亞精胺通過改善心臟線粒體能量代謝緩解壓力超負荷小鼠心力衰竭*

張曉亮， 趙曉玲， 耿 靜， 胡 朗， 李 妍△

（1空軍軍醫大學唐都醫院心內科， 陜西 西安 710032；2中國人民解放軍聯勤保障部隊第九四〇醫院超聲診斷科，甘肅 蘭州 730050）

心力衰竭作為一種復雜且致命的臨床綜合征，具有發病率和死亡率高，患者生活質量下降以及治療費用高的特點。心力衰竭在全球范圍內影響超過了6400萬人［1］?！吨袊难芙】蹬c疾病報告2022》指出，隨著我國人口老齡化及城鎮化進程不斷加速，心血管病的危險因素對健康的影響越加顯著，并且心血管病發病率仍持續增高，其中心力衰竭患者超過890萬人［2］。探索心力衰竭的潛在發病機制，并提出針對性的防治措施對于心衰的臨床治療有著重要意義。

亞精胺（spermidine， SPD）是一種天然的多胺，既往的研究表明外源性補充SPD有助于改善與衰老相關的心臟、神經、肝臟以及免疫功能的下降［3］。一項在衰老小鼠中的研究表明，膳食補充SPD可以改善衰老小鼠的大腦線粒體功能以及認知能力［4］。而在腫瘤中，SPD可以直接激活線粒體三功能復合體進而促進小鼠的抗腫瘤免疫能力［5］。同時，既往報道SPD可以通過促進心肌細胞線粒體生成改善衰老小鼠出現的心功能障礙［6］。心臟作為持續收縮做功而消耗大量能量的器官，線粒體對其正常的能量生成代謝至關重要［7］。線粒體能量代謝受損是心力衰竭公認的關鍵致病因素［8］。鑒于SPD與線粒體功能聯系密切，本研究旨在討論SPD對壓力超負荷心力衰竭小鼠的改善作用，并探討其依賴于心肌線粒體能量代謝的具體機制。

材料和方法

1 實驗動物

8周齡的野生型C57BL/6J小鼠和1～3日齡SD大鼠乳鼠均購自空軍軍醫大學動物中心。所有小鼠均在恒溫恒濕動物房中飼養。所有動物實驗的設計和操作程序經第四軍醫大學動物倫理委員會批準。

2 主要試劑及儀器

沉默信息調節因子6（silent information regulator 6， SIRT6）抗體、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1， PGC-1）抗體及抗兔和鼠Ⅱ抗均購于Signalway Antibody；GAPDH和線粒體融合蛋白2（mitofusin 2， MFN2）抗體均購于中國三鷹生物技術有限公司；SIRT6siRNA （siSIRT6）購于漢恒生物科技有限公司；BCA定量試劑盒和鬼筆環肽細胞骨架染色劑均購于Thermo Fisher；超敏ECL發光液購于陜西普羅安蒂生物科技發展有限公司；Ⅱ型膠原酶購于上海生工；MitoTracker Green和4′，6-二脒基-2苯基吲哚（4′，6-diamidino-2-phenylindole， DAPI）染色液購于碧云天公司；三溴乙醇購于展帆生物有限公司；SPD購于上海阿拉丁公司。Langendorff心臟灌流系統購于成都儀器廠；小動物呼吸機購于Harvard Apparatus；小鼠心臟超聲系統購于飛依諾公司；Oxygraph-2k高分辨能量代謝儀購于Oroboros Instruments；酶標儀和熒光顯微鏡購自Thermo Fisher；Western blot發光系統購于Bio-Rad；共聚焦顯微鏡購于Leica。

3 主要方法

3.1 主動脈弓縮窄（transverse aortic constriction，TAC）造模 將8周齡小鼠隨機分為4組，分別為假手術（sham）組、單純SPD喂養組（sham+SPD組）、TAC組和TAC+SPD組。通過TAC手術建立心臟壓力超負荷小鼠模型［9］：利用三溴乙醇麻醉小鼠，利用小動物呼吸機行氣管插管后進行手術操作，利用27號針和6-0尼龍線將右頸無名動脈與左頸動脈之間的橫主動脈縮窄。對于sham組，在周齡匹配的小鼠身上進行了相同的操作，只省略了實際的橫主動脈縮窄。TAC術后飲水添加3 mmol/L SPD喂養6周［3］，之后進行后續實驗操作。

