MCUS 聯合CYFRA21-1、TAP 及SCCA 檢測在食管癌術前分期診斷中的應用

劉潔 李澤宇 高倩 賈璐璐

食管癌是臨床常見的、致死率較高的消化系統惡性腫瘤，其早期癥狀隱匿，絕大多數患者確診時已進入中-晚期病程，治療干預效果差。相關研究認為，治療前準確的影像學分期可使患者得到更加合理的治療方案，有效提高預后［1］。探頭超聲內鏡（Mini-probe endoscopic ultrasonography，MCUS）是基于傳統超聲內鏡附加微探頭，其兼顧傳統內鏡與超聲的作用，不僅可仔細觀察到腫瘤病變的形態，還可分辨腫瘤的浸潤程度［2］。在臨床上腫瘤標志物不僅可用于輔助診斷食管癌，并在一定程度上可判斷腫瘤的發展進程以及評估患者預后［3］。細胞角蛋白19 片段抗原（Cytokerantin-19-fragment，CYFRA21-1）、鱗狀細 胞癌抗 原（Squamous cell carcinoma antigen，SCCA）是常見的腫瘤血清標志物，可對食管癌的發病情況進行評估。腫瘤異常蛋白（Tumor abnormal ptotein，TAP）是腫瘤細胞完成代謝后分泌的一種糖蛋白，其可判斷腫瘤的發生以及評估腫瘤的發展進程［4］。對此，本文旨在分析MCUS 聯合CYFRA21-1、TAP 及SCCA 檢測在食管癌術前分期診斷中的應用價值。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年8 月至2022 年11 月期間于鄭州大學第一附屬醫院進行治療的食管癌患者137 例為研究對象。納入標準：①均符合食管癌的診斷標準［5］；②既往未采用手術治療、化療治療者；③臨床資料完整者；排除標準：①合并患有其他部位惡性腫瘤；②轉移性食管癌；③具有精神、語言障礙者；④重要器官功能衰竭者。其中男86 例，女51 例；平均年齡（55.74±5.38）歲；腫瘤部位：上段食管19 例，中段食管70 例，下段食管48 例；病理分型或組織學分型：鱗狀細胞癌117 例，腺樣結構食管癌12 例，小細胞神經內分泌癌8 例；病理學分 期［6］：T1患者27 例，T2患者31 例，T3患者59 例，T4患者20 例；分化程度：低分化32 例；中分化60 例，高分化45 例；TNM 分期：Ⅰ～Ⅱ期76 例，Ⅲ～Ⅳ期61 例。本研究經醫院倫理委員會批準同意。所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 CYFRA21-1、SCCA 檢測

抽取兩組研究對象5 mL 空腹靜脈血，所有樣本均在室溫下放置30 min，使用血型血清學離心機HT12MM（轉速為3 500 r/min、離心半徑為8 cm）離心8 min，提取血清，于4℃保存。采用磁微?；瘜W發光法檢測CYFRA21-1（試劑由泰州澤成生物技術有限公司提供）。采用電化學發光法對SCCA 進行檢測，儀器采用：Roche 電化學發光儀E170 型號，試劑與儀器均由瑞士Roche 公司提供。嚴格按照試劑盒說明書執行。

1.2.2 T AP 檢測

采集患者3 mL 血液，加凝聚助劑干燥，制成血液標本，利用生物顯微鏡、攝像機圖像傳感器、計算機TAP 檢測系統進行觀察、檢測。陽性：觀察到有TAP 顆粒，且顆粒呈現網結狀花。陰性：TAP顆粒呈雪花狀、散沙狀或樹枝狀，且為黑褐色［7］。

1.2.3 MCUS 檢查

應用Olympus XQ200 電子胃鏡與Fujinon SP-501 MCUS，調整頻率至15～20 Hz，探頭直徑為2.6 cm，進行360°全方位旋轉掃描，并采用Sony UP-8900 超聲黑白打印機進行檢測?；颊咴跈z查前肌注地西泮（西安利君制藥有限責任公司；國藥準字H61 022214；規格2 mL：10 mg）5～10 mg，囑其采取半坐臥位，自制水囊套在內鏡前端，插入病灶節段后，注入無氣水20～30 mL，直至水囊充盈且緊貼病灶。將微型探頭從內鏡活檢孔中送進食管，再慢慢退出，并在直視下掃描病灶全段。正常食管癌MCUS 圖像顯示為5 層結構：黏膜層、黏膜肌層、黏膜下層、固有肌層以及外膜。腫瘤侵犯標準［8］：食管癌各架構的增厚、中斷或破壞，不均勻的軟組織回聲影，或腫瘤與周圍組織界線的消失或融合。MCUS 分期標準［8］：T1：腫瘤侵犯黏膜或黏膜下層邊界不清，固有肌層尚完整；T2：腫瘤侵犯但未超過固有肌層；T3：腫瘤侵犯至食管周遭組織，但未侵犯臨近器官；T4：腫瘤侵犯至臨近器官。

1.2.4 病理學分期標準［7］

T1：腫瘤僅侵犯食管黏膜或黏膜下層；T2：腫瘤侵犯食管肌層；T3：腫瘤侵犯食管外膜層；T4：腫瘤侵犯周圍組織或臨近器官。

1.3 觀察指標

分析血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 陽性表達聯合MCUS 分期對食管癌病理學分期的診斷價值：包括敏感度、特異度及準確率，n 代表總例數，a 表示真陽性，b 表示假陽性，c 表示假陰性，d 表示真陰性，靈敏度=a/（a+c），特異度=d/（b+d），準確率=（a+d）/n。

