纖維樁修復上頜第一磨牙牙體缺損的三維有限元力學分析

仲 麒，黃雨捷，張軼凡，宋迎爽，吳雅琴，瞿 方，黃慶豐，胥 春

上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院口腔修復科，上海交通大學口腔醫學院，國家口腔醫學中心，國家口腔疾病臨床醫學研究中心，上海市口腔醫學重點實驗室，上海 200011

上頜第一磨牙是口內存留時間最長［1］、承擔力最大的牙齒［2］。根據《第四次全國口腔健康流行病學調查報告》［3］，15 歲年齡組人群中上頜第一磨牙患齲率為9.3%～9.7%，是上頜牙列中患齲率最高的牙位，而上頜第一磨牙牙體折裂發生率在所有牙齒中也是最高的［4-5］。當齲壞、牙折導致的牙體缺損累及牙髓腔時，會導致牙髓暴露、感染，乃至最終喪失活力，需行完善的根管治療（root canal therapy，RCT）。研究［6］表明，RCT 后當牙齒冠部有1 個及以上牙本質壁缺失時，應進行根管樁修復以降低牙體缺損修復治療的失敗率。

纖維增強型復合樹脂根管樁（纖維樁）是一種由軸向排列的纖維包裹在復合樹脂基質中制成的纖維增強型聚合物基復合材料根管樁［7］，其中纖維一般約占總體積的60%，樹脂基質約占總體積的40%［8］。與傳統金屬根管樁相比，纖維樁具有與牙本質相近的彈性模量和優良的疲勞性能，同時還有著耐腐蝕、生物相容性好、美觀、能取出進行二次修復，以及在遭受過大應力時先于牙體組織折斷從而保護牙體組織等優點，因此在牙體缺損修復中得到了越來越廣泛的應用［9］。但也有文獻［10-11］指出，纖維樁修復牙體缺損對牙頸部牙體組織的要求較金屬樁高，冠部牙本質壁和肩領的缺失均會增加樁折斷、牙頸部牙體組織折裂、冠脫落和樁脫粘接的發生率，從而增加牙體缺損修復失敗的風險。

上頜第一磨牙具有至少3 個根管［3，12］，因此，纖維樁修復時，樁的放置數量和位置存在多種組合方式，目前對何種組合最佳尚無定論。較為主流的觀點是在上頜第一磨牙最粗最直的根管即腭根內放置1 根樁［13-14］。近年來也有學者提出了不同見解。趙莉等［15］通過三維有限元分析（three-dimensional finite element analysis，3D-FEA）研究了不同數量纖維樁修復上頜第一磨牙后牙體組織內外表面的應力分布，發現當牙體缺損類型為腭側和遠中軸壁缺損時，臨床上選用腭根樁和遠頰根樁修復可降低剩余牙本質中的應力，對降低根折風險有積極作用，建議在腭根和遠頰根中各置入1 根纖維樁進行牙體缺損修復。劉峰［16］認為對于一壁缺損的磨牙采用1 根纖維樁修復即可，兩壁缺損者在2 個根管中分別進行纖維樁修復，而三壁及以上缺損者則應選用盡量多的根管進行纖維樁修復。牛光良［7］認為一壁缺損的磨牙可不放樁，采用直接冠修復或置入1 根纖維樁修復，兩壁缺損者采用1～2 根纖維樁修復，三壁缺損者采用2～3 根纖維樁修復，四壁缺損者應采用3～4 根纖維樁修復。筆者前期的3D-FEA 研究［17］則發現，對于四壁缺損的上頜第一磨牙，在可以獲得1.5 mm 高的牙本質肩領時，應在腭根及近頰根中各置入1 根纖維樁進行修復。

上頜第一磨牙好發鄰面齲，尤其好發遠中鄰面齲［18］，而牙體缺損則好發于腭尖［4-5］。因此，遠中鄰面（distal-occlusal， DO） 和 腭面（palatalocclusal，PO）缺損是上頜第一磨牙常見牙體缺損類型?；佳肋h中鄰面或腭側牙本質壁缺失，經RCT 后需進行樁核修復。正確的纖維樁修復策略對于上頜第一磨牙牙體缺損修復治療預后至關重要，但目前鮮有系統探討不同纖維樁修復策略下上頜第一磨牙剩余牙體組織內、纖維樁內和各粘接界面上應力分布的研究報道。筆者之前的研究［17］發現，對上頜第一磨牙牙體缺損進行纖維樁修復時，腭根均應放置纖維樁。因此，本研究擬運用3D-FEA 方法，探討對腭根放置1根纖維樁、腭根與遠頰根或近頰根各放置1 根纖維樁以及腭根、遠頰根與近頰根共放置3 根纖維樁以及不放纖維樁直接冠修復這5 種策略下，修復上頜第一磨牙DO 和PO 缺損后牙體組織和纖維樁內以及樁-水門汀界面和水門汀-根管壁界面上的應力分布，探索大面積牙體缺損多根牙纖維樁修復策略，希冀對于纖維樁的臨床應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 上頜第一磨牙牙體缺損模型的建立