3.2 超聲心動圖檢查 TAC術后6周后，提前24 h

脫去小鼠胸前毛發。用異氟烷混合純氧持續吸入麻醉小鼠，將小鼠放置于恒溫操作板上，超聲探頭置于小鼠胸骨旁，取左室長軸切面，獲取M型超聲心動圖。用超聲心動儀配套軟件測算左心室射血分數（left ventricular ejection fraction， LVEF）、左心室短軸縮短率（left ventricular fractional shortening， LVFS）、收縮期室間隔厚度（interventricular septal thickness during systole， IVSs）和舒張期室間隔厚度（interventricular septal thickness during diastole， IVSd）。

3.3 成年小鼠心肌細胞的分離 使用先前描述的方案分離成年小鼠心肌細胞［10］。利用Langendorff灌流系統用含Ⅱ型膠原酶的消化液灌注消化小鼠心臟，消化完全后獲得細胞懸液，重力沉淀差速分離心肌細胞和成纖維細胞。取富含心肌細胞的底層細胞沉淀，梯度復鈣后對心肌細胞進行后續分析。

3.4 透射電子顯微鏡觀察心肌線粒體 取小鼠心臟后將左心室組織切成1 mm×1 mm×1 mm組織塊，將組織置于2.5%戊二醛中固定過夜。脫水包埋處理后烘箱內固化，超薄切片機切片，使用300 kV透射電鏡觀察不同視野的心肌線粒體形態，獲得圖像，并使用ImageJ軟件進行分析，計算單位面積內線粒體數目及線粒體嵴密度。

3.5 心肌線粒體功能測定 利用Oxygraph-2k高分辨呼吸能量代謝儀測定線粒體的耗氧量，以評估線粒體功能。先迅速分離20 mg小鼠心肌組織，置于4 mL提前預冷的呼吸介質miR05中將組織勻漿化，上述步驟均在冰上進行。將組織勻漿加入2 mL腔室，并加入不同線粒體復合物所需底物以測定線粒體呼吸鏈復合物功能［11］。

3.6 Western blot 分別取各組小鼠心臟相同位置20 mg組織，將組織置于PBS中剪碎，并用PBS清洗3次，之后加入RIPA裂解液于超聲上進一步裂解。靜置30分鐘后離心取上清。以上過程均在4 ℃低溫條件下進行。取上清液進行BCA蛋白定量。原代心肌細胞提取蛋白先用PBS輕柔沖洗細胞，洗去殘余培養液，隨后添加RIPA裂解液，后續步驟與組織提取蛋白相同。根據定量結果調整各樣本上樣體積，按照Western blot實驗流程進行操作，采用10% SDSPAGE凝膠分離蛋白，轉至PVDF膜。5%脫脂奶粉常溫封封閉1 h。1× TBST溶液漂洗，4 ℃條件下Ⅰ抗（SIRT6、PGC-1和MFN2抗體，均1∶1 000稀釋）孵育過夜。1× TBST溶液漂洗3次。室溫下羊抗兔Ⅱ抗（1∶5 000稀釋）孵育90 min，1× TBST溶液漂洗3次。配制超敏ECL發光液（A液和B液1∶1配制），用化學發光法檢測目的蛋白條帶，用蛋白印跡成像系統記錄條帶，組織以GAPDH為內參蛋白進行目的蛋白定量分析，細胞以β-actin為內參蛋白進行目的蛋白定量分析。

