超高效液相色譜-串聯質譜法檢測湯料食品中的罌粟殼成分

◎ 高友漢

（扎魯特旗市場檢驗檢測中心，內蒙古 通遼 029100）

有學者通過研究發現，罌粟殼中的生物堿類物質會對人的睡眠質量、性格、思維邏輯以及記憶等造成影響，如果食用量過多，會出現嗜睡、思維邏輯能力顯著降低以及記憶力下降等問題，甚至出現精神失常，嚴重時會出現死亡等[1]。目前，雖然我國在這一方面出臺了一些政策，加大了對各種食品的監督力度，依法查處不符合規定食品的違法行為，但仍然存在違規違法添加現象[2]。本研究使用超高效液相色譜-串聯質譜法，檢測了湯料食品中罌粟殼成分的罌粟堿、那可丁、蒂巴因、可待因及嗎啡，旨在為相關檢測實驗提供參考。

1 材料與方法

1.1 一般材料

1.1.1 試劑與材料

鹽酸罌粟堿（黑龍江金九藥業有限責任公司）、鹽酸那可?。|北制藥集團公司沈陽第一制藥廠）、蒂巴因（上海哈靈生物科技有限公司）、磷酸可待因（宜昌人福藥業有限責任公司）、嗎啡（青海制藥廠有限公司）、乙腈（德國merck公司）、甲酸、甲酸銨（Themo Fisher 公司）、超純水（屈臣氏集團）、正己烷（天津市康科德科技有限公司）、鹽酸（北京化工廠）。湯料購買于街市店面。

1.1.2 儀器與設備

超高壓液相色譜串聯四極桿質譜儀（美國賽默飛世爾公司）、三重四極桿氣相色譜質譜聯用儀（美國安捷倫科技有限公司）、XS105DU 電子天平[梅特勒-托利多國際貿易（上海）有限公司]、KQ5200B 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、TG16MW 型臺式高速離心機（湖南赫西儀器裝備有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗樣品前處理

通過電子天平，稱取1 g 樣品溶于50 mL 離心管中，再加入100 μL 同位素內標工作液，加入5 mL的0.1 mol·L-1濃度的鹽酸溶液，通過超聲波清洗器超聲10 min，通過4 000 r·min-1高速離心機離心10 min，結束去除下層清液。然后再加入5 mL的0.1 mol·L-1濃度的鹽酸溶液重復上述操作，將2 次獲得的液體放入5 mL 離心管中，并加入5 mL正己烷勻速搖勻，通過4 000 r·min-1高速離心機離心5 min，除去正己烷層，最后過MCX 固相萃取柱，等氮氣吹干后使用乙腈定容到1 mL，通過0.22 μm濾膜上機分析[3-4]。

1.2.2 實驗測定條件

色譜柱，XBridge BEH HILIC/BEH Amide（1.7、2.5、3.5、5 μm），流動相A 相0.1%甲酸乙腈溶液、B 相0.1% 甲酸的10 mmol·L-1乙酸銨溶液，進樣量1.0 μL，梯度洗脫程序詳見表1。

表1 梯度洗脫程序表

質譜條件，正離子源噴霧、多反應監測掃描方式、3.2 kV 毛細管電壓、離子源溫度150 ℃、脫溶劑氣溫度400 ℃、脫溶劑氣流量900 L·Hr-1、錐氣孔流量50 L·Hr-1、碰撞氣（N2）流速0.15 mL·min-1。質譜條件數據詳見表2。

表2 質譜條件數據表

2 結果與分析

2.1 提取液的選擇

本次實驗對0.1 mol·L-1濃度的鹽酸溶液、0.1%甲酸乙腈溶液，以及1%三氯乙酸溶液的提取液進行對比分析，證明了0.1%甲酸乙腈溶液能夠直接提取，特別是在蛋白質較多的湯料食品樣品中，提取沉淀的效果更加明顯，提取效率比其他2個溶液提取液高一些。因此，本次實驗選擇0.1%甲酸乙腈溶液作為提取液[5]。

2.2 流動相洗脫梯度優化

當選擇有機濃度高的等度洗脫時，極性強的化合物先出峰，分離度也較好；當選擇有機濃度低的等度洗脫時，極性強的化合物出峰時間會出現重疊現象，分離度不理想，因此選擇梯度洗脫。如圖1 所示，那可丁1、罌粟堿2、蒂巴因3、可待因4 以及嗎啡5 出峰時間分別為1.87、2.32、4.06、6.19、6.48 min，分離效果好，對目標化合物干擾小。

圖1 罌粟堿、那可丁、蒂巴因、可待因以及嗎啡色譜圖

2.3 質譜條件的優化

本次實驗選取湯料食品樣品中的罌粟殼物質標準品，并采用多反應檢查掃描方式進行離子優化，找到最佳毛細管電壓3.2 kV、錐氣電壓、碰撞能量。通過對5 種罌粟殼成分進行逐一優化，找到了最佳定性離子對、錐氣電壓以及碰撞能量，具體數據見表2，以響應信號最高的為定量離子，其次為定性離子。

2.4 線性范圍和檢出限

對配置好的標準溶液上機檢測，嗎啡與可待因在添加濃度范圍0.6～22 μg·L-1范圍內的線性關系良好，罌粟堿、那可丁以及蒂巴因在添加濃度范圍0.2～6.0 μg·L-1范圍內的線性關系良好。數值均大于0.995，具體數據見表3。

表3 罌粟殼成分的線性實驗結果表

2.5 回收率與精密度

通過超高效液相色譜-串聯質譜法檢測方法，檢測湯料食品中罌粟殼成分，對湯料食品中的罌粟堿、那可丁、蒂巴因、可待因以及嗎啡進行檢測。其中，在進行加標實驗時，罌粟堿、那可丁以及蒂巴因分別為0.25、2.5、25.0 μg·kg-1，可待因與嗎啡分別為0.5、5.0、50.0 μg·kg-1，對每個水平進行測定。結果顯示，可待因與嗎啡回收率為77.45%～94.47%，罌粟堿、那可丁以及蒂巴因回收率為79.13%～95.38%，該種方法精密度與準確度較高，具體數據見表4。

表4 罌粟殼成分加標回收率表

3 結語

綜上所述，本文建立了檢測湯料食品中罌粟殼成分的超高效液相色譜-串聯質譜法檢測方法，采用多反應監測掃描方式得出檢測結果。嗎啡與可待因的添加濃度范圍是0.6～22 μg·L-1，回收率為77.45%～94.47%；罌粟堿、那可丁以及蒂巴因的添加濃度范圍是0.2～6.0 μg·L-1，回收率為79.13%～95.38%。該檢測方法簡單易操作，檢測準確，且精密度高，既可為湯料食品中的罌粟殼成分檢測提供技術保障，也可為相關檢測實驗提供參考。