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0 統計軟件進行統計分析，計量資料采用（）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間采用F檢驗；計數資料通過n（%）表示，并采用χ2檢驗；均以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 MCUS 分期與病理學分期的關系

MCUS 診斷食管癌病理學分期的綜合準確率為88.89%。見表1。

表1 食管癌MCUS 分期與病理學分期的關系Table 1 Relationship between MCUS stage and pathological stage of esophageal carcinoma

2.2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 陽性表達與病理特征的關系

血清CYFRA21-1、SCCA 水平：T3-4＞T1-2、低分化＞高、中分化、Ⅲ～Ⅳ期＞Ⅰ～Ⅱ期，差異有統計學意義（P＜0.05）；不同病理分期、分化程度以及TNM分期的TAP 陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 陽性表達與病理特征的關系［（），n（%）］Table 2 Relationship between serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression with pathological features［（），n（%）］

表2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 陽性表達與病理特征的關系［（），n（%）］Table 2 Relationship between serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression with pathological features［（），n（%）］

2.3 MCUS 分期與血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 陽性表達之間的關系

T1與T2期的 血清CYFRA21-1、SCCA 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；T3、T4期較T1與T2期患者的血清CYFRA21-1、SCCA 水平升高，差異具有統計學意義（P＜0.05）；MCUS 不同分期的TAP陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 MCUS 分期與血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP陽性表達之間的關系［（），n（%）］Table 3 Relationship between MCUS staging and serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression［（），n（%）］

表3 MCUS 分期與血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP陽性表達之間的關系［（），n（%）］Table 3 Relationship between MCUS staging and serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression［（），n（%）］

注：與T1 相比較，aP＜0.05；與T2 相比較，bP＜0.05；與T3 相比較，cP＜0.05。

2.4 血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 陽性表達聯合MCUS 分期與病理學分期的比較

在MCUS 判斷T 分期過度的11 例患者中，有8 例MCUS 定為T3期，在分期過低的6 例患者中，有3 例MCUS 定為T2期。血清CYFRA21-1、SCCA水平、TAP 陽性表達聯合MCUS 檢查對食管癌病理學分期判斷的準確率提高至95.62%。見表4。

表4 血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 陽性表達聯合MCUS 分期與病理學分期的比較Table 4 Comparison of serum CYFRA21-1，SCCA levels，TAP positive expression combined with MCUS staging and pathological staging

3 討論

食管癌是常見的消化道腫瘤，其發病率位于全部惡性腫瘤的第六位，死亡率位于全部惡性腫瘤的第四位，其主要與飲食、生活習慣、癌前疾病、感染和遺傳等因素有關。食管癌早期癥狀一般較輕，持續時間較短，常反復出現，而中晚期癥狀主要為吞咽困難、反流、疼痛。

MCUS 結合超聲與內鏡技術，近距離在食管內掃描，不僅可顯示黏膜病變程度，還可判斷腫瘤浸潤深度，該技術現已被廣泛運用于診斷食管癌的術前分期。本次研究發現，MCUS 判斷食管癌病理學分期的準確率較高（88.89%），尤其是對早期腫瘤浸潤的判斷，但對于T2與T3病變的判斷則有一定誤差。當食管癌處于T2與T3病變病變時，腫瘤周圍發生炎性改變和纖維化，因此易高估病變的T 分期［9］。此外，何建斌等［10］學者亦指出，MCUS 對食管癌患者T 分期的診斷存在差異，原因在于探頭的探測范圍有限，對于腫瘤的深層浸潤難以檢測，且周圍氣管內的氣體會影響檢測結果。

當機體內出現腫瘤細胞時，蛋白酶被充分激活，進而加快細胞降解速度，造成過多細胞角蛋白片段進入血液，使血清CYFRA21-1 濃度異常升高［11］。SCCA 在正常機體內表達水平較低，但當出現食管鱗癌病變時，會大量生成SCCA2 編碼的酸性產物，進而導致血清SCCA 表達水平明顯上升，且其水平變化與食管癌細胞的活躍程度有一定關聯。有研究稱，聯合CYFRA21-1、SCCA 檢測食管癌的準確度會大幅度提高，一定程度上避免了單獨檢測出現漏診等情況，還可有效提高診斷的陽性檢出率［12-13］。本文顯示，隨著分期的增加，CYFRA21-1、SCCA 水平也呈異常升高狀態。故可通過檢測CYFRA21-1、SCCA 等標志物為臨床診斷食管癌提供一定參考。

TAP 是癌細胞增生的重要特征，可通過監測其基因水平的變化，從而了解癌細胞病變TAP 數量及程度。當癌變細胞的TAP 數量及程度達到一定量時就會向血液擴散，從而導致外周血中的TAP 水平明顯升高［14］。故可通過檢測TAP 的表達水平了解食管癌癌細胞的變化情況，從而評估患者病情程度，輔助診斷。研究報道，TAP 檢測結果為陰性并不代表不存在癌細胞，可能是癌細胞的代謝水平較低，導致TAP 分泌、合成能力降低，因此TAP 檢測結果為陰性的患者實際上也可能存在癌細胞［15］。因此，TAP 檢測對病情評估及疾病診斷方面具有參考價值，但其于食管癌發生、發展的相關性有待進一步證實。本研究結果說明以上指標聯合檢測可提高對食管癌分期的診斷效能，MCUS、血清CYFRA21-1、SCCA 水平彌補了TAP檢測技術中對疾病病變的了解程度，TAP 則是增加了對腫瘤細胞直接作用的了解，進而提高了診斷的準確性。

綜上所述，MCUS 聯合血清CYFRA21-1、SCCA 水平及TAP 檢測可準確診斷食管癌術前分期，可為臨床治療食管癌提供可靠依據。