電感耦合等離子體質譜法測定賽洛多辛中鈀元素的含量

穆二廷，魏茂陳，成亮*

（1.上海碩方醫藥科技有限公司，上海 201400；2.貴陽新天藥業股份有限公司，貴州貴陽 550018）

賽洛多辛（Silodosin），化學名為(-)-1-(3-羥丙基)-5-[(2R)-2-[2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基]氨基]丙基]-2,3-二氫-1H-吲哚-7-羧基酰胺[1]。賽洛多辛是一種新型高度選擇性α1A腎上腺素受體阻滯劑，在治療良性前列腺增生癥方面已顯示出較好的療效[2]。金屬鈀類化合物作為催化劑在醫藥合成領域的應用極為廣泛。賽洛多辛的合成中殘留的金屬鈀元素會被進一步帶入到藥物制劑中，從而造成藥品中金屬鈀元素雜質的殘留[3-4]。根據人用藥品技術要求國際協調理事會（ICH）Q3D 的分類，鈀被作為2B 類即被認為是給藥途徑依賴型的人體有害元素，具有顯著的安全隱患[5-6]。目前，國內外有關賽洛多辛中鈀元素分析的研究鮮有報道，利用ICP-MS 測定賽洛多辛中鈀元素的方法尚未見文獻報道。因此，開展賽洛多辛中鈀元素分析研究對于保證賽洛多辛的安全性具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

NexION 2000 型電感耦合等離子體質譜儀，美國PerkinElmer 公司；SPB 50-24 型石墨消解儀，美國PerkinElmer 公司；MARS 6 型微波消解儀，美國CEM公司；ML204T/02 型萬分之一天平，瑞士METTLER TOLEDO 公司；MING-CHE 24UV 型純水儀，德國Merck millipore 公司。

鈀（Pd，批號20190715）、銦（In，批號20190627）、鎘（Cd，批號20190805）單元素標準溶液，均購于國家有色金屬及電子材料分析測試中心，質量濃度分別為1 000.0 mg/L、100.0 mg/L、100.0 mg/L；硝酸（20191204），優級純，國藥集團化學試劑有限公司；鹽酸（20191030），分析純，國藥集團化學試劑有限公司；水為超純水。

賽洛多辛樣品共12 批（批號：SD-A1-1804001、SD-A1-18022301、SD-A1-18040901、SD-A1-19082801、SD-A1-19082802、SD-A1-19082803、SD-18051501、SD-18051601、SD-18051701、SD-18080601、SD-18080801、SD-18081001），由上海匯倫生命科技有限公司提供。

1.2 ICP-MS 條件

等離子氣體流速：15.0 L/min；輔助載氣氣體流速：1.2 L/min；氦氣載氣流速：5.0 L/min；霧化器氣流速：0.94 L/min；霧化器溫度：2.5 ℃；采樣深度：5.0 mm；蠕動泵轉速：35 r/min；射頻功率：1 600 W；氦氣碰撞模式。

1.3 溶液配制

（1）標準溶液配制：精密量取0.5 mL 的Pd 單元素標準溶液（1 000.0 mg/L），用含10%硝酸和2%鹽酸的溶液定容至50.0 mL，稀釋為Pd 單元素儲備溶液A（10.0 mg/L）；精密量取5.0 mL 的Pd 單元素儲備溶液A，用含10%硝酸和2%鹽酸的溶液定容至50.0 mL，稀釋為Pd 單元素儲備溶液B（1.0 mg/L）；用Pd 單元素儲備溶液B 逐級稀釋，分別配制濃度為0.0 μg/L、10.0 μg/L、20.0 μg/L、40.0 μg/L、60.0 μg/L 和100.0 μg/L 的Pd 單元素標準工作溶液。

（2）內標溶液配制：取0.5 mL In 單元素標準溶液（100.0 mg/L），用含10%硝酸和2%鹽酸的溶液定容至50.0 mL，配制成濃度為1.0 mg/L 的In 單元素內標溶液。

1.4 樣品處理

精密稱取樣品約0.2 g，置于消解罐中，分別加入硝酸8.0 mL 和鹽酸1.0 mL，放入石墨消解儀中120 ℃預消解20 min；冷卻后，放置于微波消解儀中按微波消解程序消解（密閉消解，功率為1 200 W，爬升時間為25 min，保持溫度為190 ℃，保持時間為50 min，冷卻時間為25 min）。待冷卻后，將樣品定量轉移至50.0 mL 容量瓶中，用超純水定容至刻度，過濾，即得供試品溶液。同法制備空白樣品。

1.5 試樣測定

采用在線內標法，利用雙蠕動泵管進樣系統將供試品溶液與內標溶液同時泵入霧化器混合后引入ICP-MS 儀。分別對系列標準工作溶液、空白溶液及供試品溶液進行分析，采用標準曲線法定量。

1.6 方法學考察

1.6.1 檢出限、定量限考察

按1.4 項方法處理樣品，在1.2 項ICP-MS 儀器條件下測定11 份空白溶液，將連續測定空白溶液中Pd 元素分析峰響應值與In 內標元素參比峰響應值的比值3 倍標準偏差所對應的Pd 元素濃度作為檢出限；以連續測定空白溶液中Pd 元素分析峰響應值與In 內標元素參比峰響應值的比值10 倍標準偏差所對應的Pd 元素濃度為定量限。

1.6.2 精密度考察

取樣品約0.2 g，精密稱定，精密加入10.0 mg/L Pd 單元素儲備溶液0.2 mL，置于消解罐中，按1.4 項處理樣品。2 名分析人員在不同日期分別取同一批次樣品（SD-A1-1804001）各平行制備6 份，平行供試品溶液編號為01 ～12，在1.2 項ICP-MS 儀器條件下分別測定12 份供試品溶液中的Pd 元素含量，計算其相對標準偏差。