3.7 原代大鼠心肌細胞的分離、培養和細胞實驗分組 將1～3日齡SD大鼠乳鼠在75%酒精中充分浸泡，乳鼠體表消毒后轉移至超凈臺內，迅速摘取乳鼠心臟，置于無菌PBS中，清洗干凈心臟血液，充分剪碎乳鼠心臟，置于無菌玻璃瓶中。加入1 g/L的Ⅱ型膠原酶5 mL，膠頭滴管反復輕柔吹打混勻心肌組織，用無菌瓶蓋密封玻璃瓶，在37 ℃孵箱中消化心肌組織5 min，輕柔吸取上層消化液，加入含10%胎牛血清DMEM培養液的5 mL離心管中以終止消化。重復消化5～6次直至心肌組織消化完畢。收集消化后所得細胞混懸液，室溫下800×g離心5 min，棄上清后所得沉淀即為原代心肌細胞和成纖維細胞。用含10%胎牛血清的DMEM培養液重懸沉淀后種植于小培養瓶，37 ℃孵箱中靜置2 h，差速貼壁使成纖維細胞貼壁，此時原代心肌細胞未貼壁而處于懸浮狀態。最后，將小培養瓶中的培養液轉移至6孔板培養48 h，原代心肌細胞即可充分貼壁。原代心肌細胞分為對照（control， Con）組、Con+SPD （1 mmol/L）組、血管緊張素II（angiotensin II， Ang II；1 μmol/L）組、Ang II+SPD組和Ang II+SPD+siSIRT6組。

3.8 形態學觀察 小鼠安樂死后，取心臟組織，用PBS溶液沖洗，用4%多聚甲醛溶液固定，石蠟包埋，4 μm切片。麥胚凝集素（wheat germ agglutinin， WGA）染色觀察心肌細胞橫截面積大小。Masson染色評估心肌纖維化。定量測量使用ImageJ軟件。

4 統計分析

用GraphPad Prism 8軟件進行分析。所有數據均以均數±標準差（mean±SD）表示。采用單因素方差分析進行組間比較，進一步兩兩比較使用LSD-t檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 TAC小鼠心功能下降，心臟肥大，心肌組織SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平下降

TAC術后6周，超聲結果顯示TAC組小鼠LVEF和LVFS均顯著下降（P＜0.05），即心臟收縮功能下降，見圖1A；肉眼可見TAC組小鼠心臟較sham組明顯變大，見圖1B；與sham組相比，TAC組小鼠心肌組織中SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平均顯著下降（P＜0.05），見圖1C。

Figure 1.Transverse aortic constriction（TAC） induced cardiac hypertrophy， and decreased cardiac function and protein expression levels of silent information regulator 6（SIRT6）， peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1（PGC-1） and mitofusin 2 （MFN2）.A： representative images of echocardiography of mice in each group and statistical charts of left ventricular ejection fraction （LVEF） and left ventricular fractional shortening （LVFS）；B： representative images of gross mouse heart specimens；D： the expression levels of SIRT6， PGC-1 and MFN2 in heart tissues were detected by Western blot.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs sham group.圖1 TAC小鼠心功能下降，心臟肥大，心肌組織SIRT6、PGC-1和MFN2表達水平下降

2 SPD對TAC小鼠心臟肥大和心肌細胞肥大的影響

心臟大體照片顯示，SPD喂養逆轉了TAC組小鼠心臟肥大，降低了TAC組小鼠心重比體重和心重比脛骨長（P＜0.05），見圖2A。利用Langendorff灌流急性分離4組小鼠的成年心肌細胞，進行心肌細胞骨架染色后用共聚焦顯微鏡觀察，TAC組小鼠心肌細胞長度和寬度均高于sham組（P＜0.05），而SPD緩解了心肌細胞的肥大（P＜0.05），見圖2B。WGA染色也發現SPD減輕了TAC誘導的心肌細胞橫截面積增大（P＜0.05），見圖2C。對比于sham組，sham+SPD組上述指標均未見顯著差異（P＜0.05），見圖2A～C。

Figure 2.Effects of spermidine （SPD） on cardiac hypertrophy and hypertrophy of cardiomyocytes in mice with transverse aortic constriction （TAC）.A： representative images of gross mouse heart specimens， and statistical charts of the ratio of heart weight to body weight（HW/BW） and the ratio of heart weight to tibia length （HW/TL）；B： representative images of phalloidin（red） and DAPI （blue） staining showing the cytoskeleton of the adult cardiomyocytes （scale bar=10 μm）， and quantitative analysis of the adult cardiomyocyte length and width；C： representative wheat germ agglutinin （WGA） staining images and quantitative analysis of cell area.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs sham group；#P＜0.05 vs TAC group.圖2 亞精胺對TAC小鼠心臟肥大和心肌細胞肥大的影響