將1 顆完整離體上頜第一磨牙進行微計算機斷層掃 描 技 術 （micro computed tomography， μCT，eXplore Locus SP，美國GE 公司）掃描，掃描參數為：電壓79 kV，電流79 mA，曝光時間1 700 μs，掃描層厚14 μm，重建層厚28 μm。對該牙完成RCT及全瓷冠牙體預備后再次進行μCT 掃描。2次掃描分別得到810 幅和750 幅以DICOM 格式存儲的二維斷層圖像。將其導入醫學影像處理軟件Mimics Research 21.0（比利時Materialise 公司）中，對RCT及牙體預備前后的牙體、充填樹脂、牙膠尖等進行三維重建，并以STL 格式導入逆向工程軟件Geomagic Wrap 2015（美國3D Systems公司）中，建立全瓷冠、樹脂核、PO 及DO 缺損牙體組織（牙本質肩領高度1.5 mm）、冠粘接樹脂水門汀、牙膠尖、牙周膜、皮質骨和松質骨的三維模型。上頜第一磨牙2 種牙體缺損樹脂核充填修復后模型如圖1所示。

圖1 上頜第一磨牙2種牙體缺損樹脂核充填修復后模型Fig 1 Two models of restored maxillary first molar with tooth defect

1.2 不同纖維樁修復方式模型的建立

纖維樁（Matchpost，法國Recherches Techniques Dentaires 公司）模型通過CAD 軟件SolidWorks 2016（法國Dassault Systemes 公司），根據纖維樁外形尺寸數據［19］建立，并以IGES格式保存。

在Geomagic Wrap 2015 中以樁直徑不超過根徑1/3 為限，選擇盡可能粗的纖維樁進行修復，即腭根放置#1.6 纖維樁，遠頰根放置#1.4 纖維樁，近頰根放置#1.2 纖維樁；在保留根尖段5 mm 牙膠尖的原則下運用布爾相減運算預備樁道［15］。按照不同修復策略，建立5 組模型：不放纖維樁（no post，NP）組、腭根單纖維樁（palatal post，PP）組、腭根及遠頰根雙纖維樁（palatal and distobuccal posts，PDP） 組、腭根及近頰根雙纖維樁（palatal and mesiobuccal posts， PMP） 組 和 三 根 管 纖 維 樁（palatal，distobuccal and mesiobuccal posts，PDMP）組。若多根纖維樁在髓腔內存在重疊，則將較細的樁在重疊部分下方1 mm 處垂直其長軸截斷作為輔樁，較粗的樁保留全長作為主樁。將以上所有部件曲面化后，以IGES 格式保存。在FEA 軟件ANSYS Workbench 19.0（美國ANSYS 公司）中為每個模型建立結構靜力分析系統，并在“Design Modeler”模塊中打開上述以IGES 格式保存的部件數據，組合為有限元模型（圖2，以PO缺損為例）。

圖2 不同修復策略的上頜第一磨牙牙體缺損修復模型（以PO牙體缺損為例）Fig 2 Models of restored maxillary first molar with tooth defect by different restoration strategy(PO defect for example)

1.3 3D-FEA

在ANSYS Workbench的“Mechanical”模塊中為每個部件賦予材料屬性：冠為氧化鋯陶瓷制成，樁為石英纖維樁；由樹脂水門汀將冠粘接在預備體（牙體組織及核）上，核為復合樹脂核，樁則采用與復合樹脂核相同材質的樹脂水門汀與牙本質粘接。除纖維樁為正交各向異性的線彈性材料外，其余材料均視為各向同性的線彈性材料。具體的各材料及組織的力學參數見表1。