1.6.3 準確度

精密稱定待測樣品（SD-A1-1804001）約0.2 g，平行稱取12 份，按1.4 項方法制備，并分別加入4 個濃度的Pd 元素標準工作溶液。低濃度（定量限附近）加入量相當于供試品中含Pd 0.4 μg/L 的Pd 元素標準工作溶液（編號為L-1、L-2、L-3），中低濃度加入量相當于供試品中含Pd 20.0 μg/L 的Pd 元素標準工作溶液（編號為ML-1、ML-2、ML-3），中濃度加入量相當于供試品中含Pd 40.0μg/L 的Pd 元素標準工作溶液（編號為M-1、M-2、M-3），高濃度加入量相當于供試品中含Pd 60.0 μg/L 的Pd 元素標準工作溶液（編號為H-1、H-2、H-3）。在1.2 項ICP-MS條件下分別測定12 份供試品溶液中的Pd 元素含量，計算回收率。

2 結果與分析

2.1 專屬性

分別取10.0 μg/L Pd 單元素標準工作溶液與100.0 μg/L Cd 元素和10.0 μg/L Pd 元素的混合標準工作溶液引入ICP-MS 儀測定，Pd 單元素測定結果為10.0 μg/L，Cd+Pd 混合測定結果為9.5 μg/L。由此可知，Cd 元素的質量數與Pd 元素的質量數相近，當Cd 標準工作溶液濃度遠遠大于Pd 元素標準工作溶液濃度時，未影響Pd 元素的檢測結果，說明方法專屬性滿足要求。

2.2 標準曲線

取1.3 項下系列標準工作溶液，按1.2 項ICP-MS條件和1.5 項測定方法進樣測定。以Pd 元素分析峰響應值與In 內標元素參比峰響應值的比值為縱坐標，以Pd單元素標準工作溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線。得到標準曲線方程為y=0.004 1x，R2=0.999 99，表明標準曲線的線性關系良好。

2.3 檢出限、定量限

檢出限、定量限實驗結果表明，Pd 元素測定方法檢出限為0.12 μg/L，定量限為0.40 μg/L。

2.4 精密度

精密度及中間精密度結果見表1?？梢钥闯?，精密度RSD（n=6）為2.6%，中間精密度試驗RSD（n=12）為2.6%，結果均符合要求，表明該方法精密度良好。

表1 重復性及中間精密度試驗結果

2.5 準確度

由表2 可知，平均回收率在95.6%～103.5%，RSD（n=12）小于10.0%，表明該方法準確度良好，能夠準確測定賽洛多辛原料藥及制劑中的鈀元素含量。

表2 Pd 元素回收率試驗結果

2.6 樣品測定

按照擬定方法測定12 批賽洛多辛樣品，結果顯示，10 批樣品（SD-A1-1804001、SD-A1-18022301、SD-A1-18040901、SD-A1-19082801、SD-A1-19082802、SD-A1-19082803、SD-18051501、SD-18080601、SD-18080801、SD-18081001）中均未檢出Pd 元素，SD-18051601、SD-1805170122 樣品中Pd 元素含量別為0.039 μg/g 和0.037 μg/g，各批次樣品中Pd 元素含量均遠小于ICH Q3D 中Pd 元素限量值（10.0 μg/g），且均低于限量值的10%，表明賽洛多辛樣品中Pd 元素無風險。

3 討論

樣品消解一般有干法消解、濕法消解、石墨爐消解和微波消解。其中，干法消解具有耗時長、操作煩瑣等問題，且消解過程中溫度高易造成元素損失；濕法消解具有用酸量大，揮酸會產生大量有害氣體等問題[7]。目前分析實驗室使用較多的是石墨爐消解和微波消解，也可根據樣品狀態或性質聯合2 種消解方式的情況。樣品消解使用的酸一般為硝酸、王水、硝酸+高氯酸、硝酸+雙氧水、硝酸+氫氟酸、硝酸+高氯酸+氫氟酸等[8-9]。本課題組通過預實驗嘗試上述不同酸的消解方式，發現賽洛多辛樣品不能消解完全或對儀器檢測有干擾，基質效應明顯，通過不斷嘗試發現樣品∶硝酸∶鹽酸為1 ∶40 ∶5（g ∶mL ∶mL）能夠有效對賽洛多辛樣品進行處理，經消解后樣品仍具有良好的形態，能夠消除基體干擾，滿足進樣要求。

元素雜質測定方法一般有石墨爐原子吸收法、電感耦合等離子體發射光譜法（ICP-AES 法）和ICPMS 法。其中，石墨爐原子吸收法測定原料藥中鈀元素雜質的檢出限約在3.11 μg/L[10-11]，ICP-AES 法測定藥品中鈀元素雜質的檢出限約在40.00 μg/L[12]，石墨爐原子吸收法靈敏度不高，檢測的元素少；而ICPMS 法較ICP-AES 法光譜干擾少，具有更小的檢出限，更適合元素雜質的痕量分析[13]，因此本文建立ICPMS 法測定賽洛多辛中鈀元素雜質的含量。

4 結論

本文建立的ICP-MS 法測定賽洛多辛樣品中鈀元素雜質的檢出限為0.12 μg/L，具有更低的檢出限。經過方法學驗證表明該方法靈敏度高、準確度高、精密度高，可用于賽洛多辛樣品中鈀元素雜質的含量測定。