外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 在神經梅毒患者中的檢測意義

彭超 林陽 何俐

梅毒是一種常見的慢性、系統性、全身性傳染性疾病，主要由梅毒螺旋體（Treponema pallidum，TP）引起，主要傳播途徑為性傳播，間接接觸途徑為傳染、輸血、哺乳及胎盤等［1］。相關臨床實踐資料顯示，有部分梅毒患者經臨床統一規范治療后癥狀可得到顯著改善，但實驗室檢測血清學指標仍舊為持續陽性，進而發展成為血清固定；有部分患者由于TP 侵犯中樞神經系統而發展成為神經梅毒［2-3］。目前，梅毒進展為血清固定及神經梅毒的具體機制尚不明確，且缺乏根治治療手段，給臨床診療帶來了挑戰［4］。梅毒的發病和病情進展與細胞免疫異常密切聯系，但具體機制和相關指標尚未完全明確［5］。T 淋巴細胞是人體免疫系統中的重要成分，對于抵抗感染和疾病恢復具有關鍵作用；而白介素-4（Interleukin-4，IL-4）是一種由T 淋巴細胞分泌的細胞因子，在免疫反應和炎癥過程中發揮重要作用。趨化因子CXC 配體13（Chemokine CXC ligand 13，CXCL13）是一種小分子蛋白質，可以吸引白細胞遷移到炎癥部位。研究表明，CXCL13 在神經梅毒患者的腦脊液中表達水平升高，可能參與了神經梅毒的發病和進展［5］。本研究旨在分析外周血T 淋巴細胞、IL-4 及CXCL13 水平檢測在神經梅毒患者中的臨床意義，具體報道如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年9 月至2023 年1 月四川大學華西醫院收治的188 例梅毒患者作為研究對象，其中包括62 例血清固定患者（血清固定組）及126 例神經梅毒患者（神經梅毒組）。神經梅毒組根據TP 侵犯部位和癥狀［6］分為無癥狀31 例，早期（主要損害腦脊膜及血管）58 例及晚期（主要損害腦和脊髓實質）37 例。另選取同時期于本院門診和體檢就診的正常健康者（對照組）80 名。血清固定組男36例，女26 例，平均年齡（41.57±5.04）歲，平均病程（5.71±1.43）年；神經梅毒組男72 例，女54 例，平均年齡（42.21±1.66）歲，平均病程（5.93±1.51）年。對照組男46 例，女34 例，平均年齡（42.31±5.22）歲。三組在性別、年齡上比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經院醫學倫理委員會批準通過，受試者及其家屬已簽署知情同意書。

納入標準：①梅毒患者符合《2015 年美國疾病控制中心性傳播疾病診斷和治療指南中》［6］中梅毒及神經梅毒診斷標準；②全部研究對象18 歲以上者；③全部研究對象臨床資料齊全。排除標準：①合并惡性腫瘤者；②合并其他傳染病或結締組織疾病者；③合并其他性病者；④妊娠、孕婦者。

1.2 方法

對照組于就診當日，梅毒患者于入院次日晨起抽取靜脈血3 mL，注入紅色抗凝管中，及時送往實驗室，其中1.5 mL 進行離心（3 000 r/min，10 min，離心半徑8 cm），采取上清液；另1.5 mL 無需進行離心，均放置4℃冰箱以待檢測。采用流式細胞儀DxP Athena（杭州敬潤科技有限公司）檢測T 淋巴細胞亞群（抗凝全血）；采用酶聯免疫吸附法檢測IL-4、CXCL13 水平（血清）。IL-4、CXCL13 試劑盒均來自杭州聯科生物技術股份有限公司。

1.3 統計學方法

采用SPSS 21.0 軟件進行統計分析，計量資料以（）表示，兩組間比較采用獨立t檢驗，多組間比較采用單因素方差（F檢驗）；計數資料已n（%）表示，采用χ2檢驗；繪制ROC 曲線分析外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 聯合檢測對早期神經梅毒識別的診斷價值；以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同人群外周T 淋巴細胞亞群水平

CD4+、CD4+/CD8+值：神經梅毒組＜血清固定組＜對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同人群外周T 淋巴細胞亞群水平比較（）Table 1 Comparison of peripheral T lymphocyte subsets in different populations（）

表1 不同人群外周T 淋巴細胞亞群水平比較（）Table 1 Comparison of peripheral T lymphocyte subsets in different populations（）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與血清固定組比較，bP＜0.05。

2.2 不同人群IL-4 及趨化因子CXCL13 水平

IL-4、CXCL13 水平：神經梅毒組＞血清固定組＞對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同人群IL-4 及趨化因子CXCL13 水平比較（）Table 2 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different populations（）

