miRNA-223、miRNA-21 及miRNA-27a 與冠心病冠脈病變的關系

馬永 高輝 王明崗 趙斌

冠心?。–oronary heart disease，CHD）是目前全球發病率最高的心血管疾病，其主要是由于冠狀動脈出現狹窄以及腦供血不足，導致心肌細胞血液灌注不足或出現器質性病變。如今，隨著人們生活質量的逐漸提高，大多人飲食高脂肪、高糖、高熱量等食物，運動量亦降低，導致CHD 患病率、死亡率逐年增高，且呈年輕化。目前，CHD 極大威脅到人類生命安全，而冠狀動脈發生病變是CHD 發生、發展的病理基礎，但其致病基因及作用機制尚不明確［1］。在CHD 眾多候選基因中，微小RNAs（MicroRNAs，miRNAs）是研究最深入的基因之一。miRNAs是小分子單鏈RNA 的一種，常分布于真核細胞中，其主要參與基因轉錄后細胞的表達、調控。有研究報道，可通過監測miRNAs的表達水平判斷動脈粥樣斑塊是否發生，miRNAs參與心肌肥厚、心律失常及心力衰竭等多種心臟病理、生理過程［2］。miRNA-223一般用于調控內皮細胞、血小板功能，其與血栓性心血管疾病的發生、發展關系密切，可用于評估CHD 患者預后［3］。崔秋利等［4］將miRNA-21應用在小鼠實驗中發現，該基因可有效減少心肌細胞死亡面積，還有助于新生內膜增生。miRNA-27a常見于T 細胞、樹突狀細胞等免疫炎癥細胞中，該基因與發生心血管疾病的病理、生理過程方面關聯密切［5］。本文旨在探討miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a與冠心病冠脈病變的關系，現將研究結果報道如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年1 月至2022 年12 月商丘市第一人民醫院收治的CHD 患者86 例為觀察組，其中男50 例，女36 例；平均年齡（62.52±10.63）歲；平均體質量（22.15±1.36）kg/m2；平均CHD 病程（3.04±1.05）年；冠脈病變類型：急性心肌梗死患者31 例，不穩定型心絞痛29 例，穩定型心絞痛26 例；冠脈病變支數：單支26 例，雙支41 例，三支19 例。選取70 名同期院內健康體檢者作為對照組。對照組男39 例，女31 例；平均年齡（62.18±9.78）歲；平均BMI（22.51±1.48）kg/m2。兩組研究對象性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準同意。研究對象或家屬已簽署知情同意書。

觀察組納入標準：①均符合CHD 的相關診斷標準［6］；②臨床資料齊全；③排除器質性心臟病患者。排除標準：①合并其他惡性腫瘤者；②心理、精神異常者，無法正常交流；③重要器官功能不全者；④2 周內有手術史或創傷史；⑤器質性心臟病者；⑥急、慢性感染者；⑦免疫性疾病或結締組織疾病。

1.2 方法

外周血miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a檢測：所有受試者抽取清晨空腹外周血5 mL，送往實驗室，進行離心（3 500 r/min，離心半徑10 cm，15 min），采集血清。應用實時熒光定量PCR 技術檢測miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平，試劑盒均來自無錫天萃生物科技有限公司。嚴格按照說明書進行操作。

1.3 統計學方法

采用SPSS 21.0 統計軟件進行統計分析，計量資料采用（）表示，兩組間比較采用t檢驗；多組間采用F檢驗；采用Logistic 多因素分析影響CHD冠脈病變的相關因素；以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表達水平

觀察組miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表達水平比對照組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 1 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels between the two groups（）

表1 兩組血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 1 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels between the two groups（）

2.2 影響CHD 冠脈病變的相關因素分析

經logistic 多因素分析顯示，患有高血壓、糖尿病以及miRNA-223＞1.5、miRNA-21＞6.0、miRNA-27a＞5.5 均是影響CHD 冠脈病變的獨立危險因素（P＜0.05）。見表2。

表2 影響CHD 冠脈病變的相關因素Table 2 Relevant factors affecting coronary artery disease in CHD

2.3 不同CHD 冠脈病變類型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平

miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表達水平：急性心肌梗死＞不穩定型心絞痛＞穩定型心絞痛，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同CHD 冠脈病變類型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 3 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

