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不同產地桑樹桑黃的總黃酮量和部分金屬元素含量的比較

2024-05-09 04:01李婉茹何峰
新農民 2024年10期
關鍵詞:總黃酮

李婉茹 何峰

摘要:本試驗采用分光光度法測定了云南麻栗坡、山東夏津、西藏波密、吉林長白山、云南麗江5個產地的野生桑樹桑黃和西藏波密人工養殖的桑樹桑黃的總黃酮量,經測定結果表明,野生桑樹桑黃的總黃酮量含量較高,其中西藏波密的野生桑樹桑黃的總黃酮量含量最高,并采用電子耦合等離子體發射光譜法測定了這六個樣品的部分金屬元素含量,結果得到西藏波密野生桑黃的K和Zn含量較高。

關鍵詞:桑樹桑黃;總黃酮;金屬元素含量

桑黃俗稱桑黃菇、桑臣和桑耳,野生桑樹桑黃的藥用價值極高,具有抗發炎、止血、治婦女病的功效,在我國已證實的產地有西藏、四川、云南、山東、河南、吉林等地,現代醫學的研究中,桑黃在治療癌癥領域的真菌中排名第一[1],桑黃中提取的黃酮具有抗腫瘤的功效[2],桑黃營養價值豐富[3],具有保健的功效,被制成茶包[4]等產品,學者們關于桑樹桑黃的分類屬性爭論不休,在近十年來對桑黃這類真菌的分類屬性達成共識,認為它們是擔子菌門(Basidiomycota)蘑菇綱(Agaricomycetes)銹革菌目(Hymenochaetales)銹革菌科(Hymenochaetaceae)的大型多孔菌[5]。

近年來,有學者發現中藥的藥效與所含微量元素及其含量比值有關。這些微量元素是有著重要的生理功能、營養作用和臨床診斷意義比如Zn能參與多種酶的合成與激活,并直接參與生長發育、內分泌、免疫遺傳功能,還可以參與防衰老抗癌腫[6]?,F已經由實驗證實,黃酮與金屬元素所形成的配合物的OH-1自由基清除能力要強于黃酮,同時也表現出黃酮與金屬元素之間的抗活性氧的協同作用,OH-1自由基清除能力順序為:二價鋅配合物>三價鐵配合物[7],現有研究中對桑黃金屬元素含量和黃酮含量的比較分析較少。為研究各產地的桑樹桑黃是否由于地域差異存在差異,本研究比較了云南麻栗坡、山東夏津、西藏波密、吉林長白山、云南麗江5個產地的野生桑樹桑黃的總黃酮量和部位金屬元素含量,同時,桑黃作為一類珍貴的食藥用菌,具有良好的營養價值、藥用價值及保健功效,在抗菌消炎、抑制腫瘤、降血糖等方面均有重要作用[8],為探討種植桑黃是否與野生桑黃存在差異,選取了西藏波密養殖桑樹桑黃進行比較分析,為更地開發和利用該資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料和試劑

1.1.1 試驗材料

試驗材料為2023年7~11月從各地采購,經送樣檢測后,利用PCR法進行測定,1—6號樣品經瓊脂糖跑膠鑒定均檢出650 bp大小片段,根據桑樹桑黃的引物對比較后,確定送檢樣品均為桑樹桑黃。

1.1.2 試驗試劑

蘆丁標樣(合肥博美生物科技有限責任公司),試驗所需硝酸鋁、醋酸鉀、硝酸、高氯酸等均為優級純。

1.2 試驗方法

1.2.1 桑黃中總黃酮的提取

桑黃總黃酮量的測定采用分光光度法[9],將材料經過粉碎后,過14目篩,混勻,稱取1.000 g粉碎后的樣品置于燒杯中,加入95%的乙醇約30 mL,65℃水浴加熱45 min攪拌萃取黃酮,冷卻后迅速過濾上清液,殘渣用95%乙醇洗至無色,再用95%乙醇稀釋至50 mL定容,搖勻后取5~10 mL樣品置于50 mL容量瓶中使用95%乙醇定容,搖勻。

1.2.2 桑黃中總黃酮含量的測定

(1)配置濃度為100 g·L-1的硝酸鋁溶液:稱取17.60 g Al(NO3)3·9H2O,加水溶解后定容至

100 mL。

(2)配置濃度為9.8 g·L-1的硝酸鋁溶液:稱取醋酸鉀9.814 g,加水溶解后定容至100 mL。

(3)標準曲線的繪制:準確稱取干燥后的蘆丁

50 mg,加無水乙醇定容至50 mL的容量瓶中,取蘆丁標樣0、1、2、3、5、7、10 mL分別置于50 mL容量瓶中;再用吸量管依次加入配置好的硝酸鋁溶液1 mL,配置好的醋酸鉀溶液1 mL,15 mL 95%乙醇,加水定容后搖勻靜置1 h后待測,使用分光光度計,調至波長為415 nm處,依次測定吸光度,建立標準曲線。

(4)待測樣品測定:移取1.2.1中的1.0 mL,置于50 mL容量瓶中,再依次加入1 mL硝酸鋁溶液、1 mL醋酸鉀溶液和15 mL 95%乙醇,加水定容。使用分光光度計在415 nm處測量得到待測樣品的吸光值。

(5)根據式①計算總黃酮量。

式中:

X——總黃酮含量,%;

m——由吸光度值計算出的蘆丁的質量,mg;