表1 材料及組織力學性能參數Tab 1 Mechanical properties of materials and tooth tissues

每個模型都被劃分成包含約40 000 個10 節點四面體單元的網格。分別施加2 種載荷：①垂直載荷。在面的中央窩、近中及遠中邊緣嵴、近腭尖頂和遠腭尖頂平行牙體長軸施加800 N 的力，以模擬垂直力（圖3A）。②側向載荷。在面近頰尖和遠頰尖三角嵴上與牙體長軸呈45°角施加225 N 的力，以模擬側向力（圖3B）［26］。牙槽骨的底面和側面為固定約束，受力時各界面間不發生相對滑動。測定牙體組織和纖維樁內的等效應力分布及纖維樁-水門汀界面和水門汀-根管壁界面上的切應力分布［14，27］，并計算纖維樁修復后各組根管內表面各區域最大等效應力值相對NP組的變化百分數。

圖3 加載位置及方向示意圖Fig 3 Schematics of the positions and directions of the loadings

2 結果

2.1 牙體組織的等效應力

2 種載荷下牙體外表面的等效應力分布如圖4、5所示。在相同載荷下，各組牙體外表面的應力分布形式均相似，且與牙體缺損類型和纖維樁修復策略無關。垂直載荷下應力集中于根頸1/3 的腭側，側向載荷下應力集中于根頸1/3 的近頰側。此外，各組在根分叉區的根面上均出現了較大的應力值。各組牙體外表面的最大等效應力值如圖4F、L 和圖5F、L 所示。PO 缺損在垂直、側向載荷下最大等效應力值的高值均出現在NP 組（分別為38.69 MPa 和44.43 MPa），相應的低值分別出現在PMP組（36.17 MPa）和PDMP組（40.47 MPa）；DO缺損在垂直、側向載荷下最大等效應力值的高值分別出現在PMP 組（36.95 MPa）、PDP組（44.38 MPa），相應的低值分別出現在PDP組（36.23 MPa）、PMP組（42.05 MPa）。

圖4 垂直載荷下牙體外表面的等效應力分布和最大等效應力值Fig 4 Equivalent stress distributions and MES on external surfaces of tooth tissues under vertical loading

圖5 側向載荷下牙體外表面的等效應力分布和最大等效應力值Fig 5 Equivalent stress distributions and MES on external surfaces of tooth tissues under lateral loading

纖維樁修復后，2種載荷下根管內表面的最大應力普遍出現在根管中1/3及尖1/3（表2），各組根管內表面各區域最大等效應力值相對NP組的變化百分數如圖6所示。置入纖維樁的根管內表面中1/3的最大等效應力值除DO缺損中PDMP組的遠頰根在側向載荷下出現下降外，其余各根管均出現上升；根管內表面頸1/3的最大等效應力值除垂直載荷下DO缺損中PDP組的遠頰根、PDMP組的近頰根以及PO缺損中PMP組的近頰根，還有側向載荷下PO缺損中PDP組和PDMP組的遠頰根出現上升外，其余各根管均出現下降。

圖6 纖維樁修復后各組根管內表面最大等效應力值相對直接冠修復時（NP組）的變化百分數Fig 6 Percentage of MES changes in each group compared to NP group on the internal surfaces of root canals after placing posts

表2 纖維樁修復后各組根管內表面各區域最大等效應力值（MPa）Tab 2 MES on internal surfaces of root canals after placing posts（MPa）

2.2 纖維樁內的等效應力

纖維樁修復后，2 種載荷下各組纖維樁內最大等效應力值如表3 所示。垂直載荷下，腭根樁內的應力最大；側向載荷下，近頰根樁內的應力最大。

表3 各組纖維樁內最大等效應力值（MPa）Tab 3 MES in the posts in each group（MPa）

2.3 纖維樁-樹脂水門汀界面上的切應力

纖維樁修復后，2種載荷下各組樁-水門汀界面上的最大切應力值如表4 所示。垂直載荷下，腭根樁-水門汀界面上切應力最大；側向載荷下，近頰根樁-水門汀界面上切應力最大。此外，在垂直載荷下，PO 缺損中PP、PDP 和PDMP 組以及DO 缺損中PMP組的最大切應力位于近樁尖處，其余組的切應力則集中于腭根樁-水門汀界面的方邊界；側向載荷下，所有組的切應力均集中于近樁尖處（圖7）。

圖7 2種載荷下纖維樁-樹脂水門汀界面上的切應力分布Fig 7 Shear stress distributions on the post-cement interface under vertical and lateral loadings

表4 纖維樁-樹脂水門汀界面上最大切應力值（MPa）Tab 4 Maximum shear stress on the post-cement interface（MPa）