3 SPD對TAC小鼠心肌組織SIRT6、PGC-1和MFN2表達及線粒體質量的影響

Western blot結果顯示，SPD喂養增加了TAC組小鼠心肌組織SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平（P＜0.05），見圖3A。同時利用透射電鏡觀察心肌組織線粒體發現，相較于sham組，TAC組小鼠心肌線粒體內線粒體嵴密度降低（P＜0.05），單位面積內線粒體數目減少（P＜0.05），線粒體排布不規則，而SPD喂養增加了TAC組小鼠心肌線粒體數目和線粒體嵴密度（P＜0.05），見圖3B。

Figure 3.Effects of spermidine （SPD） on SIRT6， PGC-1 and MFN2 expression levels and mitochondrial quality in transverse aortic constriction （TAC） mice.A： the protein expression of SIRT6， PGC-1 and MFN2 in mouse heart tissues of each group；B：representative transmission electron microscopic images of the myocardium （scale bar=1 μm）， and determinations of the ratio of cristal area to mitochondrial area and the number of mitochondria per μm2.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs sham group；#P＜0.05 vs TAC group.圖3 亞精胺對TAC小鼠SIRT6、PGC-1和MFN2表達水平及線粒體質量的影響

4 SPD對TAC小鼠線粒體功能、心肌纖維化和心功能的影響

使用Oxygraph-2k高分辨能量代謝檢測儀的底物-解偶聯劑-抑制劑滴定（substrate-uncoupler-inhibitor titration， SUIT）方案［12-13］來評估小鼠心肌線粒體功能，通過測定小鼠心肌組織線粒體復合物的耗氧率（oxygen consumption rate， OCR）來量化線粒體呼吸功能。與sham組相比，加入丙酮酸（pyruvate）、谷氨酸（glutamate）和蘋果酸（malate）后，線粒體復合物I的OCR在TAC組中下降，而TAC+SPD組線粒體復合物I的功能改善（P＜0.05）；加入琥珀酸（succinate）測定線粒體復合物II的OCR，SPD同樣改善了TAC組中下降的線粒體復合物II功能（P＜0.05）；加入抗壞血酸（ascorbate）和N，N，N′，N′-四甲基對苯二胺（N，N，N′，N′-tetramethyl-p-phenylenediamine， TMPD），與TAC組相比，TAC+SPD組中線粒體復合物IV的功能也得到了改善（P＜0.05）；與sham組相比，sham+SPD組線粒體復合物I、II和IV的功能也有了一定程度的增強（P＜0.05），見圖4A。Masson染色顯示，與sham組相比，sham+SPD組小鼠心肌組織無明細差別，而TAC組心肌纖維化程度增高（P＜0.05）；相較于TAC組，SPD喂養減少了TAC組小鼠心肌纖維化面積（P＜0.05），見圖4B。TAC術后6周超聲結果顯示，相比于TAC組，TAC+SPD組小鼠心臟收縮功能改善，LVEF和LVFS均高于TAC組（P＜0.05），心肌肥大的指標IVSs和IVSd，TAC+SPD組也均低于TAC組（P＜0.05），與大體觀測結果（圖2A）一致，見圖4C。

Figure 4.Effects of spermidine（SPD） on mitochondrial function， myocardial fibrosis and cardiac function in transverse aortic constriction（TAC） mice.A： representative experiment for determining mitochondrial oxidative phosphorylation （OXPHOS）capacity using Oxygraph-2k instrument， and statistical charts of mitochondrial OXPHOS capacity of complexes I， II and IV；B： representative Masson staining images of mouse heart tissues in each group （scale bar=50 μm） and quantitative analysis of interstitial fibrosis；C： representative images of M-mode echocardiography， and determinations of left ventricular ejection fraction （LVEF）， left ventricular fractional shortening （LVFS）， interventricular septal thickness during systole（IVSs） and interventricular septal thickness during diastole （IVSd）.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs sham group；#P＜0.05 vs TAC group.圖4 亞精胺對TAC小鼠線粒體功能、心肌纖維化和心功能的影響

