黃精配伍老鷹茶輔助降血脂作用

唐子惟，劉應，陶鵬，陳林林，楊聯堂，彭騰，龍飛

（成都中醫藥大學 藥學院，西南特色中藥資源國家重點實驗室，中藥材標準化教育部重點實驗室，四川 成都 611137）

高脂血癥是現代社會較高發的一種慢性疾病，現代社會生活水平質量提高，人們在長時間伏案工作后傾向于回家“躺平”，從而缺乏鍛煉，加上日常飲食油膩不注重營養搭配，長此以往容易導致體脂增加、體型肥胖、氣血不暢、血脂升高等問題。高脂血癥患者雖在身體上不會感覺到明顯的不適，但是高血脂會導致多種并發癥，如果不及時采取措施，就有可能導致冠心病、腦梗死、腎功能衰竭等疾病[1]。生活中可通過運動、控制飲食、規律作息及保持良好的心態等來預防高脂血癥。除此之外，可在醫生的指導下服用相關藥物，如貝特類、他汀類等，但貝特類藥物存在胃腸道癥狀和骨骼肌癥狀等不良反應，他汀類藥物存在肌病和肝臟受損等不良反應[2]。因此可在日常飲食中選擇有降血脂作用的食物及健康產品來預防高血脂癥。

黃精為百合科植物滇黃精（PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.）、黃精（PolygonatumsibiricumRed.）或多花黃精（PolygonatumcyrtonemaHua）的干燥根莖，是衛健委公布的藥食同源藥材之一，具有補氣養陰、健脾、潤肺、益腎的功效[3]，有研究報道黃精具有抗炎[4-5]、抗腫瘤[6]、降血糖[7-8]、降血脂[9-11]、增強免疫力[12-13]及肝腎保護性[14-15]等作用。老鷹茶是以樟科木姜子屬植物毛豹皮樟（LitseacoreanaLevl.var.lanuginosa）的嫩芽、葉或枝葉加工制作而成，在我國四川、重慶、貴州等地資源較為豐富，它含有豐富的黃酮類、多酚類、多糖、氨基酸等物質[16]，是我國民間長期飲用的一種茶。老鷹茶不但營養豐富，而且生理活性突出，《本草綱目》中記載其有“止咳、祛痰、平喘、消暑解渴”的功效[17]。除此之外，現代藥理學研究顯示，其具有抑菌抗炎[18-19]、護肝[20]、抗癌[21]、抗氧化[18，22-23]、降血糖血脂[24-25]等功效，是消食化積、祛暑、利尿、解表的純天然原材料。然而，多年以來，人們一直自行采摘老鷹茶并將其用于餐飲業，作為一般的火鍋底料或簡單的飲用茶，其潛在價值尚未得到充分開發。為充分開發利用老鷹茶這一地方特色資源，本研究以達州大竹縣產老鷹茶成熟枝葉為原料，對黃精與老鷹茶配伍進行輔助降血脂作用研究，評價其輔助降血脂的功效，以期為老鷹茶資源的開發利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

無特定病原體（specific pathogen free，SPF）雄性昆明小鼠[體質量（20±2）g，96 只，許可證號：SCXK（京）2019-0010]、基礎飼料、高脂飼料（58.6% 基礎飼料+15% 豬油+20% 蔗糖-5% 酪蛋白+1.2% 膽固醇+0.2%膽酸鈉）：斯貝福（北京）生物技術有限公司。

制黃精（生品黃精來源于四川達州，經成都中醫藥大學藥學院龍飛教授鑒定為多花黃精）：成都中醫藥大學黃精產業研究所自制；老鷹茶：四川省達州市大竹縣；辛伐他?。?0 mg/片）：山東鑫齊藥業有限公司；羧甲基纖維素鈉溶液（carboxymethylcellulose sodium，CMC-Na）：上海長光企業發展有限公司；血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、谷草轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷丙轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）測定試劑盒：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）測定試劑盒：武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。