2.4 樹脂水門汀-根管壁界面上的切應力

纖維樁修復后，2種載荷下各組水門汀-根管壁界面上的最大切應力值如表5所示。垂直載荷下，2種缺損類型各組水門汀-根管壁界面上的最大切應力值相近；側向載荷下，近頰根放置纖維樁時（PMP和PDMP組）水門汀-根管壁界面上的最大切應力明顯高于其他組。

表5 各組水門汀-根管壁界面上最大切應力值（MPa）Tab 5 Maximum shear stress on the cement-canal interface in each group（MPa）

3 討論

本研究結果顯示，上頜第一磨牙牙體缺損修復后，同一載荷下牙體外表面的應力分布形式均相似，且與牙體缺損類型和纖維樁修復策略無關，提示牙體缺損修復后牙體外表面上應力分布形式可能與牙根形態和受力方式關系密切。此外，各組模型在牙體外表面根頸1/3 及根分叉處均出現了較大的應力值，提示牙體缺損修復時應注意保留牙根頸1/3 及根分叉處的牙體組織。

趙莉等［15］采用3D-FEA 研究發現，當采用腭根樁和遠頰根樁雙樁方式對上頜第一磨牙遠中鄰腭面缺損進行纖維樁修復時，牙頸部、牙體外表面所受等效應力較采用腭根樁單樁修復和腭根樁、遠頰根樁和近頰根樁三樁修復時小。本研究對PO和DO這2種牙體缺損類型的上頜第一磨牙進行3D-FEA 的結果顯示，雙樁修復方式下牙體外表面所受等效應力并不一定低于單樁和三樁修復方式。PO缺損：垂直載荷下，雙樁組中PDP 組的牙體外表面最大等效應力值較同主樁的單樁組（PP 組）以及三樁組（PDMP 組）高；側向載荷下，雙樁組（PDP 和PMP 組）的最大等效應力值均較單樁組（PP 組）以及三樁組（PDMP 組）高。DO 缺損：垂直載荷下，雙樁組中PMP 組的最大等效應力值較單樁組（PP 組）以及三樁組（PDMP組）高；側向載荷下，雙樁組中PDP 組的最大等效應力值較單樁組（PP 組）以及三樁組（PDMP 組）高。這一發現提示臨床上應根據不同的牙體缺損類型制定不同的纖維樁修復策略。

YOON 等［14］在對纖維樁修復下頜第一磨牙的3D-FEA 研究中發現，纖維樁修復后，根管內表面中1/3的最大等效應力值上升，而頸1/3的最大等效應力值下降。本文研究了纖維樁修復上頜第一磨牙PO 和DO 牙體缺損后根管內表面的應力分布，發現根管內表面中1/3 的最大等效應力值除DO 缺損中PDMP 組的遠頰根管在側向載荷下出現下降外，其余各根管均較未置入樁時升高。而置入纖維樁的根管內表面頸1/3 的最大等效應力值除了在個別根管出現了上升外（PO 缺損中垂直載荷下PMP 組的近頰根管和側向載荷下PDP 和PDMP 組的遠頰根管，以及DO 缺損中垂直載荷下PDP 組的遠頰根管和PDMP 組的近頰根管），其余各根管內表面頸1/3最大等效應力值普遍下降。本研究的發現與YOON 等［14］的研究相似，提示放置在合適根管中的纖維樁能將力向根方傳導，從而降低牙頸部牙體組織中的應力，起到保護牙頸部牙體組織的作用。另一方面，由于樁道預備所用的成型鉆直徑往往都比RCT 后的根管直徑大，因此會在樁道根方端面處形成較為銳利的線角，使得此處容易產生應力集中，導致根管中1/3 的最大等效應力值上升［14］。這提示今后在設計纖維樁及配套的樁道預備鉆針形態時，應使樁和鉆針根方末端的直徑更加接近根管的直徑，且末端圓鈍，避免形成尖銳的線角。在PO 和DO 這2種牙體缺損類型中，無論采取哪種纖維樁修復策略，上頜第一磨牙牙體內外表面的最大等效應力值均未超過牙本質的抗折強度（100～200 MPa）［28-30］，因此可以認為纖維樁修復并不會增加牙折的風險。