表3 不同CHD 冠脈病變類型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 3 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

注：與急性心肌梗死相比較，aP＜0.05。與不穩定型心絞痛相比較，bP＜0.05。

2.4 不同CHD 冠脈病變支數的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平

miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表達水平：三支＞雙支＞單支，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同CHD 冠脈病變類型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 4 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

表4 不同CHD 冠脈病變類型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表達水平比較（）Table 4 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

注：與單支組比較，aP＜0.05。與雙支相比較，bP＜0.05。

3 討論

近年來CHD 的發病率、致死率呈逐漸上升趨勢，嚴重威脅到患者的生命健康安全，及時發現并檢測其病程進展以及判斷冠脈病變程度對CHD的防治至關重要［7］。有報道稱，miRNA參與CHD的發生、發展過程，其可通過判斷冠狀動脈斑塊的穩定性與炎癥反應的狀態，進而評估CHD 的發病風險［8］。

冠狀動脈粥樣硬化是CHD 的病理基礎，而miRNA-223可調控內皮細胞以及血小板的功能，進而影響血栓形成及動脈粥樣硬化。miRNA-223通過IGF-1R/PI3K/AKT 信號通路調控血管平滑肌細胞的增殖、遷移，牽張引力的作用使其在血管平滑肌細胞中的表達降低，從而激活PI3K/AKT 信號通路，促進血管平滑肌細胞增殖，參與調控動脈粥樣硬化及鈣化［9］。有研究稱，出現冠狀動脈粥樣硬化的小鼠外周血中的miRNA-223表達水平明顯增加［10］。李童［11］等研究發現，小鼠在完成體外心肌缺血/再灌注試驗后，其心臟細胞中miRNA-223表達水平上升，miRNA-223可作為改善心肌缺血損傷的重要因素，且miRNA-223可抑制炎癥反應，有助于修復心肌組織。在本次研究中，急性心肌梗死患者的miRNA-223表達水平顯著高于不穩定型心絞痛患者與穩定型心絞痛患者。分析原因在于：miRNA-223過度表達可加速內皮細胞凝固，形成血栓，從而加重CHD 冠脈病變程度。

miRNA-21是一種跨膜蛋白基因，其位于基因組的第17 個染色體上。有研究指出，當心肌細胞出現凋亡及缺血/再灌注時，miRNA-21全程參與該過程，且一定程度上可用于保護因缺血造成損傷的心肌細胞［12］。miRNA-21抑制劑會使miRNA-21的表達水平降低，加速過氧化氫所誘導的心肌細胞凋亡；但前體miRNA-21則會提高miRNA-21在外周血中的表達水平，從而達到降低心肌細胞凋亡風險的目的。本研究經logistic多因素分析顯示，miRNA-21＞6.0 是影響CHD 冠脈病變的獨立危險因素之一。在諸多心血管疾病中，miRNA-21表達異常升高，這提示miRNA-21 可能參與心血管疾病的病理、生理學改變。有學者認為，miRNA-21的異常表達與心肌肥大以及缺血性心肌病等疾病有一定關聯［13］。賈敏等［14］學者發現，miRNA-21在相同的心肌缺血時間與再灌注時間中的表達具有個體差異性，如大鼠在缺血30 min、再灌注24 h 時，發現miRNA-21的表達水平會呈現降低趨勢，而當小鼠缺血30 min、再灌注24 h 時，miRNA-21的表達水平卻呈升高趨勢，這說明miRNA-21的表達水平與心肌梗死的病理變化密切相關。

在本研究中，相較于對照組，CHD 患者的miRNA-27a表達水平顯著升高；而在CHD 患者中，急性心肌梗死患者的miRNA-27a的表達水平明顯高于穩定型心絞痛患者與不穩定型心絞痛患者。miRNA-27a表達過度會抑制組織因子途徑抑制物α 表達，進而有效降低組織因子途徑抑制物α 的抗凝活性，增加心血管疾病的發生風險［15］。

綜上所述，不同冠脈病變CHD 患者miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表達水平不同，提示以上指標對判斷CHD 患者冠脈病變類型具有一定的臨床價值。