表2 不同人群IL-4 及趨化因子CXCL13 水平比較（）Table 2 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different populations（）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與血清固定組比較，bP＜0.05。

2.3 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的外周T 淋巴細胞亞群水平

CD4+、CD4+/CD8+值：晚期組＜早期組＜無癥狀組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的外周T 淋巴細胞亞群水平比較（）Table 3 LComparison of peripheral T lymphocyte subsets in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

表3 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的外周T 淋巴細胞亞群水平比較（）Table 3 LComparison of peripheral T lymphocyte subsets in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

注：與無癥狀組比較，aP＜0.05；與早期組比較，bP＜0.05。

2.4 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的IL-4及趨化因子CXCL13 水平

IL-4、CXCL13 水平：晚期組＞早期組＞無癥狀組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的IL-4 及趨化因子CXCL13 水平比較（）Table 4 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

表4 神經梅毒組不同TP 侵犯部位和癥狀的IL-4 及趨化因子CXCL13 水平比較（）Table 4 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

注：與無癥狀組比較，aP＜0.05；與早期組比較，bP＜0.05。

2.5 外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13單一、聯合檢測對神經梅毒早期識別的診斷價值

ROC 顯示，外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 檢查靈敏度為89.68%，特異度為91.11%，AUC=0.862，均高于三指標單一檢查（P＜0.05）。見表5、圖1。

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

表5 外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 單一、聯合對神經梅毒早期識別的診斷價值Table 5 Diagnostic value of peripheral blood T lymphocytes，IL-4，and chemokine CXCL13 single and combined for early recognition of neurosyphilis

3 討論

據臨床實踐病例顯示，早期神經梅毒患者癥狀隱蔽，且癥狀與神經受累部位密切相關［7］。然而，影像學檢查在此類病例時缺乏特異性［8］。有數據顯示，梅毒患者若不及時予以規范統一治療，有將近1/3 患者可進展為晚期神經梅毒，對患者心腦血管系統均有嚴重影響，最終可導致患者死亡［9-10］。

本研究結果顯示：血清固定組及神經梅毒組外周血T 淋巴細胞中CD4+、CD4+/CD8+值顯著低于對照組，且神經梅毒組更低。CD4+T 細胞代表輔助性T 細胞分化抗原，若CD4+T 細胞減少，可能導致輔助性T 細胞的免疫應答減弱，影響抗梅毒螺旋體的免疫反應；CD8+T 細胞代表抑制性T 細胞分化抗原，若CD8+T 細胞減少，可能反映抑制性T 細胞的免疫應答減弱，導致炎癥反應的持續或加劇，故CD4+和CD8+T 細胞水平的表達與機體免疫功能有著直接聯系［11］。Brandt 和Hedrich 的研究表明［12］，梅毒血清固定患者較健康人群的CD4+T 淋巴細胞水平和CD4+/CD8+比值下降，本組研究結果與其一致。另一方面，在神經梅毒患者中，早期和晚期患者CD4+、CD4+/CD8+值較無癥狀者均顯著下降，晚期下降程度更大，提示T 淋巴細胞亞群與神經梅毒病情進展密切聯系。Logo 等［13］學者研究發現，神經梅毒患者與普通梅毒患者均出現了Th1/Th2 免疫漂移的現象，并且梅毒患者的血清IL-4 含量明顯增高。本數據分析提示IL-4 對于神經梅毒早期診斷有重要價值。分析原因為：IL-4 是炎性因子之一，主要為Th2 細胞產生，器能對細胞免疫功能進行抑制，對Th2 細胞具有促使分化定向的作用，因而IL-4 的異常往往提示機體免疫功能的異常，而隨著神經梅毒分期的進展，免疫應答過程中Th1 優勢變化逐漸轉變為Th2 優勢變化，免疫水平處于不斷降低過程，從而導致IL-4 水平逐漸上升［14-15］。CXCL13 是CXC 趨化因子家族的成員，主要由次級淋巴組織、淋巴結和樹突細胞分泌，可反映中樞神經系統感染后的免疫反應。既往臨床多研究腦脊液中CXCL13 在神經梅毒中的臨床意義。本組研究結果提示外周血CXCL13 表達異常對神經梅毒的早期診斷及病情評估也有著重要意義。經ROC 曲線進一步分析證實得：外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 聯合檢測在神經梅毒早期識別診斷中的應用價值更高，這一發現為神經梅毒的早期診斷提供了新的方向，有助于提高診斷準確性和及時性，從而改善患者的治療和預后。

綜上所述，外周血T 淋巴細胞、IL-4 及趨化因子CXCL13 水平變化與神經梅毒患者病情密切聯系，三者聯合檢測度對神經梅毒的早期識別診斷具有更好的靈敏度、特異度，在神經梅毒病情進展評估及臨床指導上具有更好的應用價值。