對于纖維樁內的FEA 分析顯示，采用纖維樁修復上頜第一磨牙PO 和DO 牙體缺損后，腭根樁和近頰根樁分別為垂直載荷和側向載荷下最大等效應力值最大的纖維樁，進一步佐證了腭根樁和近頰根樁分別起到了有效分散垂直力和側向力的作用。石英纖維樁的抗彎強度達741 MPa 以上［31］，遠高于本研究中2 種載荷下各纖維樁內的最大等效應力值，可以認為將石英纖維樁用于修復這2 種牙體缺損類型的上頜第一磨牙不會導致纖維樁的折斷。

3D-FEA 結果顯示，采用纖維樁修復上頜第一磨牙PO 和DO 牙體缺損后，垂直載荷下的腭根樁和側向載荷下的近頰根樁在樁-水門汀界面上的最大切應力值均超過了未經表面處理的纖維樁與常用樹脂水門?。ㄈ缌兄Ф厥康荌voclar Vivadent 公司的Multilink Speed）之間的粘接強度值（10.49 MPa）［32］。這一結果提示臨床上應降低纖維樁修復后患牙所受垂直和側向力，以減小樁-水門汀界面上的切應力，避免樁與樹脂水門汀之間發生脫粘接，并且今后應該進一步改進纖維樁的表面處理方法及樹脂粘接劑的性能，以提高纖維樁與樹脂水門汀間的粘接強度，避免纖維樁修復后樁脫粘接的發生。纖維樁修復PO 和DO 牙體缺損后，垂直載荷下的所有組和側向載荷下PMP 和PDMP 組在水門汀-根管壁界面上的最大切應力值均較大，但均未超過常用樹脂水門汀與牙本質的粘接強度（21.80～40.20 MPa）［33］。垂直和側向載荷下水門汀-根管壁界面上切應力的產生可能與纖維樁傳導力以及纖維樁、水門汀和牙本質三者彈性模量間存在差異有關，提示未來應開發出與牙本質彈性模量更接近的纖維樁和水門汀，以減小力對纖維樁與根管壁之間粘接性能的影響。采用樹脂水門汀將纖維樁粘接至根管中以后，水門汀-根管牙本質壁粘接界面上的樹脂粘接劑會隨時間發生老化，導致其粘接強度明顯下降。有研究［33］表明，經過6 個月的老化后，部分樹脂粘接劑的粘接強度（如日本GC 公司的G-Bond，老化6 個月后的粘接強度為11.80 MPa）下降明顯，已非常接近水門汀-根管壁界面上的最大切應力值。樹脂粘接劑的老化可能會導致樹脂水門汀與根管壁之間在長期使用后發生脫粘接，提示臨床上需要注意控制修復體所受力大小以減小在水門汀-根管壁界面上的切應力，并且未來應開發抗老化性能更優異的樹脂粘接劑。

在PO 缺損中，置入纖維樁后，牙體外表面的最大等效應力值在2 種載荷下均出現了降低，提示對PO 缺損的上頜第一磨牙進行合適的纖維樁修復可以降低牙體組織所受的應力。從具體應力數值上看，垂直載荷下，各組中PMP 組牙體外表面最大等效應力值最小，其次為PP 組；側向載荷下，PP 組的最大等效應力值則低于PMP 組，提示對PO 缺損的上頜第一磨牙來說，在腭根內放置纖維樁可以達到降低牙體外表面應力的目的，而在近頰根內額外放置輔樁反而會影響腭根樁降低側向載荷下牙體外表面應力的能力。腭根放置纖維樁后，在2 種載荷下根管內表面頸1/3的最大等效應力值下降均較明顯，尤以垂直載荷下為著，提示在PO 缺損的上頜第一磨牙中，腭根樁具有將垂直力和側向力高效地向根方傳導、分散牙體組織應力的能力。垂直載荷下，PMP 組樁-樹脂水門汀界面上的最大切應力出現在界面與面相交的線角處，提示近頰根置入的輔樁影響了腭根主樁在樁-水門汀界面上的應力分散，可見對PO 缺損的上頜第一磨牙進行纖維樁修復時不應在近頰根放置輔樁。綜上，在對PO缺損的上頜第一磨牙進行纖維樁修復時，宜采用腭根內放置1根樁的單樁策略。

