 例、女性5 例。未定型組16 例，平均年齡（49±12）歲，男性7 例、女性9 例。Hp 感染陽性患者篩選抗體均為陰性患者為：空白對照組12 人，平均年齡（54±7.7）歲，男性7 例，女性5 例。以上各組性別、年齡比較無差異（P>0.05）。本研究通過廣東省中醫院珠海醫院倫理委員會審核批準（BE2022-087-01），所有胃鏡檢查患者均簽署知情同意書。

1.2 方法及相關指標檢測

標本采集前12 h 禁止飲食和服用影響胃酸分泌的藥物。進行胃鏡檢查時，描述胃內粘膜狀態，記錄胃鏡診斷，在進行其他操作前首先進行胃液抽取和采集，以干燥潔凈儲存盒采集，量為5 mL。獲取胃液標本后，盡快置入標本收集管-20 ℃冷凍保存，無需離心，待收集齊后，統一進行檢測和評價。檢測前標本自然解凍，3 500 r/min 離心10 min 后取上清液。pH 儀測定酸堿度，分光光度法測定Na+、K+、Cl-含量，酶聯免疫檢測PGⅠ、PGⅡ、G-17、IL-6、IL-8 水平。

1.3 統計學處理

選用統計學軟件 SPSS 25.0 對研究數據進行分析和處理，計量資料以均數±標準差（）表示，2 組比較采用兩獨立樣本t檢驗；多組比較采用單因素方差分析，進行方差齊性檢驗，方差齊，如果樣本含量不同，采用Scheffe 多重比較的方法；如果樣本含量相同，采用Tukey 多重比較的方法；方差不齊，多重比較采用Dunnett T3 兩兩比較。計數資料性別用百分率表示，組間比較采用卡方檢驗；P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病例資料統計

4 組患者一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

表1 4 組患者一般情況比較（）Tab.1 Comparison of general conditions of 4 groups of patients（）

表1 4 組患者一般情況比較（）Tab.1 Comparison of general conditions of 4 groups of patients（）

2.2 Hp 陽性組和Hp 陰性組各項指標比較

Hp 陽性組與Hp 陰性組相較，pH 值、Na+、K+差異無統計學意義（P>0.05）；Hp 陽性組與Hp陰性組相比較Cl-含量降低（P<0.05），見表2。Hp 陽性組與Hp 陰性組相比較，PGⅠ、PGⅡ、IL-6、IL-8、G17 均有上升（P<0.05），見表3。

表2 Hp 陽性組和Hp 陰性組酸堿度及相關離子比較（）Tab.2 Comparison of pH and related ions between the Hp-positive group and the Hp-negative group（）

表2 Hp 陽性組和Hp 陰性組酸堿度及相關離子比較（）Tab.2 Comparison of pH and related ions between the Hp-positive group and the Hp-negative group（）

注：與Hp陰性組相比，*P <0.05。

表3 Hp 陽性組和Hp 陰性組各項指標比較（）Tab.3 Comparison of Hp-positive and Hp-negative groups（）

表3 Hp 陽性組和Hp 陰性組各項指標比較（）Tab.3 Comparison of Hp-positive and Hp-negative groups（）

注：與Hp陰性組相比，*P <0.05。

2.3 不同毒力型幽門螺旋桿菌感染組與空白對照組的各項指標比較

Ⅰ型組分別與Ⅱ型組、未定型組、空白對照組各組相比較，pH 值、Na+、K+差異無統計學意義（P>0.05）。Ⅰ型組與未定型組的Cl-含量較空白對照組降低，差異有統計學意義（P<0.05）；Ⅱ型組與其他各組相較，Cl-含量差異無統計學意義（P>0.05），見表4。

表4 4 組酸堿度及相關離子比較（）Tab.4 Comparison of pH and related ions in the four groups（）

表4 4 組酸堿度及相關離子比較（）Tab.4 Comparison of pH and related ions in the four groups（）

注：與Ⅰ型組相比，*P <0.05；與空白對照組相比，#P <0.05。

Ⅰ型組與Ⅱ型組、未定型組、空白對照組比較，IL-6、IL-8、PGⅠ均有上升，差異有統計學意義（P<0.05）?？瞻讓φ战M與其他各組之間比較，PG Ⅱ下降，差異有統計學意義（P<0.05）。Ⅰ型組與未定型組的胃泌素17 含量差異無統計學意義（P>0.05）。Ⅰ型組與Ⅱ型組、空白對照組比較，胃泌素17 上升，差異有統計學意義（P<0.05），見表5。

表5 4 組PGⅠ、PGⅡ、IL-6、IL-8、G17 比較（）Tab.5 The four groups were compared with PGI.，PGII.，IL-6，IL-8 and G17（）

表5 4 組PGⅠ、PGⅡ、IL-6、IL-8、G17 比較（）Tab.5 The four groups were compared with PGI.，PGII.，IL-6，IL-8 and G17（）