5 SPD對Ang II誘導的原代大鼠心肌細胞SIRT6、PGC-1和MFN2表達及線粒體形態的影響

Western bolt結果顯示，Ang II刺激24 h后心肌細胞SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平均較Con組顯著下降（P＜0.05）；而Ang II+SPD組SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平較Ang II組顯著升高（P＜0.05），見圖5A。利用鬼筆環肽染色細胞骨架，DAPI染色細胞核，對比Con組，Ang II刺激后心肌細胞出現肥大，Ang II+SPD組緩解了心肌細胞肥大（P＜0.05），見圖5B。利用MitoTracker Grenn染色心肌細胞線粒體，共聚焦顯微鏡觀察顯示，對比Con組，Ang II組線粒體的數目顯著減少，線粒體的平均面積顯著縮?。≒＜0.05），而SPD緩解了線粒體數目的減少及平均面積的縮?。≒＜0.05），見圖5C。

Figure 5.Effects of spermidine（SPD） on expression of SIRT6， PGC-1 and MFN2 and mitochondrial morphology in primary rat cardiomyocytes induced by angiotensin II （Ang II）.A： the protein expression of SIRT6， PGC-1 and MFN2 determined by Western blot；B： representative fluorescence microscopic images showing cell area stained by phalloidin （scale bar=20 μm） and statistical charts of cell area；C： representative confocal microscopic images showing mitochondrial morphology stained by MitoTracker Green （scale bar=20 μm）， and statistical charts of mitochondrial number per cell and mean mitochondrial volume ［fold over congtrol （Con） group］.Mean±SD.n=5.*P＜0.05 vs Con group；#P＜0.05 vs Ang II group.圖5 亞精胺對Ang II誘導的原代大鼠心肌細胞SIRT6、PGC-1和MFN2表達及線粒體形態的影響

6 轉染siSIRT6后SPD對Ang II誘導的原代大鼠心肌細胞SIRT6、PGC-1和MFN2表達及線粒體形態的影響

為驗證SPD是否通過SIRT6緩解心肌肥大及改善線粒體形態，分離原代心肌細胞后，利用siSIRT6干擾SIRT6的表達。轉染siSIRT6后，Ang II刺激24 h，Ang II+SPD+siSIRT6組SIRT6、PGC-1和MFN2蛋白表達水平較Ang II+SPD組不再升高（P＜0.05），見圖6A；細胞骨架染色提示，siSIRT6消除了SPD對細胞肥大的逆轉作用（P＜0.05），見圖6B；心肌細胞線粒體染色提示，siSIRT6消除了SPD對線粒體形態的改善作用（P＜0.05），見圖6C。

Figure 6.Effects of SIRT6 siRNA （siSIRT6） combined with spermidine （SPD） on expression of SIRT6， PGC-1 and MFN2 and mitochondrial morphology in primary rat cardiomyocytes induced by angiotensin II （Ang II）.A： the protein expression of SIRT6， PGC-1 and MFN2 detected by Western blot；B： representative fluorescence microscopic images showing cell area stained by phalloidin （scale bar=20 μm） and statistical charts of cell area；C： representative confocal microscopic images showing mitochondrial morphology stained by MitoTracker Green （scale bar=20 μm）， and statistical charts of mitochondrial number per cell and mean mitochondrial volume ［fold over congtrol （Con） group］.Mean±SD.n=5.*P＜0.05 vs Con group；#P＜0.05 vs Ang II group.圖6 轉染siSIRT6后亞精胺對Ang II誘導的原代大鼠心肌細胞SIRT6、PGC-1和MFN2表達及線粒體形態的影響

討 論

病理性心肌肥大作為心臟壓力超負荷的重要特征，常常伴隨著多種不良的心血管事件，包括心力衰竭、心律失常、心源性猝死等［14］。作為一種心室代償反應，病理性心肌肥大以單個心肌細胞延長為特點，然而最終會進展為心室擴張、室壁變薄和收縮功能障礙［15］。在病理性肥大進展為心力衰竭的過程中，線粒體功能障礙，線粒體質量控制系統紊亂促進了心肌病理性重塑的進程［14］。心臟能量代謝的變化往往早于心力衰竭發生，在病理性肥大情況下，心臟能量代謝的適應性受損加劇了病理性肥大［16-17］。心肌細胞的加速死亡和ATP產生效率的下降都直接導致心臟收縮功能下降進而發生心力衰竭［18-19］。因此，本研究聚焦于SPD能否通過能量代謝途徑緩解壓力超負荷小鼠病理性心肌肥大和心力衰竭，提出了潛在的治療靶點。

