不同HBeAg結果HBV感染患者臨床指標與肝臟病理特征的關聯性分析

樊璠,鳳鳴,許雅楠,張宇,朱麗莉,施晴波,徐沛峰,張建峰

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染所致慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)嚴重危害人類健康,可發展為肝纖維化、肝硬化乃至肝細胞癌[1]。肝組織活檢是診斷肝纖維化或肝硬化的金標準,但作為一項有創檢查,仍具有局限性。因此,尋找新型、敏感、無創的CHB特異性指標對于臨床病情評估及治療具有重要指導意義[2]。HBeAg轉陰的HBV感染患者,HBV復制及cccDNA水平均降低,但仍有發展為肝纖維化或肝硬化的可能,此時病毒學指標無法準確預測患者肝臟病理損傷程度。雖然肝功能指標可部分預測肝細胞損傷程度,但部分ALT水平正常的患者可見肝組織學明顯改變,需要抗病毒治療[3-4]。因此,本研究擬探討不同HBeAg結果的HBV感染者臨床特點,并分析影響不同HBeAg結果的HBV感染者肝臟炎癥程度和纖維化結果的因素,為HBV感染者病情評估或預測肝臟病理損傷程度提供新的參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2021年1月—2022年2月我院就診的HBV感染患者103例為研究對象,男64例,女39例;年齡20～65(41.15±10.24)歲。按照HBeAg檢測結果分為HBeAg陽性組(n=39)和HBeAg陰性組(n=64)。納入標準：(1)符合《慢性乙型肝炎防治指南(2022年版)》[5]關于乙肝病毒感染的診斷標準;(2)臨床資料完整;(3)患病時間>6個月;(4)HBsAg陽性;(5)無肝穿刺禁忌證。排除標準：(1)合并其他類型肝炎病毒感染患者;(2)藥物性或酒精性肝病患者;(3)自身免疫性肝病患者。本研究經醫院醫學倫理委員會批準,所有患者均簽署知情同意書。

1.2 資料收集 收集患者的年齡、性別、血清HBV DNA載量、ALT、AST、ALB、CHE、TBIL、DBIL、炎癥分級及纖維化分級等資料。其中血清生化指標采用酶法和連續檢測法,儀器采用雅培C16000,試劑由上海復興長征醫學科學有限公司提供。乙肝病毒血清標志物檢測采用化學發光法,儀器和試劑均由雅培公司提供。血清HBV DNA載量檢測采用熒光定量PCR法,儀器采用AB7500熒光定量PCR儀,試劑由湖南圣湘公司提供。

1.3 肝穿刺活組織檢查及病理 所有受試者均接受肝穿刺活組織檢查。肝組織長度>1.5 cm,用4%中性甲醛固定,常規石蠟包埋切片,行HE、Marsson等染色對肝臟病理進行分級分期。肝臟炎性活動程度及纖維化程度參照2006年更新版《病毒性肝炎防治方案》分級標準[6]。根據肝臟病理切片炎癥程度將患者分為輕度肝炎患者(G<2)和中重度肝炎患者(G≥2),根據肝臟病理切片纖維化程度將患者分為輕度肝纖維化患者(S<2)和中重度肝纖維化患者(S≥2)。所有切片均由本院高年資病理科醫師進行閱片,以保證結果的可靠性。

2 結果

2.1 不同HBeAg結果的HBV感染者一般資料和臨床指標比較 HBeAg陽性組年齡、ALB、CHE水平低于HBeAg陰性組,中重度炎癥比例高于HBeAg陰性組,差異有統計學意義(P<0.05)。2組間性別、HBV DNA載量、ALT 、AST、TBIL、DBIL、纖維化分級程度比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同HBeAg結果的HBV感染者一般資料和臨床指標比較