1.2 儀器與設備

分析天平（BSA124S-CW）：賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；多管架自動平衡離心機（TDZ5-WS）：湘儀離心機有限公司；渦旋混合器（MX-S）、數控搖床（SLK-O3000-S）、臺式高速微量離心機（D3024）、臺式高速冷凍離心機（D3024R）：美國SCILOGEX 公司；優普系列超純水器（UPR-II-10T）：四川優普超純科技有限公司；數顯氣浴恒溫振蕩器（THZ-82A）：常熟朗越儀器制造有限公司；高速低溫組織研磨儀（KZ-III-F）：武漢賽維爾生物科技有限公司；全自動生化分析儀（BS360S）：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；酶標檢測儀（Epoch）：美國伯騰儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 藥液制備

1）制黃精：參照文獻[26]的方法制備四蒸四曬黃精。

2）藥液的制備：取一定量的黃精和老鷹茶，分別加10 倍量的水煎煮3 次，每次1 h，濾過濃縮得到黃精及老鷹茶提取液。黃精配伍老鷹茶的提取液，按黃精和老鷹茶5∶3（質量比）混合后，同上煎煮方法制得。

3）辛伐他汀溶液：辛伐他汀片研成粉末，準確稱取20 mg，加入0.5% CMC-Na 溶液，配制成濃度為1 mg/mL的藥液。

1.3.2 動物分組及給藥

在22～25 ℃的環境中，將96 只小鼠，每8 只為一組飼養于鼠盒中，飼喂普通飼料、純凈水，適應性自由飲食一周。實驗時按體質量隨機分為空白對照組（NC）、模型組（MC）、陽性對照組（PC）、黃精老鷹茶低（HLD）、中（HLZ）、高（HLG）劑量組、黃精低（HD）、中（HZ）、高（HG）劑量組、老鷹茶低（LD）、中（LZ）、高（LG）劑量組，每組8 只?？瞻讓φ战M飼喂基礎飼料，其余各組均給予高脂飼料。高脂飲食一周后，給予低、中、高3 個劑量組，分別按人體給藥量的9、18、36 倍給藥，即黃精老鷹茶低、中、高劑量組，黃精低、中、高劑量組及老鷹茶低、中、高劑量組分別為193、386、772 mg/kg，依據小鼠體質量，每天相同時間按10 mL/kg 的體積灌胃一次，空白對照組和模型組灌胃等體積0.5% CMCNa 溶液；陽性對照組采用同樣的方法灌胃等體積辛伐他汀溶液（10 mg/kg），持續8 周。第8 周結束后，獲取實驗材料用于后續分析。

1.3.3 小鼠一般情況及體質量變化監測

在實驗過程中，每日觀察和記錄小鼠的飲食、飲水、活動和毛色等。每周稱重一次，記錄并觀察，再根據體質量調整給藥量，一直到實驗結束為止。

1.3.4 指標測定

第8 周結束后，所有的小鼠均在12 h 內禁食不禁水，摘眼球取血至離心管，離心（3 000 r/min，4 ℃），分離血清，并根據試劑盒的檢測要求，測定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C 的含量，以及AST 和ALT 的酶活性。取血后，解剖各組小鼠，迅速摘取各組小鼠的肝臟并稱重，計算肝臟指數后，錫箔紙包好保存于-80 ℃低溫冰箱備用。測定時，取一定量的組織，用9 倍勻漿介質研磨，然后將研磨液3 000～4 000 r/min離心10 min，取上清制備成10% 的組織勻漿，測定肝組織中SOD 和GSH-Px 活性及MDA 含量。肝臟指數計算公式如下。

I=Ml/Mm× 100

式中：I為肝臟指數，%；Ml為小鼠肝臟質量，g；Mm為最后一次稱得的小鼠體質量，g。

1.4 數據處理

數據用SPSS 軟件進行統計學處理，多組間使用單因素方差分析（analysis of variance，ANOVA）進行對比，用最小顯著性差異法（least significant difference，LSD）對兩組間實驗數據進行對比，結果用平均值±標準差表示，P＜0.05 表示有顯著性差異，P＜0.01 表示有極顯著差異。

