血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21 對冠心病經皮冠狀動脈介入治療術后支架內再狹窄的預測價值

彭紅建 田香勤 賈國立

隨著醫學技術的進步，經皮冠狀動脈介入治療（percutaneous coronary intervention，PCI）成為治療冠心?。╟oronary heart disease，CHD）的主要非藥物方法之一，PCI 可有效改善冠狀動脈阻塞，恢復心肌血液流動挽救患者心肌組織損傷，但受患者自身因素、疾病病變程度等的影響，仍有術后支架內再狹窄（in-stent restenosis，ISR）問題的存在［1］。有文獻報道［2］，CHD 患者行PCI 術治療后術后支架內再狹窄（in-stent restenosis，ISR）的出現率為15%～30%，致使支架植入無效，對患者預后產生不良影響。因此，了解引起患者PCI 術后發生ISR 的影響因素，并尋找可以預測其發生的敏感指標，對于預防及盡早治療ISR 具有積極作用。成纖維細胞生長因子21（fibroblast growth factors-21，FGF21）是一種內分泌因子，有研究指出［3］，其水平不斷上升會對心血管系統產生影響，加重動脈粥樣硬化進程。分泌型卷曲蛋白5（secreted frizzled related protein 5，Sfrp5）在脂肪組織中分泌產生，主要通過與無翅型MMTV 整合位點家族成員5A 結合發揮抑制炎癥及動脈粥樣硬化的作用［4］。微小RNA（microRNAs，miRNA）在心肌細胞發育、分化、凋亡、心臟重塑等過程中具有重要作用，miRNA-21 作為miRNA 家族的一員，已有研究證實［5］，其水平上升，可以加速心肌纖維化進程，加重患者心功能損傷程度。本研究通過檢測CHD 患者術前血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平，探討對患者PCI 術后ISR 發生的預測價值。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇商水縣人民醫院在2021 年1 月至2022年9 月間行PCI 手術治療的CHD 患者218 例為CHD 組，選取同期非心血管疾病的住院患者97 例為對照組，CHD 組中，男122 例，女96 例，年齡平均（62.47±5.82）歲；對照組中，男54 例，女43 例，年齡平均（61.14±6.37）歲。納入標準：①CHD 診斷符合《穩定性冠心病基層診療指南（2020 年）》［6］中相關標準；②符合手術指征，并首次進行PCI 手術治療；③依從性好，配合隨訪；④所有受試對象均已簽署知情同意書。排除標準：①臨床基本資料不全；②合并感染性、血液系統或免疫系統疾??；③合并惡性腫瘤；④合并肝腎功能異常。本研究經過商水縣人民醫院醫學委員倫理會審批后開展。

1.2 ISR 判定方法及CHD 患者分組

患者于術后6 個月后來院進行復查時，以冠脈造影術檢查顯示置入支架內或支架邊緣遠近端各5 mm 內管腔狹窄≥50%判定為ISR［7］。根據術后是否發生ISR 為分ISR 組（n=56）及無ISR 組（n=162）。

1.3 實驗室指標檢測方法

對照組在入院未接受治療前，CHD 組在進行PCI 手術前采集空腹靜脈血6 mL，離心（9 000 r/min，10 min，離心半徑：12.8 cm）分離后，取上層血清，并置于-80℃的環境下儲存待檢。采用酶聯免疫吸附法檢測FGF21 及Sfrp5 水平，試劑盒分別由上海信裕生物科技有限公司及上海澤葉生物科技有限公司提供；采用ABI7500 型實時熒光定量PCR 檢測儀檢測miRNA-21 表達，U6 為內參，采用2-ΔΔCt法計算miRNA-21 的相對表達量；采用由上海非利加實業有限公司提供的CS-6400 型全自動生化分析儀檢測血脂指標［總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）］。

1.4 統計學方法

運用SPSS 24.0 統計學軟件進行數據分析。計量資料以（）表示，比較采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，比較采用χ2檢驗；采用多因素Logistic 回歸模型分析CHD 患者行PCI 手術后發生ISR 的影響因素；采用ROC 曲線分析FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 對CHD 患者行PCI 手術后發生ISR 的預測價值；以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 比較

CHD 組FGF21、miRNA-21 均高于 對照組，Sfrp5 水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平比較（）Table 1 Comparison of serum FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 levels between 2 groups（）

表1 兩組血清FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 水平比較（）Table 1 Comparison of serum FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 levels between 2 groups（）

2.2 CHD 患者行PCI 手術后影響ISR 發生的單因素分析

ISR 組低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、FGF21、miRNA-21 水平均高于無ISR 組，Sfrp5 水平低于無ISR 組，差異有統計學意義（P＜0.05），ISR 組吸煙、合并糖尿病比率高于無ISR 組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 CHD 患者行PCI 手術后影響ISR 發生的單因素分析［（），n（%）］Table 2 Univariate analysis of influencing factors of ISR after PCI in patients with CHD［（），n（%）］

表2 CHD 患者行PCI 手術后影響ISR 發生的單因素分析［（），n（%）］Table 2 Univariate analysis of influencing factors of ISR after PCI in patients with CHD［（），n（%）］