2.2 影響不同HBeAg結果HBV感染者肝臟炎癥及纖維化程度的單因素分析 HBeAg陽性患者中,中重度肝炎患者ALT水平和中重度纖維化比例高于輕度肝炎患者, ALB、CHE水平低于輕度肝炎患者,差異有統計學意義(P<0.05);中重度肝纖維化患者ALB、CHE水平低于輕度肝纖維化患者,TBIL、DBIL水平及中重度炎癥比例高于輕度肝纖維化患者,差異有統計學意義(P<0.05)。HBeAg陰性患者中,中重度肝炎患者年齡高于輕度肝炎患者,CHE水平低于輕度肝炎患者,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2、表3。

表3 影響不同HBeAg結果HBV感染者纖維化程度的單因素分析

2.3 影響不同HBeAg結果HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析 以HBV感染者肝臟炎癥程度為因變量(輕度=1,中重度=2),以年齡、ALT、AST、ALB、CHE、TBIL、DBIL、纖維化分級為自變量,納入Logistic回歸分析。結果顯示,纖維化分級≥2、CHE水平降低為HBeAg陰性患者發生中重度肝炎的獨立危險因素。見表4、表5。

表4 影響HBeAg陽性HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析

表5 影響HBeAg陰性HBV感染者肝臟炎癥程度的多因素Logistic回歸分析

2.4 影響不同HBeAg結果HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析 以HBV感染者肝臟纖維化程度為因變量(輕度=1,中重度=2),以年齡、ALB、CHE、TBIL、DBIL、炎癥分級為自變量,納入Logistic回歸分析。結果顯示,炎癥分級≥2級是HBeAg陰性患者發生中重度肝臟纖維化的獨立危險因素。見表6、表7。

表6 影響HBeAg陽性HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析

表7 影響HBeAg陰性HBV感染者肝臟纖維化程度的多因素Logistic回歸分析

2.5 CHE水平對不同HBeAg結果HBV感染者肝臟炎癥和纖維化分級的預測效能 根據HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的Logistic回歸分析結果,分析HBeAg陽性患者數據集,并繪制ROC曲線(圖1A、1B)。結果顯示,血清CHE水平預測HBeAg陽性患者肝組織炎癥程度和纖維化程度的曲線下面積(AUC)分別為0.820和0.900,敏感度分別為83.3%和79.3%,特異度分別為71.4%和90.0%。見表8。根據HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的Logistic回歸分析結果,分析HBeAg陰性患者數據集,并繪制ROC曲線(圖1C、1D)。結果顯示,血清CHE水平預測HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度和纖維化程度的曲線下面積(AUC)分別為0.723和0.597,敏感度分別為82.2%和29.4%,特異度分別為57.9%和100%。見表9。

1A 血清CHE水平預測HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度的ROC曲線 1B 血清CHE水平預測HBeAg陽性患者肝臟纖維化程度的ROC曲線 1C 血清CHE水平預測HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度的ROC曲線 1D 血清CHE水平預測HBeAg陰性患者肝臟纖維化程度的ROC曲線。圖1 血清CHE水平預測不同HBeAg結果HBV感染者肝臟炎癥和纖維化程度的ROC曲線

表8 CHE水平預測HBeAg陽性患者肝臟炎癥和纖維化程度的效能

表9 CHE水平預測HBeAg陰性患者肝臟炎癥和纖維化程度的效能

3 討論

乙型肝炎病毒感染是肝纖維化、肝硬化及肝細胞癌的主要病因之一,盡早評估肝臟損傷程度并進行治療能夠很大程度減緩疾病進展[7]。肝組織活檢是評價肝臟炎癥及纖維化程度的金標準,但存在患者依從性差、檢測費用高、有創、并發癥風險高等缺點,限制了臨床應用。因此,尋找無創診斷指標對于評估病情和指導治療有重要意義[8-9]。本研究分析了不同HBeAg結果HBV感染者肝臟炎癥及纖維化程度的影響因素。