在DO 缺損中，置入纖維樁后，牙體組織外表面的最大等效應力值除了PMP 組在垂直載荷下，以及PP 組和PDP 組在側向載荷下出現升高外，其他組均出現了降低，提示對DO 缺損的上頜第一磨牙進行纖維樁修復時，在腭根中放置纖維樁有利于減小垂直力下牙體外表面的應力，但不利于減小側向力下牙體外表面的應力，需采取措施抵抗或減少側向力。從具體應力數值上看，垂直載荷下，各組中PDP 組牙體外表面最大等效應力值最小，其次是PP 組；而側向載荷下，PDP 組最大等效應力值最高，PP 組的最大等效應力值也高于NP 組，而PMP 組和PDMP 組的最大等效應力值均低于NP 組，提示對DO 缺損上頜第一磨牙進行腭根單樁（PP 組）或腭根及遠頰根雙樁（PDP組）修復可以達到降低垂直力下牙體外表面應力的目的，但并不能降低側向力下牙體外表面的應力；在近頰根內置入纖維樁（PMP 組、PDMP組）雖然可以降低側向力下牙體外表面的應力，但會影響腭根樁降低垂直力下牙體外表面應力的能力，需采取措施控制垂直力。腭根放置纖維樁后，在2 種載荷下根管內表面頸1/3 的最大等效應力值下降均較明顯，尤以垂直載荷下為著；而近頰根放置纖維樁后，在側向載荷下根管內表面頸1/3 的最大等效應力值下降最明顯，提示在DO 缺損中，腭根樁具有將2 種力高效地向根方傳導、分散牙體組織應力的能力，而近頰樁則可以高效地將側向力向根方傳導，分散牙體組織應力。除PMP 組樁-水門汀界面上的最大切應力值出現在樁尖處外，其余各組樁-水門汀界面上的最大切應力值均出現于界面與面相交的線角處，提示DO缺損不利于垂直力下樁-水門汀界面上的應力分散，而在腭根和近頰根內各放置1 根纖維樁（即PMP 組）則可以改善樁-水門汀界面上的應力分布。綜上，在對DO 缺損的上頜第一磨牙進行纖維樁修復時，應采用腭根內放置主樁、近頰根內放置輔樁的雙樁策略，且需要對垂直力進行控制，以免垂直力下牙體組織內產生較大應力。

由上可見，對于上頜第一磨牙，同為一壁缺損類型的PO 和DO 缺損，其最佳的纖維樁修復策略并不相同，提示臨床上制定纖維樁修復策略時不應只考慮髓腔牙本質壁的數量，而應根據具體的牙體缺損類型，并結合一定的咬合設計來制定，以降低纖維樁修復的失敗率。

本研究中，為更好地控制變量，所有模型均來自同一顆離體牙。由于臨床患者存在個體差異，加之現有的數字化模擬手段需進行一定的近似處理，尚無法完全如實還原臨床實際情況，后續還需要其他類型體外實驗提供支持。另外，影響纖維樁修復效果的因素還有很多，如樁的材質、纖維樁的彈性模量、牙本質肩領的高度、牙槽骨吸收程度等，后續還應針對這些因素進行分析研究。

利益沖突聲明/Conflict of Interests

所有作者聲明不存在利益沖突。

All authors disclose no relevant conflict of interests.

倫理批準和知情同意/Ethics Approval and Patient Consent

本研究中獲取人體離體磨牙的操作已通過上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院倫理委員會的審核批準（文件號SH9H-2020-TK17-1），實驗過程均遵照《涉及人的生物醫學研究倫理審查規范》的條例進行，受試對象已經簽署知情同意書。

The acquisition of the extracted human molar in this study was reviewed and approved by the Ethics Committee of Shanghai Ninth People's Hospital，Shanghai Jiao Tong University School of Medicine（Approval Letter No. SH9H-2020-TK17-1），and the experimental protocols were carried out by followingThe Operational Guideline for The Ethic Review of Biomedical Research Involving Human Subjects.Consent letter has been signed by the donor.

作者貢獻/Authors'Contributions

仲麒參與了實驗操作及初稿撰寫，黃雨捷、張軼凡、宋迎爽、吳雅琴、瞿方、黃慶豐和胥春參與了數據分析及論文的修改，黃慶豐和胥春參與了實驗設計與監督，胥春對本實驗提供了經費支持。所有作者均閱讀并同意了最終稿件的提交。

ZHONG Qi carried out the study，and wrote the draft manuscript.HUANG Yujie，ZHANG Yifan，SONG Yingshuang，WU Yaqin，QU Fang，HUANG Qingfeng and XU Chun performed the data analyses and reviewed the manuscript. HUANG Qingfeng and XU Chun designed the experiments and supervised the study. XU Chun funded the experiments.All the authors have read the last version of paper and consented for submission.

·Received：2022-03-17

·Accepted：2022-06-17

·Published online：2022-08-12

參·考·文·獻

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