W——樣品的質量,g;

d——稀釋比例。

1.2.3 桑黃金屬含量的測定

金屬元素含量的測定采用電感耦合等離子體發射光譜法。

(1)樣品處理:使用濕法消解,使用萬分位天平準確稱取0.2~1 g樣品于150 mL高型燒杯中,加入9.0 mL 5%硝酸和1 mL高氯酸,置于電熱板上,控制電熱板溫度為130~150℃,待大量棕色煙消失后,加熱至180℃后繼續消解,當消解液變為黑色后加入少量的5%硝酸,直至冒白煙,消解液呈透明,冷卻后移入25 mL容量瓶中,多次洗滌合并入容量瓶中,定容,用相同的方法做空白樣。

(2)樣品測定:根據儀器操作說明,配置待測元素標液后,上機測定各待測的光譜強度,再由標準曲線得到待測金屬元素的含量。

(3)根據②式計算各元素的含量。

式中:

X——待測元素含量,mg/kg;

ρ——待測元素濃度,μg/mL;

ρ0——待測元素空白濃度,μg/mL;

V——待測樣體積, mL;

N——試樣稀釋倍數;

m——試樣質量,g。

1.3 主要儀器和設備

紫外可見分光光度計(TU-1810),電感耦合等離子體發射光譜儀(ICAP7000),分析天平

(ME204E)。

2 結果分析

2.1 不同產地桑黃的總黃酮量比較

由表1可知,西藏波密產的野生桑黃(編號4)總黃酮含量最高,達到918.2 mg/100 g,是這6種產地中黃酮含量最高的。山東夏津產的野生桑黃(編號5)總黃酮含量為896.5 mg/100 g,居于第二位。吉林長白山產的野生桑黃(編號3)總黃酮含量也很高,達到371.8 mg/100 g,居于第三位。云南麗江產的野生桑黃(編號6)總黃酮含量為159.1 mg/100 g,居于較低水平。云南麻栗坡(編號2)和西藏波密產的人工養殖桑黃(編號1)總黃酮含量較低,分別為37.07 mg/100 g和

60.87 mg/100 g??梢哉J為野生桑黃的總黃酮含量普遍高于人工養殖的桑黃,而且不同產地的野生桑黃總黃酮含量也存在差異。

2.2 不同產地桑黃的Mg、K、Ga、Fe、Zn含量比較

取樣0.2~0.4 g,樣品編號同表1,濕法消解后定容,經測定得到不同金屬含量。各個樣品的Mg含量數據見圖1。樣品1和樣品6分別是西藏波密人工養殖桑黃和云南麗江野生桑黃,這兩個樣品的Mg含量較高,吉林長白山(樣品3)的Mg含量最低。

各個樣品的K含量數據見圖2。西藏波密野生桑黃(樣品4)的K含量較高,其他樣品的K含量都較低。

各個樣品的Ca含量數據見圖3。云南麻栗坡野生桑黃(樣品2)的Ca含量較高。

各個樣品的Fe含量數據見圖4。云南麻栗坡野生桑黃(樣品2)的Fe含量較低,其余桑黃的Fe含量差距不大。

各個樣品的Zn含量數據見圖5。西藏波密野生桑黃(樣品4)的Zn含量較高。

3 討論

在6個樣品的比價中,種植桑黃與野生桑黃相比,總黃酮含量較低,其余各產地的野生桑黃中,產地為西藏波密的野生桑黃總黃酮量最高。在幾種金屬元素的比價分析中,西藏波密的野生桑黃的含Zn、K量較高,云南麗江的野生桑黃含Mg量較高,云南麗江和云南麻栗坡野生桑黃的Ca含量較高,不同產地桑黃因地域差異總黃酮量和金屬元素含量具有一定的差異??紤]到現有研究中認為形成黃酮與金屬元素形成的配位作用的抗氧化性更強,西藏野生桑黃的藥用價值相較而言更高,而針對抗氧化能力這一指標,則需要通過試驗進一步進行探討。

本研究中,選取了同為西藏波密的野生桑黃和人工養殖桑黃進行了比較,無論是總黃酮量還是金屬含量上都存在較大的差異,而種植方式是否影響桑樹桑黃的藥用效果,種植桑黃經過改良種植條件后是否能與野生桑黃具有等同的藥用價值,都是值得進一步研究的問題。

參考文獻

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[2] 黃羅丹,安春艷,劉德陽,等.液體發酵桑黃總黃酮對抗腫瘤活性及細胞周期的影響[J].山東理工大學學報(自然科學版),2019,33(2):65-68+73.

[3] 劉錦程,弓志青,楊鵬,等.桑黃營養成分、活性成分及多糖性質分析[J].食品工業科技,2023(22):241-248.

[4] 洪文龍,謝春芹,許俊齊,等.桑黃靈芝袋泡茶制作及沖泡工藝研究[J].保鮮與加工,2022,22(4):52-58.

[5] 吳聲華,黃冠中,陳愉萍,等.桑黃的分類及開發前景[J].菌物研究,2016,14(4):187-200+185.

[6] 李倩華,孫淑軍,王洋,等.金屬元素在中醫藥研究中的現狀[J].世界科學技術-中醫藥現代化,2015,17(4):901-906.

[7] 李方.黃酮類有機金屬配合物及其生物構效和協同作用的研究[D].宜賓:四川大學,2004.

[8] 謝存一,周禹佳,張疏雨,等.桑黃活性成分研究及行業發展分析[J].食用菌,2023,45(3):1-5.

[9] 王爍,蔣明蔚,李曉斌,等.蜂膠中總黃酮含量的測定[J].食品與發酵工業,2012,38(12):152-156.

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