HBeAg是區分慢性乙型肝炎臨床分期的重要指標,該指標轉陰提示慢性乙肝患者進入免疫控制階段[10],該階段患者肝組織無明顯異?；蜉p度炎性壞死,無或僅存緩慢進展的纖維化[11]。Wang等[12]和朱琪等[13]研究表明,HBeAg陰性是肝臟炎癥及纖維化的獨立危險因素,相較于HBeAg陽性慢性肝炎患者,HBeAg陰性患者更有可能出現肝臟炎癥及纖維化。本研究結果顯示,HBeAg陰性患者輕度肝炎比例高于HBeAg陽性患者,HBeAg陰性患者雖傾向于出現肝臟炎癥,但其炎癥程度較低,符合免疫控制階段肝組織病理表現。但并未發現2組患者肝纖維化程度存在統計學差異?？赡茉驗?慢性乙型肝炎患者肝臟炎癥與纖維化進展并不完全同步。血清轉氨酶ALT分布于肝細胞細胞質,AST分布于肝細胞線粒體,肝細胞損傷可將這兩種酶釋放入血。監測ALT和AST,可反映肝損傷程度。ALB和CHE反映肝臟合成功能,膽紅素反映肝臟排泄功能。單因素分析顯示,血清ALT、ALB、CHE水平及纖維化程度是HBeAg陽性患者肝臟炎癥程度的影響因素,血清ALB、CHE、TBIL、DBIL水平及炎癥程度影響HBeAg陽性患者肝臟纖維化程度。而肝排泄監測指標TBIL、DBIL水平與HBeAg陽性患者肝臟纖維化分級無關聯,這可能與肝臟處理膽紅素儲備能力大,膽紅素不能敏感反映肝功能有關[14]。血清CHE水平、年齡是HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度的影響因素,年齡越大、CHE水平越低的HBeAg陰性患者,其更有可能合并有中重度肝炎,應注意監測病情變化并給予積極的臨床干預。膽堿酯酶是肝細胞合成的水解酶,用于評價肝臟合成功能。梁影等[15]研究表明,CHE水平與肝損傷程度呈負相關。此外其他研究[16-17]也提示,隨著慢性乙肝患者病程進展,血清CHE水平逐漸降低,其可作為早期診斷慢性乙肝患者早期肝臟纖維化程度的重要指標之一。目前尚缺乏CHE水平對不同HBeAg結果HBV感染者肝臟病理損傷程度預測價值的研究。多因素Logistic回歸分析顯示,血清CHE越低為HBeAg陰性患者發生中重度肝炎的危險因素。ROC曲線分析顯示,血清CHE水平評估HBeAg陰性患者肝臟炎癥程度有較高的敏感度(82.2%)。

本項研究不足之處在于,收集的數據來源單一,樣本量較少。同時,肝臟作為合成凝血因子和儲存肝巨噬細胞的重要場所,肝功能異常往往伴隨凝血障礙和免疫失調,本項研究未納入凝血和免疫指標作為篩選變量,潛在的指標可能會影響CHE等指標對肝臟炎癥及纖維化程度的評估能力。后續研究中將進一步擴大樣本量和待篩選變量范圍,以提高對不同HBeAg結果慢性乙型肝炎患者肝臟病理損傷程度的預測效能。

盡管如此,本研究通過探討多項臨床指標與不同HBeAg結果患者肝臟炎癥及纖維化程度的關聯性,揭示了血清CHE水平對HBeAg陰性患者肝臟炎癥損傷程度的預測效能。而血清CHE水平通過血液生化常規檢查即可獲得,相較于肝穿刺活檢,患者接受度高、費用低、創傷小。這一體液檢查指標,雖不能完全取代病理檢查,但其臨床易獲得,一定程度上豐富臨床醫生病情評估手段,提高診療效率,減少不必要的肝穿刺病理檢查,降低患者治療負擔。

綜上所述,不同HBeAg結果的HBV感染者ALB、CHE水平及炎癥程度不同;炎癥程度越重的HBeAg陰性患者越容易發生中重度肝纖維化,反之亦然;血清CHE水平可作為預測HBV感染者肝臟炎癥和纖維化程度的敏感指標。