2 結果與分析

2.1 小鼠一般情況分析

實驗期間，空白對照組小鼠攝食、飲水、排泄等各方面狀況良好，毛色有光澤；模型組小鼠開始兩周同正常組相似，未見明顯異常，隨著實驗進行，其毛色逐漸發黃，光澤度較差；其余組各方面狀況良好，毛色略有光澤。

2.2 黃精老鷹茶對小鼠體質量及肝臟指數的影響

黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠體質量及肝臟指數的影響如表1 所示。

表1 黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠體質量及肝臟指數的影響Table 1 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the weight and the liver index of hyperlipidemia mice

由表1 可以看出，模型組肝臟指數極顯著高于空白對照組（P＜0.01），且其它組與模型組比較，肝臟指數均有所降低，其中黃精老鷹茶高劑量組肝指數顯著降低（P＜0.05）。此外，各劑量組的肝臟指數與劑量呈負相關，即給藥劑量越高，肝臟指數越低。表明黃精和老鷹茶均能降低高脂血癥小鼠的肝臟質量。

模型組小鼠在第4 周后的體質量極顯著高于空白對照組（P＜0.01）；黃精老鷹茶高、中、低劑量組分別在第4、5、7 周后，體質量顯著低于模型組（P＜0.05）；黃精中、高劑量組及老鷹茶中、高劑量組的體質量均在7 周后顯著低于模型組（P＜0.05），黃精低劑量和老鷹茶低劑量組在飼養全程與模型組均無顯著性差異（P＞0.05）。結果顯示，給藥最后一周（第8 周）黃精老鷹茶高劑量組的體質量與空白對照組差異較小，并低于陽性對照組，表明其可減少小鼠因高脂飲食導致的體質量增加。

2.3 黃精老鷹茶對小鼠血脂水平及相關酶活性的影響

對小鼠的血脂及相關酶活性進行檢測，TC、TG、HDL-C、LDL-C、AST 及ALT 的檢測結果見表2、表3。

表2 黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠血脂水平的影響Table 2 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the blood lipid level in hyperlipidemia mice

表3 黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠相關酶活性的影響Table 3 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on related enzyme activities in hyperlipidemia mice

從表2 中可以看出，與空白對照組相比，模型組小鼠血清TC、TG、LDL-C 極顯著升高（P＜0.01），HDL-C極顯著降低（P＜0.01），說明模型組小鼠的血脂代謝異常，造模成功。與模型組比較，高劑量的黃精老鷹茶能極顯著降低血清中TC、TG、LDL-C 水平且能升高HDL-C 水平（P＜0.01）；且隨著黃精老鷹茶劑量降低，其降脂效果也減弱，呈現一定的劑量依賴性，即黃精老鷹茶劑量越高，TC、TG、LDL-C 的濃度越低，HDL-C 的濃度越高。而對于黃精各劑量組及老鷹茶各劑量組而言，各指標濃度雖也呈一定的劑量相關性，但與模型組相比，僅有黃精高劑量組及老鷹茶高劑量組具有顯著的差異（P＜0.05）。由此可以看出，在相同劑量組下，黃精老鷹茶組效果更好，表明黃精和老鷹茶在一定的劑量下可調節小鼠血脂代謝，起到輔助降血脂的作用，且兩者合用效果優于單獨使用。

由表3 可知，模型組小鼠血清中AST 和ALT 的活性與空白對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05），表明模型組小鼠肝損傷。與模型組比較，黃精高劑量組及老鷹茶高劑量組可顯著降低AST 的活性（P＜0.05），老鷹茶高劑量組可顯著降低ALT 的活性（P＜0.05），黃精低劑量組也對這兩種酶活性具有一定程度的降低作用；黃精老鷹茶中、高劑量組的AST 及ALT 的活性均顯著低于模型組（P＜0.05 或P＜0.01），其余各劑量組與模型組相比無顯著性差異。在同劑量組的對比下，黃精老鷹茶組效果更好。以上結果說明，黃精和老鷹茶均可輔助緩解高脂飲食對小鼠肝臟的損傷，兩者配伍使用效果更佳。