SIRTs蛋白家族是一類依賴于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide， NAD+）的第III類組蛋白脫乙酰酶［20-21］。在病理性心肌肥大和心力衰竭時，由于NAD+水平降低和SIRTs蛋白失活，線粒體蛋白發生高度乙?；?2-24］，從而加速了能量代謝紊亂和心力衰竭的發展。SIRT6蛋白大部分定位于細胞核內［25］，在應激反應時也可以移位至細胞質內［26］。SIRT6在功能上與SIRT1具有相似性，但SIRT6不僅具有去乙?；幕钚?，也是ADP核糖基轉移酶，在細胞內發揮能量傳感器及穩態調節的作用［27］。既往的研究表明，SIRT6的活性失調導致了代謝性疾病、心血管疾病、癌癥、骨骼肌和神經退行性疾病的發生與進展［28-29］。一項研究發現，小鼠心臟特異性敲除SIRT6后，出現心肌肥大及纖維化，乃至心力衰竭，而心臟特異性過表達SIRT6可通過胰島素樣生長因子的去乙?；种芓AC誘導的肥大［30］。過去研究表明，SPD可通過SIRT1在心臟衰老和血管鈣化中發揮心血管保護作用［6，31］。本研究中，TAC 6周后心衰小鼠心肌組織中SIRT6蛋白表達下降，與既往研究結果一致［30］，而SPD的補充緩解了SIRT6蛋白的降低，減輕了心功能障礙，改善了線粒體功能。

PCG-1是調控線粒體生物發生的核受體轉錄輔激活因子，乙?；瘯е缕涔δ芙档瓦M而引發線粒體生成不足，線粒體功能障礙［32-33］。本研究結果顯示，心衰小鼠心肌組織中PGC-1表達水平下降，電鏡觀察發現線粒體數目減少，線粒體嵴密度降低，在Ang II處理的原代大鼠心肌細胞中也觀察到了線粒體減少與紊亂，而SPD上調了SIRT6的水平進而促進了PGC-1表達，改善了線粒體質量。利用siSIRT6干擾SIRT6的表達后，SPD對Ang II組心肌細胞PGC-1和MFN2表達水平的升高作用、對心肌細胞肥大的逆轉作用和對線粒體質量的改善作用消失，提示SPD改善效應的途徑可能是SIRT6依賴的。

心肌細胞不具有強大的能量貯存能力，ATP必須持續產生以滿足心臟的收縮需求［34］。衰竭的心臟被描述為“燃料耗盡引擎”，其對能量需求的增加超過了能量供應能力，導致了需求和供應之間的不平衡［19］。心力衰竭時，心臟中的高能磷酸鹽含量下降50%～70%，在終末期的心衰中，ATP含量下降了30%［35-37］。線粒體作為細胞能量代謝中心，通過氧化磷酸化產生ATP滿足心臟的能量需求［38］。同時，心臟的線粒體底物代謝重塑，可以作為心力衰竭的早期診斷標志［39］。作為維持線粒體完整結構及正常能量代謝功能的重要前提，線粒體擁有通過裂變、融合和自噬來調控自身的質量控制系統［40］。既往研究表明，作為線粒體融合的重要分子，MFN2的缺失會損傷線粒體呼吸鏈的氧化磷酸化代謝能力［41-42］。本研究結果表明，壓力超負荷心衰小鼠心肌組織中的MFN2表達水平下降，線粒體氧化磷酸化能力下降，心功能下降；外源SPD的攝入上調了心衰小鼠心肌組織中的MFN2表達水平，改善了心衰小鼠的線粒體動力學和氧化磷酸化能力。原代心肌細胞在Ang II處理的同時給予SPD，可上調MFN2水平，緩解Ang II導致的線粒體紊亂及細胞肥大。

綜上所述，本研究發現，SPD可以緩解壓力超負荷小鼠心力衰竭，改善心臟收縮功能，減輕心肌肥大重塑，抑制心肌纖維化，恢復心衰小鼠線粒體穩態，提高線粒體氧化磷酸化能力，挽救心衰小鼠的能量缺乏。本研究進一步探索了SPD在心力衰竭治療中的潛在臨床價值。