淺析水產品中氯芬新殘留的檢測技術及食用風險

◎ 金 定

（扎魯特旗市場檢驗檢測中心，內蒙古 通遼 029100）

氯芬新是一種殺菌劑和消毒劑，長期食用含有氯芬新殘留的水產品，會對人體健康產生不良影響。氯芬新是一種長效殘留農藥，當水產品中存在氯芬新殘留時，可能會造成環境污染，對水生生物和生態環境產生負面影響。此外，氯芬新還可能在食品加工過程中轉化為有毒物質，增加食品安全風險。為此，檢驗水產品中的氯芬新殘留，探尋可靠、精確的檢測方法是必要的[1]。

1 材料與設備

1.1 材料與試劑

從當地市場中購買草魚、牡蠣、對蝦、梭子蟹、中華鱉、海參等常見的水產品。本研究所用試劑如表1 所示。

表1 試劑表

1.2 儀器與設備

研究所用儀器與設備見表2。

表2 儀器設備表

1.3 標準溶液與流動相配置

標準溶液的配制表如表3 所示。在標準溶液配制的基礎上，按照定容的配置方法，分別配置0.5、1.0、2.0、10.0、50.0、100.0 ng·mL-1的系列標準工作溶液。

表3 標準溶液配制表

水相的配置方法：準確稱取0.077 08 g 的乙酸銨，將乙酸銨加入燒杯中攪拌，直到完全溶解，將溶解后的乙酸銨轉移至一個500 mL 的容量瓶中，超聲處理10 min，使溶液更加均勻、穩定。

有機相的配置方法：使用適當的容量瓶量取500 mL 的色譜級乙腈，將乙腈緩慢倒入流動相瓶中，并超聲波處理10 min。

2 方法

2.1 樣品前處理

樣品制備：將新鮮的草魚、牡蠣、對蝦、梭子蟹、中華鱉和海參，切碎放入高速組織均質機中。完成均質后，將樣品轉移到干凈的食品容器中，并用標簽標明樣品的名稱和日期，確保封閉容器以防止空氣和異物進入。

樣品提取方法：使用電子天平分別稱取5.00 g 的魚、蝦、貝、海參、甲魚和蟹試樣，準備50 mL 具有螺旋蓋的聚丙烯離心管，加入陶瓷均質子和均質樣品，向離心管中加入10 mL 乙腈、4 g 無水Na2SO4和1 g NaCl，放入離心機中，以8 000 rpm 的速度，離心5 min。

樣品凈化方法：準備一個含有400 mg PSA、400 mg C18 和1 200 mg 無水MgSO4的15 mL 離心管，使用移液器將6 mL 上清液吸取到離心管中，渦旋攪拌1 min。隨后，放入離心機中以8 000 rpm 的速度離心5 min，取出上清液，使用0.22 μm 濾膜進行過濾，將過濾后的上清液轉移到進樣瓶中，并密封好。

2.2 儀器條件

本文所用的儀器條件和質譜參數如表4、5 所示。

表4 儀器條件表

表5 質譜參數表

3 結果分析

3.1 標準溶液的穩定性

使用乙腈溶劑將購置的標準品溶解，并配制成所需的適量濃度的儲備液，將配制好的儲備液分裝到棕色西林瓶中。使用液相色譜-串聯質譜儀進行測定，并記錄每次測定的峰面積[2]。根據氯芬新標準溶液的測定結果來看，氯芬新的峰面積變化率不大，保持在97%～98%，故標準儲備液在-20 ℃條件下的放置時間不應超過6 個月。

3.2 前處理條件的選擇

根據本研究結果，乙腈和甲醇的提取效率較高，可以有效提取樣品中的油脂和色素[3]。1%甲酸乙腈在提取草魚和對蝦樣品時，也表現出良好的提取效果。

試驗中為優化提取次數，選擇2 組空白樣本進行回收實驗，對照樣品中加入10 mL 的乙腈重復提取1次[4]。根據結果來看，提取1 次即可完成對氯芬新藥物的提取要求，并且與多次提取相比，1 次提取的回收率、檢出限和重復性沒有顯著變化。因此，考慮到試劑成本和前處理時間的因素，選擇1 次提取是符合實際要求的最佳選擇。

本文選擇不同量的C18 和PSA 填料的QuEChERS復合凈化劑，分別對魚和蝦凈化后的基質效應展開分析。其中，復合凈化劑 A 指含 150 mg PSA、150 mg C18、900 mg 無水MgSO4；復合凈化劑B 為含400 mg PSA、400 mg C18、1 200 mg 無水Mg SO4。將兩個獨立的樣本進行t檢驗，檢驗發現，兩種復合凈化劑對于對蝦基質，P（F≤f）單尾＞0.025，整體差異不顯著。

3.3 質譜條件的選擇

在負離子模式下，取1 μg·m L-1氯芬新標準溶液，以流動注射的方式，注入質譜儀中進行全掃描，對噴霧電壓源的離子傳輸管溫度、鞘氣電壓和輔助氣電壓等離子源參數進行優化，進而確定測定離子源的最佳條件。以氯芬新的離子峰為母離子，分別優化碰撞能量等質譜參數，使分子離子和特征碎片離子強度達到最大，進而確定以豐度最大的二級碎片離子作為定量離子，次強碎片離子作為定性離子[5]。

3.4 方法學評價

本實驗采用配制溶劑標準溶液取向和基質匹配標準溶液曲線建立數學模型，來評價運用HPLC-MS/MS檢測的基質效應。按照公式（1）計算基質（ME）。

式中，A為建立溶劑標準曲線后線性方程斜率；B為機制標準曲線建立后的線性方程斜率。當ME絕對值小于20%，說明基質效應較弱；若在20%～50%，說明中等；若大于50%，則表明基質效應較強。

根據表6 結果來看，氯芬新殘留在上述 6 種水產品中的基質效應絕對值在5.83%～74.61%。其中，對蝦、牡蠣和海參3 種水產品基質對目標物信號影響存在較弱的基質效應，其余均有較強的基質效應且均為抑制作用。綜合來看，相較于液相色譜法，液相色譜-串聯質譜法結合了色譜和質譜的優勢，具有高選擇性、高靈敏度的優點，對目標物的分離度和響應度更好。

表6 氯芬新機制匹配標準曲線與溶劑標準曲線的比較表