2.3 CHD 患者行PCI 手術后影響ISR 發生的多因素Logistic 回歸分析

結果顯示，LDL-C、合并糖尿病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21 是CHD 患者行PCI 手術后發生ISR 的影響因素（P＜0.05）。見表3。

表3 CHD 患者行PCI 手術后影響ISR 發生的多因素Logistic 回歸分析Table 3 Multivariate Logistic regression analysis of ISR in CHD patients after PCI

2.4 FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 單獨及聯合檢測對CHD 患者行PCI 手術后發生ISR 的預測價值

ROC 曲線結果顯示，FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者聯合檢測預測的AUC 為0.905，高于單一檢測（P＜0.05）。見表4、圖1。

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

表4 FGF21、Sfrp5 及miRNA-21 單獨及聯合檢測對CHD患者行PCI 手術后發生ISR 的預測價值Table 4 The predictive value of single and combined detection of FGF21，Sfrp5 and miRNA-21 for ISR after PCI in CHD patients

3 討論

CHD 是一種常見的心血管疾病，其主要特點是冠狀動脈供血不足導致心絞痛、心肌壞死等癥狀的發生［8］。PCI 是目前臨床公認治療CHD 的有效方式，具有微創性、恢復時間短、改善血液流通等優點，但PCI 治療會對動脈壁造成損傷，致使內膜增生、炎癥及形成血栓，從而引起血管壁血管重塑及形成新內膜，最終導致術后ISR 的發生，嚴重降低患者術后生存率［9］。目前臨床上診斷ISR 的金標準為冠狀動脈造影術，但其具有侵入性，且通過造影檢查確診ISR 時，患者已錯失最佳治療時機［10］。

FGF21 是FGF 內分泌亞家族的一員，主要在肝臟中分泌產生，能夠通過調節脂質代謝、改善胰島素敏感性以及減輕血管內皮炎癥等方式，發揮對心血管系統的保護作用［11］。徐紅新等［12］研究發現，CHD 患者FGF21 水平偏高，與本研究中的CHD 組FGF21 高于對照組結果一致。其原因可能為在CHD 疾病發展過程中，FGF21 水平作為血管損傷的一種代償保護機制而上升。Sfrp5 是由白色脂肪產生的抗炎脂肪因子，其主要通過抑制Wnt5通路激活來減輕炎癥及保護心臟損傷。本研究結果顯示，CHD 組患者Sfrp5 水平低于對照組，與王康等［13］研究結果不盡相同。究其原因，低表達的Sfrp5 水平表明機體存在心血管系統的損傷，因此CHD 患者Sfrp5 水平表達低于健康人群。miRNA是一種微型非編碼RNA 片段，參與多種生理病理過程。miRNA-21 是最早發現的miRNA 之一，參與內皮細胞分化、遷移及血管的生成。已有研究證實［14］，miRNA-21 水平在CHD 患者中呈現高表達狀態，可以作為心肌損傷的生物標志物。本研究結果中，CHD 組miRNA-21 高于對照組，與上述研究結果相符。

本研究結果顯示，LDL-C 及合并糖尿病亦是CHD 患者行PCI 手術后發生ISR 的影響因素，與崔新月等［15］研究結果相似。其原因可能為：LDL-C水平升高會導致血管內皮結構及功能破壞，引起炎癥反應［16］；糖尿病患者可能存在炎癥反應增強、胰島素抵抗、血流動力學改變、病變復雜化以及病理生理反應異常，這些因素共同影響動脈內皮修復過程，導致ISR 風險增高。

ROC 曲線結果表明上述指標對于預測患者PCI 術后發生ISR 均有較好的應用價值。推測其原因為，FGF21 是一種具有胰島素樣功能的因子，可以通過激活激酶1/2 及蛋白激酶B 的信號通路，增加脂肪細胞對脂質的攝取和血液中葡萄糖的再利用，其在體內的水平越高說明機體的脂肪和糖代謝失調越嚴重［17］，高水平的FGF21 表明患者存在代謝紊亂現象，因而動脈粥樣硬化及ISR 風險增加。Sfrp5 具有抑制Wnt 信號通路的功能，CHD 患者Sfrp5 水平降低表明Wnt 信號通路的活性增加，促進了異常血管內膜增生和炎癥反應發生，因此患者發生ISR 風險增加。miRNA-21 可以通過靶向SPRY1 基因來調控血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增殖和遷移，高水平的miRNA-21 表達可能反映患者存在VSMC 的異?；罨?，這是ISR 的主要病理過程［18］。同時，三者聯合檢測的AUC 為0.905，高于單一檢測，說明三者聯合檢測可以相互補充，減少其他ISR 發生影響因素的干預，從而提高對ISR 的預測效能。

綜上所述，血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21 在行PCI 手術后發生ISR 的CHD 患者中表達異常，聯合檢測三者水平對于預測CHD 患者PCI 術后發生ISR 具有較好的應用價值。臨床可密切關注患者上述指標水平變化，以及時對ISR 的發生進行干預及治療。