注：與Ⅰ型組相比，*P <0.05；與空白對照組相比，#P <0.05。

3 討論

幽門螺旋桿菌是全球范圍內高感染率的慢性感染性致病菌，它被認為是多種消化道疾病的主要病因，常見如慢性胃炎、消化道潰瘍，更有甚者可以引起胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤和胃癌[7]。近期研究發現它還和心血管系統、神經內分泌系統相關疾病的發生發展緊密相關[8-9]。因此深入研究幽門螺旋桿菌感染后的致病機制是必不可少的。

宿主感染Hp 后可通過Hp 定植、損害胃黏膜屏障、炎癥與免疫反應、毒力基因造成的損害、感染后胃泌素和生長抑素、調節失衡所致的胃酸分泌異常等方式對機體造成損害。隨著檢測技術的進步，Hp 菌株中含有細胞毒素相關蛋白A（CagA）、細胞空泡毒素A（VacA）、尿素酶A（UreA）、尿素酶B（UreB）、熱休克蛋白 60 和氮素還原酶等抗原蛋白。Hp 感染后可產生不同抗體，根據所產生的抗體種類和致病能力不同，臨床上將產生CagA 和VacA 抗體類型歸為Hp 感染Ⅰ型[10]。產生UreA 和UreB 抗體類型歸為Hp 感染Ⅱ型[11]。CagA 是Hp 最具特點的1 種毒力蛋白，有研究指出，CagA 進入宿主體內后誘導胃黏膜內IL-8 水平明顯增高，CagA 通過Ⅳ型分泌系統進入宿主體內后誘導胃黏膜內IL-8 水平增高，導致中性粒細胞、T 淋巴細胞等免疫細胞激活、粘附，促使上皮細胞炎癥損害明顯加重[12]。VacA 可破壞上皮細胞結構的完整性，上皮下撥產生空泡樣改變，損傷黏膜，屏障功能下降，調節炎癥反應等[13]。董欣紅等[14]通過1 項多中心臨床研究發現：不同毒力型的Hp 菌株感染，致病力也有差異，Ⅰ型 Hp比Ⅱ型有更強的致病力，更易致消化性潰瘍。楊靜怡等[15]通過對不同亞型幽門螺旋桿菌感染與功能性消化不良癥狀的關系研究發現：Ⅰ型感染功能性消化不良患者的臨床癥狀重于Ⅱ型感染的。彭夢巧等[16]通過統計不同菌株Hp 感染的胃粘膜在各個階段病變狀態的差異性，發現胃部疾病與Hp感染密切相關，且Ⅰ型致病菌，黏膜損傷更嚴重。

PG Ⅰ、PG Ⅱ是胃黏膜特異性功能酶的重要組成部分，由胃底腺的主細胞和黏液頸細胞分泌，是參與消化的無活性前體。PG Ⅰ、PG Ⅱ可被胃液中的的鹽酸激活，進而參與消化活動，但是PGⅠ、PG Ⅱ過多、活性增強對胃黏膜組織具有損傷作用[17]。本研究亦發現，Hp 感染后PG Ⅰ的表達量明顯增多，Ⅰ型Hp 感染患者的PG Ⅰ表達量比Ⅱ型Hp 感染患者的PG Ⅰ表達量增加（P<0.05）。

胃泌素-17 主要是由G 細胞分泌，分布在胃竇、胃底部等，當胃部因各種原因受損時，胃粘膜功能也隨之出現不同程度的改變[18]。黃鳳敏等[19]發現：十二指腸潰瘍患者伴有血清G-17 水平的升高，其水平與Hp 感染及病情密切相關，可用于臨床診斷及病情評估。本實驗通過檢測胃液G-17 發現，Hp 陽性患者比Hp 陰性患者G-17 表達量明顯升高，其中Ⅰ型感染者較Ⅱ型感染者G-17 水平升高（P<0.05）。因此可以看出不同毒力Hp 感染后G-17 具有差異性。

IL-6、IL-8 是1 種促炎因子，是判斷機體炎癥常用的指標[20]。有研究發現[21]：Hp 陽性患者IL-6 和IL-8 水平高于陰性患者，且與慢性胃炎的嚴重程度成正相關。吳捷莉等[22]通過體外細胞實驗發現：CagA+、CagE+基因型Hp 菌株通過蛋白酪氨酸激酶的磷酸化增加胃上皮細胞IL-8 的分泌量；潘小炎等[23]發現：Ⅰ型Hp 感染患者IL-8 明顯高于Ⅱ型Hp 感染患者。有研究報道[24]提出：CagA 蛋白可激活和激素白細胞趨化，促進IL-8、腫瘤壞死因子α 的釋放，進而導致炎癥反應加劇和組織損傷。本研究結果發現：IL-6、IL-8 表達量在Hp 感染患者的胃液中更高，且不同Hp 菌株分型之間也具有差異性。

綜上所述，本研究結果提示，不同毒力的Hp 感染對胃內酸堿度及鈉、鉀、氯離子影響不大，但是對胃蛋白酶及炎癥因子的影響具有差異性，Ⅰ型幽門螺旋桿菌感染的對胃腔的內環境改變更明顯，可能通過增加IL-6、IL-8、胃泌素17 的表達量，影響PG Ⅰ、PG Ⅱ的表達和激活造成對胃黏膜損傷，進而導致消化功能異常和相關疾病的發生、發展。