2.4 黃精老鷹茶對小鼠肝臟抗氧化水平（GSH-Px、MDA、SOD）的影響

黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠肝臟抗氧化水平的影響如表4 所示。

表4 黃精老鷹茶對高脂血癥小鼠肝臟抗氧化水平的影響Table 4 Effect of Polygonatum cyrtonema-Hawk tea on the liver antioxidant level in hyperlipidemia mice

由表4 可知，與空白對照組相比，模型組小鼠肝臟MDA 含量極顯著升高（P＜0.01），GSH-Px 和SOD 的活性顯著降低（P＜0.05），表明長期飲食高脂飼料對小鼠肝臟有損害，且抗氧化能力下降。與模型組相比，黃精老鷹茶中、高劑量組的MDA 含量顯著降低（P＜0.05），黃精老鷹茶高劑量組的GSH-Px、SOD 活性顯著升高（P＜0.05）；黃精高劑量組、老鷹茶高劑量組的MDA 含量顯著降低（P＜0.05），老鷹茶高劑量組的GSH-Px 活性顯著升高（P＜0.05）。表明以上各劑量組在一定程度上能幫助小鼠肝臟恢復抗氧化能力，且同劑量組相比，黃精老鷹茶組效果最好，老鷹茶組次之。

3 討論與結論

研究結果表明，長期食用高脂飼料會使小鼠血脂水平異常，并對小鼠肝臟造成一定的損傷，使其抗氧化能力降低，但若給予等劑量的黃精、老鷹茶，可使其血脂水平趨于正常，緩解肝臟損傷，恢復一定的抗氧化作用。這說明黃精、老鷹茶均具有輔助降血脂的作用，并都能起到一定的保護肝臟的作用，但根據各劑量組結果顯示，黃精老鷹茶組配伍效果更好，說明兩者合用效果優于單獨使用。

研究發現黃精多糖能明顯提高肝組織中過氧化物酶體增殖物激活受體α（peroxisome proliferator-activated receptor-alpha，PPAR-α）、過氧化物酶體增殖物激活受體β（peroxisome proliferator-activated receptor-beta，PPAR-β）信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid，mRNA）及蛋白的表達，降低肝組織中過氧化物酶體增殖物激活受體β（peroxisome proliferator-activated receptor-gamma，PPAR-γ）、固醇調節元件結合蛋白1c（sterol regulatory element binding protein-1c，SREBP-1c）、白介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosing factor-alpha，TNF-α）mRNA 的表達，能有效地控制肝脂質的氧化，調控脂類代謝相關基因及蛋白質的表達，從而達到防治高血脂的目的[27]；老鷹茶水提物可通過影響肥胖小鼠體內膽汁酸代謝、AMPK/ACC 信號通路和腸道菌群結構來降低小鼠體質量及內臟脂肪、改善血脂及轉氨酶，保護肝臟功能[24]。老鷹茶總黃酮可通過抑制TLR4 介導的細胞信號轉導通路來改善大鼠非酒精性脂肪性肝炎[28]。

中醫認為，脾失運化是高脂血癥的主要病機，而由于脾虛及肝脾功能紊亂引起的痰濕，則是高脂血癥的病因[29]。黃精具有補氣養陰、健脾的功效，老鷹茶具有祛痰平喘的功效。通過黃精來補虛扶正，調理脾氣，使脾運化有常，再兼用老鷹茶祛痰，則痰淤自消，起到輔助降血脂的作用。老鷹茶性涼，配伍補益藥制黃精，能夠制約茶的涼性，而黃精性平、味甘，久服易滋膩，配伍老鷹茶可緩解其滋膩性。兩者合用可互補其不足，并且二者均具有輔助降血脂的作用，可能與多糖、皂苷、黃酮、多酚等活性成分相輔相成，協同發揮輔助降血脂作用有關，其作用機理尚需進一步探討。